炎症对微量营养素状况评估的影响

背景：

亚临床微量营养素缺乏仍然是营养不良的一个隐藏方面，缺乏全面的数据。 定义亚临床微量营养素缺乏症需要考虑炎症的流行及其对基于生化指标评估的微量营养素缺乏症解释的影响。 这项研究将全面介绍生活在人口稠密的城市贫民窟中的一群幼儿的微量营养素状况和抗菌素耐药性。

假设：

I. 炎症会影响一些常用于解释儿童微量营养素状况的生化指标 II。 使用带有微量采样器的手指/脚跟采血样本可以成功进行微量营养素评估，从而增加血液采集的便利性并降低冷藏和运输到分析实验室的成本。

具体的目标：

我们的主要目标是研究炎症对用于解释儿童微量营养素状况的几种生化测量的影响。 我们的次要目标是测试血点装置的适用性，以便在现场环境中确定微量营养素状况。 我们的探索性目标是对儿童肠道抗菌素耐药基因 (AMR) 和耐药基因组谱进行比较分析。

方法：

共有 40 名婴儿（9-18 个月大）将参与这项研究。 在这项研究中，研究人员将使用两种不同的稳定同位素维生素 A，例如 13C10-乙酸视黄酯和 13C4-乙酸视黄酯。 400 μg 这些同位素溶解在 0.5 mL 葵花籽油中，将使用直接替换移液管直接送入婴儿口中。 母亲将被要求在口服给药后母乳喂养婴儿以增强标记的维生素 A 的吸收。血液样本中 13C10- 和 13C4- 醋酸视黄酯的比活性将通过液相色谱-串联质谱法 (LC/MS/MS) 测量). 在采血当天，将使用 24 小时饮食回顾和每周发病率问卷。 研究人员还将使用 PENTA 疫苗作为诱导受控炎症的手段（与自然感染非常相似）。 PENTA 是五种不同疫苗抗原（乙型肝炎 (HBV)/b 型流感嗜血杆菌 (Hib)/破伤风-白喉-全细胞百日咳 (TDwP)）的组合。 这种疫苗接种对婴儿有益​​，因为世界卫生组织建议加强疫苗接种剂量。 在研究结束时，还将向“未接种疫苗”组中的研究婴儿提供 PENTA 疫苗。

在第 0 天，所有婴儿 (n=40) 将接受口服剂量的 13C10-视黄醇乙酸酯，并在第 4 天采集血液样本 (5 mL)。在第 7 天，所有婴儿 (n=40) 还将接受另一种口服剂量的 13C4-醋酸视黄酯。 3 天后随机选择 30 名婴儿将接种 PENTA 疫苗（第 10 天），而其他 10 名婴儿将不接种疫苗。 接种疫苗后 24 小时，将从接种疫苗组的婴儿身上采集手指血样，以测量 CRP（QuikRead go，Orion，Finland）。 在同一天（第 11 天），将从疫苗组发生炎症（CRP> 5mg/L）的婴儿和对照组（第 11 天）的婴儿中获取血样（5 mL）。 因此，第 4 天和第 11 天的血浆微量营养素和维生素 A 储存量估计将评估炎症对血浆微量营养素状态指标和全身维生素 A 储存量的影响。 血液微量采样器将与静脉采血一起进行测试，以评估手指/足跟采血的可行性。 将收集粪便样本、当地地表水和废水样本，以检测儿童及其环境中 AMR 耐药性的流行情况。

结果测量/变量：

1. 将在炎症前和炎症后 24 小时评估以下血浆生物标志物

   • 炎症标志物：C-反应蛋白（CRP）（mg/L）和α1-酸性糖蛋白（AGP）（g/L）
   • 维生素 A 状态指标：视黄醇 (nmol/L)、全身维生素 A 储存量 (nmol)、视黄醇结合蛋白 (RBP) (mg/L) 和 β-胡萝卜素 (nmol/L)
   • 铁状态指标：铁蛋白（ug/L）和可溶性转铁蛋白受体（mg/L）
   • 叶酸/B12状态指标：叶酸（nmol/L）、甲基丙二酸（umol/L）和钴胺素（pmol/L）
   • 微量元素状态指标：硒（ug/L）、铜（ug/L）和甲状腺球蛋白（ug/L）。
2. 微量采样器设备用于收集血液样本以供将来进行微量营养素评估的用途。
3. 评估和对比 AMR 基因丰度和多样性以开发抗性组