褪黑激素作为慢性牙周炎的辅助疗法。

介绍

慢性牙周炎是由牙龈卟啉单胞菌、福赛坦纳氏菌和齿状密螺旋体等被统称为“红色复合体”的特定微生物引起的牙支持器局部慢性炎症。 据揭示，牙周组织损伤始于炎症性中性粒细胞介导的反应，随后是单核细胞的慢性浸润。 先前的研究报道，大多数牙周组织破坏是由宿主对上述特定牙周病原菌的免疫反应直接引起的。

几年前，宿主调节疗法（HMT）作为治疗破坏性牙周病的新概念出现。 HMT 的目的是通过减少宿主免疫反应的破坏性臂并增强其再生功能来减少牙周组织损伤。 HMT 包括全身或局部递送的治疗剂，用作常规牙周治疗的辅助手段。

多种不同的药物已被评估为宿主调节疗法，例如非甾体抗炎药 (NSAID)、四环素和双膦酸盐。 全身性或局部用非甾体抗炎药在长期使用时会出现严重的严重不良事件，停用后会出现“反弹”效应。 亚抗菌剂量的多西环素 (SDD) 与慢性牙周炎的非手术治疗相结合显示出有益的结果；然而，注意到一些与四环素相关的不良反应，尤其是光敏性。 双膦酸盐已被证明可显着增加牙槽骨密度并具有抗胶原酶活性，但是，长期使用它们可能导致颌骨缺血性坏死，尤其是在拔牙后。 因此，全世界的研究人员都在不断寻找新的宿主调节剂以用作牙周病的辅助治疗。

迄今为止，褪黑激素（N-乙酰基-5-甲氧基色胺）是一种经过充分研究的内源性吲哚胺，主要由松果体分泌，负责调节睡眠/觉醒周期。 褪黑激素具有多种基本特性，例如抗炎、抗氧化、肿瘤抑制和神经保护作用。 此外，最近发现褪黑激素通过下调核 к-B 配体 (RANKL) 受体激活剂来促进成骨细胞分化并抑制破骨细胞形成。 在大鼠脂多糖诱导的实验性牙周炎中，与未接受治疗的大鼠相比，局部应用褪黑激素可显着降低骨吸收。 因此，有人提出局部应用的褪黑激素可以作为常规牙周治疗的辅助手段，包括刮治和根面平整 (SRP)，以及牙周外科治疗。

最近的研究表明，牙周病患者的唾液褪黑激素水平显着降低，这表明褪黑激素可以作为牙周诊断的生物标志物，并可作为不同牙周病的潜在治疗方法。 最近，在患有牙周病的糖尿病患者的附着牙龈上局部应用 1% 褪黑激素凝胶可显着降低牙周袋深度和牙龈指数，并降低治疗后血清 IL-6 和 C 反应蛋白水平。

因此，我们假设在患有原发性失眠症的全身性慢性牙周炎 (gCP) 患者中，每日膳食补充褪黑激素辅助 SRP 进行牙周治疗可以改善牙周结果。 因此，本临床试验的目的是评估在 gCP 患者治疗 3 个月和 6 个月后，与含 SRP 的安慰剂相比，每日补充褪黑激素对 SRP 的辅助治疗是否能改善临床牙周参数并降低唾液 TNF-α 水平和原发性失眠。

材料和方法

研究人群：

本研究根据 2013 年第七次修订的赫尔辛基宣言进行，并经曼苏拉大学机构审查委员会 (IRB) 批准。 在 2016 年 7 月至 2017 年 9 月访问曼苏拉大学牙科学院的牙周诊所期间选择了个人。 要求个人回答准备好的关于他们的一般医疗状况和睡眠/觉醒习惯的问卷，然后诊断牙周状况以选择符合条件的参与者。 如果患者的雅典失眠量表 (AIS) 评分≥ 6，则认为患者有资格参与（前提是个人患有原发性失眠，根据国际睡眠障碍分类 ICSD-3，这种失眠与任何其他全身性原因或药物摄入无关）。 每个选定的患者应至少有 20 颗牙齿。 根据 Armitage 的分类，纳入的患者被诊断为患有中度至重度 gCP。 排除标准包括糖尿病、吸烟者、夜班人员、癌症患者、自身免疫性疾病或骨质疏松症患者、最近 3 个月内使用抗生素或非甾体类抗炎药的患者以及在此期间接受过任何牙周治疗的患者去年。 登记的患者在参与临床试验之前签署了知情同意书。

试验设计：

74 名被诊断患有 gCP 和原发性失眠症的患者通过掷硬币随机分配接受 10 mg 口服褪黑激素胶囊（Puritan's Pride, Inc., Holbrook, NY, USA），每天睡前服用一次，持续两个月，并结合 SRP（ MTN+SRP 组，n = 38），或在此双盲平行随机对照试验 (RCT) 中匹配安慰剂胶囊 2 个月加 SRP（安慰剂 + SRP 组，n = 36）。 随机化过程是在工作研究者不在场的情况下进行的。 由第三方（药剂师）将密封的玻璃瓶装入 30 粒褪黑激素或匹配的安慰剂胶囊，然后用工作研究人员和患者不知道的特定标签进行编码。 两组患者都被要求在睡前从给定的瓶子中服用一粒胶囊。 患者的依从性通过在每个月底计算返回瓶中的剩余胶囊来评估。 在两个月内每周监测给定药物的副作用。 所有患者都在经验丰富的牙周病医生的单次就诊中接受了使用超声波洁牙机和手刮匙的细致彻底的 SRP。 对于所有参与者，都给予了严格的口腔卫生指导，并在 SRP 后开出了为期两周的 0.12% 氯己定漱口水。

牙周记录：

在基线、治疗 3 个月和 6 个月时记录牙周指标，包括牙周袋深度 (PD)、临床附着水平 (CAL)、以百分比表示的二分式探诊出血 (BOP)、牙龈 (GI) 和菌斑 (PI) 指数单考官。 为了实现检查者内部校准，在 RCT 实施前的 2 天内对 10 名患者进行了两次牙周测量。 当两次测量的 PD 和 CAL 的测量值在 90% 以上的所有测量值中的差异在 1 mm 以内时，校准被批准。

唾液收集：

唾液样本在早上 8 点到 10 点之间从所有参与者禁食过夜后收集。 所有参与者都被要求在兴奋后不要喝任何饮料，除了水。 在记录临床测量值之前，将未受刺激的完整唾液样本通过咳出收集到 5 mL 无菌聚丙烯管中。 将所有唾液样本离心以去除碎片，并立即冷冻并储存在 -80ºC 直至评估时间。

生化评估：

通过酶联免疫吸附测定 (ELISA) 测定唾液中的 TNF-α 水平。 将唾液样品移入干净的微盖管中，并以 10,000 × g 离心 5 分钟。 然后，将上清液置于干净的微盖管中并立即用于 ELISA 测定。 根据制造商的建议，使用人-TNF-α ELISA 开发套件（R&D systems，Abingdon Science Park，Abingdon，UK）来量化唾液样本中的该分子。 唾液 TNF-α 测定的结果表示为每毫升纳克的浓度。

试用结果：

本随机对照试验的主要结果是治疗 3 个月和 6 个月后临床附着增益 (CAG) 的变化，而次要终点包括口袋深度、BOP% 和唾液 TNF-α 水平在 3 个月和 6 个月后的变化。 6个月。

药物不良反应的评估：

在 SRP 后每周记录全身体征和症状，并在前两个月开始服药。 在 RCT 结束时，根据需要安排接受额外牙周治疗的患者。

统计分析：

此 RCT 的功效达到 80% 水平，以检测组间 PD 和 CAL 的平均减少等于 0.5 mm 的差异。 计算得出的达到 80% 功效所需的最小样本量为每组 30 名患者。 Kolmogrov-Smirnov 正态性检验用于探索数据正态性。 参数数据表示为平均值±SD，除了唾液 TNF-α 浓度表示为平均值±SEM（平均值的标准误差）。 使用学生 t 检验比较基线数据。 使用用于多重比较的 Holm-Sidak 事后校正的单向方差分析 (ANOVA) 来确定不同时间点的显着差异。 显着性水平调整为 5%。 使用社会科学统计软件包 v. 20, SPSS, Chi-cago, IL 进行统计分析。