GCF HIF-1α-, VEGF- ja TNF-α-tasot G-AgP-potilailla ennen ja jälkeen parodontaalihoidon.

Tutkimuspopulaatio ja kliininen tutkimus

Tähän tutkimukseen rekrytoitiin yhteensä 40 henkilöä. Osallistumiskriteereinä olivat: 1) 25–45-vuotiaat 2) tupakoimattomat, jotka eivät ole tupakoineet 3) joilla on vähintään 20 luonnollista hammasta. Poissulkemiskriteerit olivat seuraavat: 1) sinulla on diagnosoitu lääketieteellinen sairaus, kuten diabetes mellitus, sydän- ja verisuonitaudit, nivelreuma, immunologiset ja ihotaudit 2) antibioottien, ei-steroidisten tulehduskipulääkkeiden ja immunosuppressiivisten aineiden käyttö viimeisen 6 kuukauden aikana 3 ) jolla on ei-inflammatorinen vaurioittava parodontaalisairaus 4) ei-kirurginen/kirurginen parodontaalihoito viimeisen vuoden aikana 5) jolla on korjaava ja endodonttinen hoitotarve 6) jolla on oikomislaitteet tai irrotettava osittainen hammasproteesi 7) raskaana olevat/imettävät/postmenopausaaliset naiset.

Koko suun kliiniseen parodontaalitutkimukseen sisältyi koetussyvyyden (PPD), kliinisen kiinnittymisen tason (CAL), verenvuodon mittaamisen koetusvaiheessa (BOP), ienindeksin (GI) ja plakkiindeksin (PI) mittaamisen 6 kohdassa hammasta kohti, paitsi kolmannet poskihampaat. Alveolaarisen luukadon esiintyminen ja tyyppi arvioitiin kullakin osallistujalla digitaalisella panoraamaröntgenkuvalla, jota täydennettiin tarvittaessa periapikaalisilla röntgenkuvilla.

Yksi kalibroitu parodontologi arvioi jokaisen potilaan parodontaalisen tilan manuaalisella anturilla. G-AgP-diagnoosi eli parodontaalin terveys määritettiin kansainvälisen periodontaalisten sairauksien luokituksen mukaan vuonna 1999. G-AgP-ryhmän potilailla (n = 20) oli vähintään kolme hammasta ensimmäisten poskihampaiden ja etuhampaiden välissä, ja niissä oli CAL ≥5 mm ja PPD ≥6 mm. Radiologinen luukado oli ≥ 30 % juuren pituudesta ja vaikutti ≥ 3 muuhun hampaan kuin ensimmäiset poskihampaat ja etuhampaat. Tämä yleinen vakavan tuhoutumisen malli oli ristiriidassa mikrobikerrostumien määrän kanssa. Potilailla oli ainakin yksi muu perheenjäsen, jolla oli vakavia parodontaalisia ongelmia. Periodontaalisesti terveillä henkilöillä (n=20) kontrolliryhmässä ei ollut kohtia, joissa PPD >3 mm ja CAL >2 mm, eikä myöskään röntgenkuvaa alveolaarisesta luukadosta. BOP oli alle 15 % koko suussa.

Hoito

Rekrytoidut G-AgP-potilaat saivat tavanomaista kvadranttiskaalausta ja juurisuunnittelua (SRP) paikallispuudutuksessa 3 viikon ajan. SRP suoritti sama parodontologi (joka oli eri kuin tutkija kirjasi parodontaaliparametreja) käyttämällä ultraääni-inserttejä ja manuaalisia parodontaalikyreettejä. Uudelleenarvioinnit suoritettiin 1 ja 3 kuukauden kuluttua SRP:n valmistumisesta oikeassa alakulmassa. Periodontaalista interventiota ei suoritettu periodontaalisesti terveillä kontrolleilla.

GCF-näytteenotto

GCF otettiin kahdesta syvimmästä yksijuuristen hampaiden taskusta lähtötasolla G-AgP-ryhmässä juuri ennen oikean yläkvadrantin hoitoa. Näytteenotto toistettiin samoissa paikoissa SRP:n valmistumisen jälkeen oikeassa alakulmassa. GCF otettiin näytteet posken näkökulmasta kahdesta ei vierekkäisestä interproksimaalisesta kohdasta yksijuurisissa hampaissa. Näytteet kerättiin paikoista, joissa ei ollut BOP:ta parodontaalisesti terveessä ryhmässä. GCF-näytteenottoon käytettiin standardoituja suodatinpaperiliuskoja. Steriilejä paperiliuskoja työnnettiin varovasti ikenen uurteeseen tai taskuun, kunnes tunsi lievää vastustusta, ja jätettiin sinne 30 sekunniksi. Absorboituneen nesteen tilavuus mitattiin esikalibroidulla elektronisella laitteella. Paperiliuskoja säilytettiin -40 °C:ssa lisäanalyysiä varten.

HIF-1a-, VEGF- ja TNF-a-tasojen mittaus GCF:ssä

Kaksi paperiliuskaa yhdistettiin ja asetettiin 300 ul:aan PBS-T:tä (0,05 %). GCF-näytteissä olevat HIF-1a-, VEGF- ja TNF-a-tasot mitattiin entsyymi-immunosorbenttimäärityksellä käyttäen kaupallisia tarvikkeita valmistajan ohjeiden mukaisesti. GCF-tulokset ilmaistiin molempina kokonaismäärinä kahdessa paikassa näytteenottoaikaa kohden.

Tilastollinen analyysi

Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin standarditilastoohjelmistopaketilla. Ryhmän sisäisissä vertailuissa, jos tiedot eivät olleet normaalisti häiriintyneet, Friedman-testiä ja Dunn-testiä Bonferroni-korjauksella käytettiin analysoimaan muutosta lähtötilanteen ja 1 kuukauden ja 3 kuukauden hoidon jälkeen. Ryhmien välisiä vertailuja varten Mann-Whitney U -testi normaalisti ja ei-normaalisti häiriintyneille tiedoille. Spearmanin rankkorrelaatiotestiä käytettiin biokemiallisten parametrien ja kliinisten parametrien sekä toistensa korrelaatioiden havaitsemiseen sairastuneessa ryhmässä ennen ja jälkeen hoidon. Kaikki testit suoritettiin merkitsevyystasolla P <0,05.