Influencia de la inflamación en la evaluación del estado de micronutrientes

Fondo:

Las carencias subclínicas de micronutrientes siguen siendo un aspecto oculto de la malnutrición para el que se carece de datos exhaustivos. Definir las deficiencias subclínicas de micronutrientes requiere considerar la prevalencia de la inflamación y sus implicaciones para la interpretación de las deficiencias de micronutrientes con base en la evaluación de indicadores bioquímicos. Este estudio proporcionará un perfil integral del estado de los micronutrientes y la resistencia a los antimicrobianos en una cohorte de niños pequeños que viven en barrios marginales urbanos densamente poblados.

Hipótesis:

I. La inflamación puede influir en varias medidas bioquímicas que se usan comúnmente para interpretar el estado de micronutrientes en los niños II. Las evaluaciones de micronutrientes se pueden realizar con éxito utilizando muestras de sangre obtenidas por punción en el dedo o el talón con micromuestreadores, lo que aumenta la facilidad de la extracción de sangre y reduce los costos de almacenamiento en frío y transporte al laboratorio analítico.

Objetivos específicos:

Nuestro objetivo principal es investigar los efectos de la inflamación en varias medidas bioquímicas utilizadas para interpretar el estado de micronutrientes en los niños. Nuestro objetivo secundario es probar la aplicabilidad de un dispositivo de gotas de sangre que permita la determinación del estado de micronutrientes en entornos de campo. Nuestro objetivo exploratorio es realizar un análisis comparativo de los genes de resistencia antimicrobiana intestinal (AMR) y el perfil de resistomas en niños.

Métodos:

Un total de 40 bebés (9-18 meses de edad) participarán en este estudio. En este estudio, los investigadores utilizarán dos diferentes isótopos estables de vitamina A, por ejemplo, 13C10-acetato de retinilo y 13C4-acetato de retinilo. Se suministrarán 400 μg de estos isótopos, disueltos en 0,5 ml de aceite de girasol, directamente en la boca del lactante mediante el uso de una pipeta de reemplazo directo. Se pedirá a las madres que amamanten a su bebé después de la administración oral para mejorar la absorción de la vitamina A etiquetada. La actividad específica de 13C10- y 13C4-acetato de retinilo en las muestras de sangre se medirá mediante cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC/MS/MS ). El día de la extracción de sangre se utilizará un recordatorio dietético de 24 horas y cuestionarios de morbilidad semanales. Los investigadores también utilizarán las vacunas PENTA como un medio para inducir una inflamación controlada (muy parecida a la infección natural). PENTA es una combinación de cinco antígenos vacunales diferentes (Hepatitis B (VHB)/Haemophilus influenza tipo b (Hib)/Tétanos-Difteria-Tos ferina de células enteras (TDwP)). Esta vacunación es beneficiosa para los bebés ya que la Organización Mundial de la Salud recomienda una dosis de vacunación de refuerzo. Al final del estudio, también se administrarán las vacunas PENTA a los bebés del estudio en el grupo "sin vacuna".

El día 0, todos los bebés (n=40) recibirán una dosis oral de 13C10-acetato de retinilo y se tomarán muestras de sangre (5 ml) el día 4. El día 7, todos los bebés (n=40) también recibirán otra dosis oral de 13C4-acetato de retinilo. 3 días después, 30 bebés seleccionados al azar recibirán vacunas PENTA (día 10), mientras que los otros 10 bebés no recibirán vacunas. 24 horas después de la vacunación, se obtendrá una muestra de sangre por punción digital de los lactantes del grupo vacunado para medir la PCR (QuikRead go, Orion, Finlandia). El mismo día (día 11), se obtendrán muestras de sangre (5 mL) de los lactantes que desarrollen inflamación (PCR > 5 mg/L) en el grupo vacunado y también de los lactantes del grupo control (día 11). Por lo tanto, las estimaciones de las reservas de vitamina A y micronutrientes plasmáticos en los días 4 y 11 evaluarán los efectos de la inflamación en los indicadores del estado de micronutrientes plasmáticos y la reserva corporal total de vitamina A. Los micromuestreadores de sangre se probarán junto con la recolección de sangre venosa para evaluar la viabilidad de la toma de muestras por punción en el dedo o el talón. Se recolectarán muestras de heces, aguas superficiales locales y muestras de aguas residuales para evaluar la prevalencia de resitomas AMR en los niños y su entorno.

Medidas de resultado/variables:

1. Los siguientes biomarcadores plasmáticos se estimarán antes de la inflamación y 24 horas después de la inflamación

   • Marcadores de inflamación: proteína C reactiva (PCR) (mg/L) y glicoproteína ácida α1 (AGP) (g/L)
   • Indicadores del estado de la vitamina A: retinol (nmol/L), reservas corporales totales de vitamina A (nmol), proteína fijadora de retinol (RBP) (mg/L) y betacaroteno (nmol/L)
   • Indicadores del estado del hierro: ferritina (ug/L) y receptor de transferrina soluble (mg/L)
   • Indicadores de estado de folato/B12: folato (nmol/L), ácido metilmalónico (umol/L) y cobalamina (pmol/L)
   • Indicadores de estado de oligoelementos: selenio (ug/L), cobre (ug/L) y tiroglobulina (ug/L).
2. La utilidad de un dispositivo micromuestreador para recolectar muestras de sangre para futuras evaluaciones de micronutrientes.
3. Evaluación y contraste de la abundancia y diversidad de genes AMR para desarrollar resistomas