G-AgP 患者牙周治疗前后的 GCF HIF-1α、VEGF 和 TNF-α 水平。

研究人群和临床检查

本研究共招募了 40 人。 纳入标准包括：1) 年龄在 25 至 45 岁之间 2) 没有吸烟史的非吸烟者 3) 至少有 20 颗天然牙齿。 排除标准如下： 1) 患有糖尿病、心血管疾病、类风湿性关节炎、免疫和皮肤粘膜疾病等任何已确诊的医学疾病 2) 在过去 6 个月内使用过抗生素、非甾体类抗炎药和免疫抑制剂 3 ) 患有任何非炎症性破坏性牙周病 4) 在过去一年中接受过非手术/手术牙周治疗 5) 具有修复和牙髓治疗要求 6) 具有正畸矫治器或可摘局部义齿 7) 孕妇/哺乳期/绝经后女性。

全口临床牙周检查包括每颗牙齿 6 个位点的探诊深度（PPD）、临床附着水平（CAL）、探诊出血（BOP）、牙龈指数（GI）和菌斑指数（PI）的测量，除了第三磨牙。 在每个参与者的数字全景 X 光片上评估牙槽骨丢失的存在和类型，必要时辅以根尖周 X 光片。

每位患者的牙周状况由一位经过校准的牙周病医生使用手动探针进行评估。 根据 1999 年国际牙周病分类确定 G-AgP 或牙周健康的诊断。 G-AgP组患者（n=20）除第一磨牙和切牙外至少三颗牙齿显示CAL≥5mm和PPD≥6mm。 X 线骨质流失≥根长的 30%，影响除第一磨牙和切牙外的 ≥3 颗牙齿。 这种普遍的严重破坏模式与微生物沉积物的数量不一致。 患者至少有一名其他家庭成员出现严重牙周病或有严重牙周病史。 对照组中的牙周健康个体 (n=20) 没有 PPD > 3 mm 和 CAL > 2 mm 的部位，也没有牙槽骨丢失的影像学证据。 全口BOP<15%。

治疗

招募的 G-AgP 患者在局部麻醉下接受了为期 3 周的常规象限缩放和根面计划 (SRP)。 SRP 由同一名牙周病医生（研究者记录的牙周参数不同）使用超声插入物和手动牙周刮匙进行。 在右下象限的 SRP 完成后的 1 个月和 3 个月进行了重新评估。 牙周健康对照组不进行牙周干预。

GCF抽样

GCF 在右上象限治疗前即刻从 G-AgP 组基线时两个最深的单根牙袋中取样。 在右下象限完成 SRP 后，在相同地点重复取样。 GCF 是从单根牙齿中两个不相邻的邻间部位的颊侧取样的。 从牙周健康组中没有 BOP 的部位采集样本。 标准化滤纸条用于 GCF 采样。 将无菌纸条轻轻插入牙龈沟或袋中，直到感觉到轻微阻力，然后放置 30 秒。 用预先校准的电子设备测量吸收的液体体积。 纸条储存在 -40°C 以供进一步分析。

GCF 中 HIF-1α、VEGF 和 TNF-α 水平的测量

汇集两条纸条，置于 300 µL PBS-T (0.05%) 中。 GCF 样品中的 HIF-1α、VEGF 和 TNF-α 水平使用符合制造商指南的商业试剂盒通过酶联免疫吸附测定进行测量。 GCF 结果表示为每个采样时间两个站点的总量。

统计分析

所有统计分析均使用标准统计软件包进行。 对于组内比较，如果数据不受正常干扰，则使用Friedman检验和Dunn检验以及Bonferroni校正来分析基线与治疗后1个月和3个月之间的变化。 对于组间比较，Mann-Whitney U 检验正常和非正常干扰数据。 采用Spearman秩相关检验检测病组治疗前后生化参数与临床参数及相互之间的相关性。 所有测试均在 P <0.05 的显着性水平下进行。