Melatonina jako terapia wspomagająca przewlekłego zapalenia przyzębia.

PRZEDSTAWIENIE SIĘ

Przewlekłe zapalenie przyzębia jest miejscowym, przewlekłym zapaleniem aparatu podtrzymującego ząb, inicjowanym przez określone mikroorganizmy, w tym Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia i Treponema denticola, które wspólnie określa się mianem „czerwonego kompleksu”. Wykazano, że uszkodzenie tkanek przyzębia rozpoczyna się od reakcji zapalnej, w której pośredniczą neutrofile, po której następuje przewlekły naciek monocytów. Wcześniejsze badania wykazały, że większość zniszczeń tkanek przyzębia jest bezpośrednio spowodowana odpowiedzią immunologiczną gospodarza na wyżej wymienione specyficzne bakterie paradontogenne.

Kilka lat temu jako nowa koncepcja leczenia destrukcyjnych chorób przyzębia pojawiła się terapia modulacyjna gospodarza (HMT). Celem HMT jest zmniejszenie uszkodzenia tkanek przyzębia poprzez zmniejszenie destrukcyjnego ramienia odpowiedzi immunologicznej gospodarza i wzmocnienie jego cech regeneracyjnych. HMT obejmuje ogólnoustrojowe lub miejscowe środki lecznicze, które są wykorzystywane jako uzupełnienie konwencjonalnego leczenia periodontologicznego.

Oceniono wiele różnych leków jako leków modulujących gospodarza, takich jak niesteroidowe leki przeciwzapalne (NLPZ), tetracykliny i bisfosfoniany. Ogólnoustrojowe lub miejscowe NLPZ wywoływały znaczące, poważne działania niepożądane, gdy były stosowane przez długi czas, a po zaprzestaniu ich stosowania obserwowano efekt „z odbicia”. Subantybakteryjna dawka doksycykliny (SDD) wykazała korzystne wyniki w połączeniu z niechirurgicznym leczeniem przewlekłego zapalenia przyzębia; niemniej jednak odnotowano pewne działania niepożądane związane z tetracyklinami, zwłaszcza nadwrażliwość na światło. Udowodniono, że bisfosfoniany znacząco zwiększają gęstość kości wyrostka zębodołowego i wykazują działanie przeciwkolgenazowe, jednak ich długotrwałe stosowanie może prowadzić do jałowej martwicy kości szczęki, zwłaszcza po ekstrakcji zęba. Dlatego naukowcy na całym świecie nieustannie poszukują nowych środków modulujących gospodarza, które można by stosować jako leczenie wspomagające w chorobach przyzębia.

Do tej pory melatonina (N-acetylo-5-metoksytryptamina) jest dobrze poznaną, endogenną indoloaminą, wydzielaną głównie z szyszynki i odpowiedzialną za regulację cyklu snu i czuwania. Melatonina posiada szereg istotnych właściwości, takich jak działanie przeciwzapalne, przeciwutleniające, onkostatyczne i neuroprotekcyjne. Ponadto niedawno stwierdzono, że melatonina promuje różnicowanie osteoblastów i hamuje tworzenie osteoklastów poprzez regulację w dół aktywatora receptora jądrowego ligandu к-B (RANKL). W eksperymentalnym zapaleniu przyzębia wywołanym przez lipopolisacharydy u szczurów miejscowo stosowana melatonina znacznie zmniejszała resorpcję kości w porównaniu ze szczurami, które nie były leczone. W związku z tym zaproponowano, że melatonina stosowana miejscowo może służyć jako uzupełnienie konwencjonalnych zabiegów periodontologicznych, w tym skalingu i wygładzania korzeni (SRP), jak również chirurgicznej terapii periodontologicznej.

Ostatnie badania wykazały, że poziom melatoniny w ślinie był znacznie obniżony u pacjentów z chorobami przyzębia, co sugeruje, że melatonina może służyć jako biomarker w diagnostyce przyzębia i być stosowana jako potencjalny środek terapeutyczny w różnych chorobach przyzębia. Ostatnio miejscowe stosowanie 1% żelu melatoniny na przyczepione dziąsła u osób z cukrzycą i chorobami przyzębia spowodowało znaczne zmniejszenie głębokości kieszonek i wskaźnika dziąseł, a także niższe poziomy IL-6 i białka C-reaktywnego w surowicy po terapii.

W związku z tym postawiliśmy hipotezę, że leczenie periodontologiczne z codzienną suplementacją melatoniny w diecie jako uzupełnienie SRP u pacjentów z uogólnionym przewlekłym zapaleniem przyzębia (gCP) cierpiących na pierwotną bezsenność może poprawić wyniki leczenia przyzębia. Dlatego celem niniejszego badania klinicznego jest ocena, czy terapia wspomagająca codzienną suplementacją melatoniny do SRP w porównaniu z placebo z SRP poprawia kliniczne parametry przyzębia i obniża poziom TNF-α w ślinie po 3 i 6 miesiącach terapii u pacjentów z gCP i pierwotną bezsenność.

MATERIAŁY I METODY

Badana populacja:

Niniejsze badanie zostało przeprowadzone zgodnie z siódmą rewizją Deklaracji Helsińskiej z 2013 roku i zatwierdzone przez Institutional Review Board (IRB) Uniwersytetu Mansoura. Osoby zostały wyselekcjonowane podczas wizyt w klinikach periodontologii na Wydziale Stomatologii Uniwersytetu Mansoura w okresie od lipca 2016 do września 2017. Osoby zostały poproszone o udzielenie odpowiedzi na przygotowane kwestionariusze dotyczące ich ogólnego stanu zdrowia i nawyków związanych ze snem / przebudzeniem, a następnie zdiagnozowanie stanu przyzębia w celu wybrania kwalifikujących się uczestników. Pacjenci zostali uznani za kwalifikujących się do udziału, jeśli uzyskali wynik ≥ 6 w Ateńskiej Skali Bezsenności (AIS) (pod warunkiem, że osoby cierpią na bezsenność pierwotną niezwiązaną z innymi przyczynami ogólnoustrojowymi lub przyjmowaniem leków zgodnie z Międzynarodową Klasyfikacją Zaburzeń Snu, ICSD-3). Każdy wybrany pacjent powinien mieć co najmniej 20 zębów. U włączonych pacjentów zdiagnozowano umiarkowaną do ciężkiej gCP na podstawie klasyfikacji Armitage'a. Kryteria wykluczenia obejmowały cukrzycę, palaczy, osoby pracujące na nocnych zmianach, chorych na nowotwory, pacjentów z chorobami autoimmunologicznymi lub osteoporozą, stosujących antybiotyki lub niesteroidowe leki przeciwzapalne w ciągu ostatnich 3 miesięcy oraz pacjentów poddanych jakiejkolwiek terapii periodontologicznej w ciągu ostatnich 3 miesięcy. zeszły rok. Zakwalifikowani pacjenci podpisywali świadomą zgodę przed udziałem w badaniu klinicznym.

Projekt próbny:

Siedemdziesięciu czterech pacjentów, u których zdiagnozowano gCP i pierwotną bezsenność, zostało losowo przydzielonych przez rzut monetą do grupy otrzymującej doustnie kapsułkę melatoniny 10 mg (Puritan's Pride, Inc., Holbrook, NY, USA) raz dziennie przed snem przez dwa miesiące w połączeniu z SRP. grupa MTN+SRP, n = 38) lub pasujące kapsułki placebo przez 2 miesiące plus SRP (grupa placebo+SRP, n = 36) w tym podwójnie ślepym, równoległym randomizowanym badaniu kontrolowanym (RCT). Proces randomizacji przeprowadzono pod nieobecność pracujących badaczy. Przez stronę trzecią (farmaceutę) zapieczętowane szklane butelki zostały zapakowane z 30 kapsułkami melatoniny lub pasującego placebo, a następnie oznaczone specjalnymi etykietami nieznanymi pracującym badaczom i pacjentom. Pacjenci w obu grupach zostali poinstruowani, aby przyjmować jedną kapsułkę przed snem z podanej butelki. Zgodność pacjentów oceniano przez zliczanie pozostawionych kapsułek w zwracanej butelce pod koniec każdego miesiąca. Działania niepożądane podanych leków monitorowano co tydzień przez dwa miesiące. Wszyscy pacjenci otrzymali skrupulatnie dokładne SRP ze skalerem ultradźwiękowym i kiretami ręcznymi podczas jednej wizyty doświadczonego periodontologa. Wszystkim uczestnikom udzielono ścisłych instrukcji dotyczących higieny jamy ustnej i przepisano płyn do płukania jamy ustnej z 0,12% chlorheksydyną przez dwa tygodnie po SRP.

Zapisy periodontologiczne:

Pomiary przyzębia, w tym głębokość kieszonek (PD), kliniczny poziom przyczepu (CAL), dychotomiczne krwawienie podczas sondowania (BOP) wyrażone w procentach, wskaźniki dziąseł (GI) i płytki nazębnej (PI) rejestrowano na początku leczenia, 3 i 6 miesięcy terapii przez jeden egzaminator. Aby uzyskać kalibrację wewnątrz-badacza, wykonano dwukrotnie pomiary periodontologiczne u 10 pacjentów w ciągu 2 dni przed przeprowadzeniem RCT. Kalibracja została zatwierdzona, gdy pomiary PD i CAL w dwóch czasach wykazywały różnicę w granicach 1 mm w ponad 90% wszystkich pomiarów.

Pobieranie śliny:

Próbki śliny pobierano rano między 8 a 10 rano od wszystkich uczestników po całonocnym poście. Wszystkich uczestników poproszono, aby po pobudzeniu nie pili żadnych napojów poza wodą. Całe próbki niestymulowanej śliny zebrano przez odkrztuszanie do 5 ml sterylnych probówek polipropylenowych przed zarejestrowaniem pomiarów klinicznych. Wszystkie próbki śliny odwirowano w celu usunięcia zanieczyszczeń i natychmiast zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C do czasu oceny.

Ocena biochemiczna:

Poziom TNF-α oznaczano w ślinie za pomocą testu immunoenzymatycznego (ELISA). Próbki śliny odpipetowano do czystych probówek z mikrozakrętkami i wirowano przy 10 000 x g przez 5 minut. Następnie supernatanty umieszczono w czystych probówkach z mikrozakrętkami i natychmiast użyto do testu ELISA. Zestaw rozwojowy Human-TNF-α ELISA (R&D systems, Abingdon Science Park, Abingdon, Wielka Brytania) zastosowano do ilościowego oznaczenia tej cząsteczki w próbkach śliny zgodnie z zaleceniami producentów. Wyniki testu TNF-α w ślinie wyrażono jako stężenia w nanogramach na mililitr.

Wyniki próby:

Pierwszorzędowym wynikiem niniejszego RCT była zmiana klinicznego wzmocnienia przyczepu (CAG) po 3 i 6 miesiącach terapii, natomiast drugorzędowymi punktami końcowymi była zmiana głębokości kieszonek, % BOP oraz stężenia TNF-α w ślinie po 3 i 6 miesiącach leczenia. 6 miesięcy.

Ocena niepożądanych skutków leków:

Ogólnoustrojowe oznaki i objawy rejestrowano co tydzień po SRP i rozpoczęciu przyjmowania leków w ciągu pierwszych dwóch miesięcy. Na koniec RCT pacjenci wskazani do dodatkowych zabiegów periodontologicznych zostali zaplanowani w razie potrzeby.

Analizy statystyczne:

Ten RCT był zasilany do poziomu 80%, aby wykryć średnią redukcję PD i CAL równą 0,5 mm różnicy między grupami. Obliczona minimalna wielkość próby wymagana do osiągnięcia 80% mocy wynosiła 30 pacjentów na grupę. Do zbadania normalności danych zastosowano test normalności Kołmogrowa-Smirnowa. Dane parametryczne przedstawiono jako średnią ± SD, z wyjątkiem stężeń TNF-α w ślinie, które wyrażono jako średnią ± SEM (błąd standardowy średniej). Dane wyjściowe porównano stosując test t-Studenta. Jednokierunkowa analiza wariancji (ANOVA) z poprawką post hoc Holma-Sidaka dla porównań wielokrotnych została wykorzystana do określenia znaczących różnic w różnych punktach czasowych. Poziom istotności skorygowano o 5%. Analizy statystyczne przeprowadzono przy użyciu Statistical Package for the Social Sciences v. 20, SPSS, Chi-cago, IL.