Влияние воспаления на оценку статуса микроэлементов

Фон:

Субклинический дефицит микронутриентов остается скрытым аспектом недостаточности питания, по которому отсутствуют исчерпывающие данные. Определение субклинической недостаточности питательных микроэлементов требует учета распространенности воспаления и его последствий для интерпретации дефицита питательных микроэлементов на основе оценки биохимических показателей. Это исследование предоставит всесторонний профиль состояния питательных микроэлементов и устойчивости к противомикробным препаратам в группе детей младшего возраста, живущих в густонаселенных городских трущобах.

Гипотеза:

I. Воспаление может влиять на некоторые биохимические показатели, которые обычно используются для интерпретации статуса микронутриентов у детей. II. Оценка питательных микроэлементов может быть успешно выполнена с использованием образцов крови, взятых из пальца/пятки, с микропробами, что упрощает сбор крови и снижает затраты на хранение в холодильнике и транспортировку в аналитическую лабораторию.

Конкретные цели:

Нашей основной целью является изучение влияния воспаления на несколько биохимических показателей, используемых для интерпретации статуса микронутриентов у детей. Нашей вторичной целью является проверка применимости устройства для взятия капель крови, позволяющего определять статус питательных микроэлементов в полевых условиях. Наша исследовательская цель - провести сравнительный анализ генов резистентности кишечника к противомикробным препаратам (AMR) и профиля резистома у детей.

Методы:

Всего в этом исследовании примут участие 40 младенцев (в возрасте 9-18 месяцев). В этом исследовании исследователи будут использовать два разных стабильных изотопа витамина А, например, 13C10-ретинилацетат и 13C4-ретинилацетат. 400 мкг этих изотопов, растворенных в 0,5 мл подсолнечного масла, будут введены ребенку непосредственно в рот с помощью сменной пипетки. Матерей попросят кормить ребенка грудью после перорального приема, чтобы улучшить усвоение меченого витамина А. Удельная активность 13C10- и 13C4-ретинилацетата в образцах крови будет измеряться с помощью жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии (ЖХ/МС/МС). ). В день забора крови будут использоваться 24-часовой отзыв о питании и еженедельные анкеты о заболеваемости. Исследователи также будут использовать вакцины PENTA в качестве средства для индукции контролируемого воспаления (близко имитирующего естественную инфекцию). PENTA представляет собой комбинацию пяти различных вакцинных антигенов (гепатит B (HBV)/гемофильная инфекция типа b (Hib)/столбняк-дифтерия-цельноклеточный коклюш (TDwP)). Эта вакцинация полезна для младенцев, поскольку Всемирная организация здравоохранения рекомендует ревакцинацию. В конце исследования вакцины PENTA также будут предоставлены исследуемым младенцам в группе «без вакцин».

В 0-й день все младенцы (n=40) получат пероральную дозу 13C10-ретинилацетата, а образцы крови (5 мл) будут взяты на 4-й день. На 7-й день все младенцы (n=40) также получат еще одну дозу. пероральная доза 13C4-ретинилацетата. Через 3 дня случайно выбранные 30 младенцев получат вакцины PENTA (10-й день), а остальные 10 младенцев вакцин не получат. Через 24 часа после вакцинации у младенцев в вакцинированной группе будет взят образец крови из пальца для измерения СРБ (QuikRead go, Orion, Финляндия). В тот же день (день 11) образцы крови (5 мл) будут получены у младенцев, у которых развилось воспаление (CRP> 5 мг/л) в вакцинированной группе, а также у младенцев в контрольной группе (день 11). Таким образом, оценка запасов микроэлементов и витамина А в плазме на 4-й и 11-й день позволит оценить влияние воспаления на показатели статуса микроэлементов в плазме и общий запас витамина А в организме. Микропробы крови будут протестированы вместе с забором венозной крови, чтобы оценить возможность взятия проб из пальца/пятки. Образцы фекалий, местные поверхностные воды и образцы сточных вод будут собираться для проверки распространенности резитомов УПП у детей и их окружающей среды.

Показатели/переменные результатов:

1. Следующие биомаркеры плазмы будут оцениваться до воспаления и через 24 часа после воспаления.

   • Маркеры воспаления: С-реактивный белок (СРБ) (мг/л) и α1-кислый гликопротеин (АГП) (г/л)
   • Показатели статуса витамина А: ретинол (нмоль/л), общие запасы витамина А в организме (нмоль), ретинолсвязывающий белок (RBP) (мг/л) и бета-каротин (нмоль/л)
   • Показатели статуса железа: ферритин (мкг/л) и растворимый рецептор трансферрина (мг/л)
   • Индикаторы статуса фолиевой кислоты/B12: фолиевая кислота (нмоль/л), метилмалоновая кислота (умоль/л) и кобаламин (пмоль/л)
   • Индикаторы микроэлементного статуса: селен (мкг/л), медь (мкг/л) и тироглобулин (мкг/л).
2. Полезность устройства микросэмплера для сбора образцов крови для будущих оценок питательных микроэлементов.
3. Оценка и сопоставление обилия и разнообразия генов AMR для развития резистомов