Hladiny GCF HIF-1α, VEGF a TNF-α u pacientů s G-AgP před a po parodontální léčbě.

Studijní populace a klinické vyšetření

Do této studie bylo přijato celkem 40 jedinců. Kritéria zařazení zahrnovala: 1) ve věku 25 až 45 let 2) nekuřáky bez předchozího kouření 3) s alespoň 20 přirozenými zuby. Kritéria vyloučení byla následující: 1) mít jakékoli diagnostikované zdravotní poruchy, jako je diabetes mellitus, kardiovaskulární onemocnění, revmatoidní artritida, imunologická a mukokutánní onemocnění, 2) užívání antibiotik, nesteroidních protizánětlivých léků a imunosupresiv během posledních 6 měsíců 3 ) s jakýmkoli nezánětlivým destruktivním onemocněním parodontu 4) s nechirurgickou/chirurgickou parodontologickou terapií přijatou v minulém roce 5) s požadavkem na restorativní a endodontické ošetření 6) s ortodontickým aparátem nebo snímatelnou částečnou zubní protézou 7) těhotné/kojící/ postmenopauzální ženy.

Klinické parodontologické vyšetření celých úst zahrnovalo měření hloubky sondování (PPD), úrovně klinického připojení (CAL), přítomnosti krvácení při sondování (BOP), gingiválního indexu (GI) a indexu plaku (PI) na 6 místech na zub, kromě třetí stoličky. Přítomnost a typ alveolární kostní ztráty byly hodnoceny na digitálním panoramatickém rentgenovém snímku u každého účastníka, který byl v případě potřeby doplněn o periapikální rentgenové snímky.

Parodontální stav každého pacienta byl hodnocen jedním kalibrovaným parodontologem s manuální sondou. Diagnóza G-AgP neboli periodontální zdraví byla stanovena podle Mezinárodní klasifikace parodontálních nemocí v roce 1999. Pacienti ve skupině G-AgP (n=20) měli minimálně tři zuby kromě prvních molárů a řezáků s CAL ≥5 mm a PPD ≥6 mm. Radiografický úbytek kostní hmoty byl ≥ 30 % délky kořene postihující ≥ 3 zuby jiné než první stoličky a řezáky. Tento obecný vzorec těžké destrukce byl v rozporu s množstvím mikrobiálních usazenin. Pacienti měli alespoň jednoho dalšího člena rodiny, který měl nebo měl v anamnéze závažné periodontální problémy. Periodontálně zdraví jedinci (n=20) v kontrolní skupině neměli žádná místa s PPD >3 mm a CAL >2 mm a také žádný rentgenový důkaz ztráty alveolární kosti. BOP byl <15 % v celých ústech.

Léčba

Rekrutovaní pacienti s G-AgP dostávali konvenční škálování kvadrantů a plánování kořenů (SRP) v lokální anestezii po dobu 3 týdnů. SRP prováděl stejný parodontolog (který byl odlišný, výzkumník zaznamenával parodontální parametry) pomocí ultrazvukových vložek a manuálních parodontálních kyret. Přehodnocení byla provedena 1 a 3 měsíce po dokončení SRP v pravém dolním kvadrantu. U periodontálně zdravých kontrol nebyla provedena žádná periodontální intervence.

Vzorkování GCF

GCF byl odebrán ze dvou nejhlubších kapes jednokořenových zubů na začátku ve skupině G-AgP bezprostředně před ošetřením pravého horního kvadrantu. Odběr vzorků byl opakován na stejných místech po dokončení SRP v pravém dolním kvadrantu. GCF byl odebrán z bukálních aspektů dvou nesousedních interproximálních míst u jednokořenových zubů s. Vzorky byly odebrány z míst bez BOP v periodontálně zdravé skupině. Pro odběr vzorků GCF byly použity standardizované proužky filtračního papíru. Sterilní papírové proužky byly jemně vkládány do gingiválního sulku nebo kapsy, dokud neucítil mírný odpor, a nechaly se tam 30 sekund. Absorbovaný objem tekutiny byl měřen předem kalibrovaným elektronickým zařízením. Papírové proužky byly skladovány při -40 °C pro další analýzu.

Měření hladin HIF-la, VEGF a TNF-a v GCF

Dva papírové proužky byly spojeny a umístěny do 300 ul PBS-T (0,05 %). Hladiny HIF-la, VEGF a TNF-a ve vzorcích GCF byly měřeny enzymatickou imunoanalýzou s použitím komerčních souprav v souladu s pokyny výrobce. Výsledky GCF byly vyjádřeny jako obě celková množství na dvou místech za dobu vzorkování.

Statistická analýza

Všechny statistické analýzy byly provedeny pomocí standardního statistického softwarového balíku. Pro srovnání v rámci skupiny, pokud data nebyla normálně narušena, byly použity Friedmanův test a Dunnův test s Bonferroniho korekcí k analýze změny mezi výchozí hodnotou a 1 měsíc a 3 měsíce po léčbě. Pro srovnání mezi skupinami Mann-Whitney U test pro normálně a nenormálně narušená data. Ke zjištění korelací biochemických parametrů s klinickými parametry a mezi sebou navzájem ve skupině nemocných před a po léčbě byl použit Spearmanův test korelace pořadí. Všechny testy byly provedeny na hladině významnosti P <0,05.