Livelli di GCF HIF-1α, VEGF e TNF-α in pazienti con G-AgP prima e dopo il trattamento parodontale.

Popolazione in studio ed esame clinico

Un totale di 40 individui sono stati reclutati per il presente studio. I criteri di inclusione includevano: 1) età compresa tra 25 e 45 anni 2) non fumatori senza storia di fumo 3) con almeno 20 denti naturali. I criteri di esclusione erano i seguenti: 1) presenza di disturbi medici diagnosticati come diabete mellito, malattie cardiovascolari, artrite reumatoide, malattie immunologiche e mucocutanee 2) uso di antibiotici, farmaci antinfiammatori non steroidei e agenti immunosoppressori negli ultimi 6 mesi 3 ) con qualsiasi malattia parodontale distruttiva non infiammatoria 4) terapia parodontale non chirurgica/chirurgica ricevuta nell'ultimo anno 5) con necessità di trattamento riparativo ed endodontico 6) con apparecchi ortodontici o protesi parziale rimovibile 7) donne in gravidanza/allattamento/postmenopausa.

L'esame parodontale clinico della bocca intera comprendeva la misurazione della profondità di sondaggio (PPD), del livello di attacco clinico (CAL), della presenza di sanguinamento al sondaggio (BOP), dell'indice gengivale (GI) e dell'indice di placca (PI) in 6 siti per dente, ad eccezione del terzi molari. La presenza e il tipo di perdita ossea alveolare sono stati valutati sulla radiografia panoramica digitale in ciascun partecipante, che è stata integrata con radiografie periapicali se necessario.

Lo stato parodontale di ciascun paziente è stato valutato da un singolo parodontologo calibrato con una sonda manuale. La diagnosi di G-AgP o salute parodontale è stata determinata secondo la classificazione internazionale delle malattie parodontali nel 1999. I pazienti nel gruppo G-AgP (n=20) avevano un minimo di tre denti oltre ai primi molari e agli incisivi che mostravano CAL ≥5 mm e PPD ≥6 mm. La perdita ossea radiografica era ≥30% della lunghezza della radice interessando ≥3 denti diversi dai primi molari e dagli incisivi. Questo modello generalizzato di grave distruzione era incoerente con la quantità di depositi microbici. I pazienti avevano almeno un altro membro della famiglia che presentava o aveva una storia di gravi problemi parodontali. Gli individui parodontalmente sani (n=20) nel gruppo di controllo non presentavano siti con PPD >3 mm e CAL >2 mm e nessuna evidenza radiografica di perdita ossea alveolare. BOP era <15% in tutta la bocca.

Trattamento

I pazienti reclutati con G-AgP hanno ricevuto il ridimensionamento del quadrante convenzionale e la pianificazione radicolare (SRP) in anestesia locale per 3 settimane. L'SRP è stato eseguito dallo stesso parodontologo (che era diverso dai parametri parodontali registrati dallo sperimentatore) utilizzando inserti ad ultrasuoni e curette parodontali manuali. Le rivalutazioni sono state eseguite a 1 e 3 mesi dopo il completamento dell'SRP nel quadrante in basso a destra. Nessun intervento parodontale è stato effettuato nei controlli parodontalmente sani.

Campionamento GCF

GCF è stato campionato da due tasche più profonde di denti a radice singola al basale nel gruppo G-AgP immediatamente prima del trattamento del quadrante superiore destro. Il campionamento è stato ripetuto negli stessi siti dopo il completamento dell'SRP nel quadrante in basso a destra. GCF è stato campionato dagli aspetti vestibolari di due siti interprossimali non adiacenti in denti a radice singola con. I campioni sono stati raccolti dai siti senza BOP nel gruppo parodontalmente sano. Per il campionamento GCF sono state utilizzate strisce di carta da filtro standardizzate. Strisce di carta sterili sono state inserite delicatamente nel solco gengivale o nella tasca fino a quando non si è avvertita una leggera resistenza e lasciate lì per 30 secondi. Il volume del fluido assorbito è stato misurato con un dispositivo elettronico precalibrato. Le strisce di carta sono state conservate a -40◦C per ulteriori analisi.

Misurazione dei livelli di HIF-1α, VEGF e TNF-α in GCF

Due strisce di carta sono state raggruppate, poste in 300 µL di PBS-T (0,05%). I livelli di HIF-1α, VEGF e TNF-α nei campioni GCF sono stati misurati mediante il test dell'immunosorbente legato all'enzima utilizzando kit commerciali in linea con le linee guida del produttore. I risultati GCF sono stati espressi come entrambi gli importi totali in due siti per tempo di campionamento.

Analisi statistica

Tutte le analisi statistiche sono state effettuate con il pacchetto software statistico standard. Per i confronti intragruppo, se i dati non erano normalmente alterati, sono stati utilizzati il ​​test di Friedman e il test di Dunn con la correzione di Bonferroni per analizzare la variazione tra il basale e 1 mese e 3 mesi dopo il trattamento. Per i confronti tra gruppi, test U di Mann-Whitney per dati normalmente e non normalmente disturbati. Il test di correlazione del rango di Spearman è stato utilizzato per rilevare le correlazioni dei parametri biochimici con i parametri clinici e tra loro nel gruppo malato prima e dopo il trattamento. Tutti i test sono stati eseguiti a un livello di significatività di P <0,05.