Influência da inflamação na avaliação do status de micronutrientes

Fundo:

Deficiências subclínicas de micronutrientes continuam sendo um aspecto oculto da desnutrição para o qual faltam dados abrangentes. Definir deficiências subclínicas de micronutrientes requer considerar a prevalência de inflamação e suas implicações para a interpretação das deficiências de micronutrientes com base na avaliação de indicadores bioquímicos. Este estudo fornecerá um perfil abrangente do status de micronutrientes e resistência antimicrobiana em uma coorte de crianças que vivem na favela urbana densamente povoada.

Hipótese:

I. A inflamação pode influenciar várias medidas bioquímicas comumente usadas para interpretar o status de micronutrientes em crianças II. As avaliações de micronutrientes podem ser realizadas com sucesso usando amostras de sangue de picada no dedo/calcanhar com microamostradores, aumentando assim a facilidade de coleta de sangue e reduzindo os custos de armazenamento a frio e transporte para o laboratório analítico.

Objetivos específicos:

Nosso objetivo principal é investigar os efeitos da inflamação em várias medidas bioquímicas usadas para interpretar o status de micronutrientes em crianças. Nosso objetivo secundário é testar a aplicabilidade de um dispositivo de coleta de sangue que permite a determinação do status de micronutrientes em ambientes de campo. Nosso objetivo exploratório é fazer uma análise comparativa dos genes de resistência antimicrobiana intestinal (AMR) e do perfil resistômico em crianças.

Métodos:

Um total de 40 bebês (9-18 meses de idade) participarão deste estudo. Neste estudo, os investigadores usarão dois isotópicos diferentes de vitamina A estável, por exemplo, acetato de 13C10-retinil e acetato de 13C4-retinil. 400 μg desses isótopos, dissolvidos em 0,5 mL de óleo de girassol, serão fornecidos diretamente na boca da criança usando uma pipeta de substituição direta. As mães serão solicitadas a amamentar seus bebês após a administração oral para aumentar a absorção da vitamina A marcada. A atividade específica de 13C10- e 13C4- acetato de retinol nas amostras de sangue será medida por cromatografia líquida-espectrometria de massa tandem (LC/MS/MS ). No dia da coleta de sangue, serão utilizados recordatório alimentar de 24 horas e questionários semanais de morbidade. Os investigadores também usarão as vacinas PENTA como um meio de induzir inflamação controlada (imita de perto a infecção natural). PENTA é uma combinação de cinco antígenos vacinais diferentes (Hepatite B (HBV)/Haemophilus influenza tipo b (Hib)/Tétano-Difteria-Pertussis de células inteiras (TDwP)). Esta vacinação é benéfica para os lactentes, uma vez que a Organização Mundial de Saúde recomenda uma dose de vacinação de reforço. No final do estudo, as vacinas PENTA também serão fornecidas aos bebês do estudo no grupo "sem vacina".

No dia 0, todos os bebês (n=40) receberão uma dose oral de acetato de 13C10-retinil, e amostras de sangue (5 mL) serão coletadas no dia 4. No dia 7, todos os bebês (n=40) também receberão outra dose oral de acetato de 13C4-retinil. 3 dias depois, 30 bebês selecionados aleatoriamente receberão vacinas PENTA (dia 10), enquanto os outros 10 bebês não receberão vacinas. 24 horas após a vacinação, uma amostra de sangue por picada no dedo será obtida dos lactentes do grupo vacinado para medir a PCR (QuikRead go, Orion, Finlândia). No mesmo dia (dia 11), serão obtidas amostras de sangue (5 mL) de lactentes que desenvolverem inflamação (PCR > 5mg/L) no grupo vacina e também de lactentes do grupo controle (dia 11). Assim, as estimativas de micronutrientes plasmáticos e reservas de vitamina A no dia 4 e dia 11 avaliarão os efeitos da inflamação nos indicadores de status de micronutrientes plasmáticos e no armazenamento corporal total de vitamina A. Os microamostradores de sangue serão testados juntamente com a coleta de sangue venoso para avaliar a viabilidade da amostragem por picada no dedo/calcanhar. Amostras fecais, águas superficiais locais e amostras de águas residuais serão coletadas para testar a prevalência de resitomas AMR em crianças e seu ambiente.

Medidas/variáveis ​​de resultado:

1. Os seguintes biomarcadores plasmáticos serão estimados antes da inflamação e 24 horas após a inflamação

   • Marcadores de inflamação: proteína C reativa (PCR) (mg/L) e α1-glicoproteína ácida (AGP) (g/L)
   • Indicadores de status de vitamina A: retinol (nmol/L), reservas corporais totais de vitamina A (nmol), proteína de ligação ao retinol (RBP) (mg/L) e beta-caroteno (nmol/L)
   • Indicadores de status de ferro: ferritina (ug/L) e receptor de transferrina solúvel (mg/L)
   • Indicadores de status de folato/B12: folato (nmol/L), ácido metilmalônico (umol/L) e cobalamina (pmol/L)
   • Indicadores de status de oligoelementos: selênio (ug/L), cobre (ug/L) e tireoglobulina (ug/L).
2. A utilidade de um dispositivo de microamostragem para coletar amostras de sangue para futuras avaliações de micronutrientes.
3. Avaliação e contraste da abundância e diversidade do gene AMR para desenvolver resistomas