Níveis de GCF HIF-1α, VEGF e TNF-α em pacientes com G-AgP antes e depois do tratamento periodontal.

População do Estudo e Exame Clínico

Um total de 40 indivíduos foram recrutados para o presente estudo. Os critérios de inclusão incluíram: 1) idade entre 25 e 45 anos 2) não fumantes sem histórico de tabagismo 3) ter pelo menos 20 dentes naturais. Os critérios de exclusão foram os seguintes: 1) ter quaisquer distúrbios médicos diagnosticados, como diabetes mellitus, doenças cardiovasculares, artrite reumatoide, doenças imunológicas e mucocutâneas 2) uso de antibióticos, anti-inflamatórios não esteróides e agentes imunossupressores nos últimos 6 meses 3 ) ter qualquer doença periodontal destrutiva não inflamatória 4) terapia periodontal não cirúrgica/cirúrgica recebida no último ano 5) ter necessidade de tratamento restaurador e endodôntico 6) ter aparelhos ortodônticos ou uma prótese parcial removível 7) mulheres grávidas/lactantes/pós-menopáusicas.

O exame clínico periodontal de toda a boca incluiu a medição da profundidade de sondagem (PPD), nível de inserção clínica (CAL), presença de sangramento à sondagem (BOP), índice gengival (GI) e índice de placa (PI) em 6 locais por dente, exceto o terceiros molares. A presença e o tipo de perda óssea alveolar foram avaliados na radiografia panorâmica digital em cada participante, que foi complementada com radiografias periapicais, se necessário.

O estado periodontal de cada paciente foi avaliado por um único periodontista calibrado com uma sonda manual. O diagnóstico de G-AgP ou saúde periodontal foi determinado de acordo com a Classificação Internacional de Doenças Periodontais em 1999. Os pacientes do grupo G-AgP (n=20) tinham no mínimo três dentes de distância dos primeiros molares e incisivos apresentando CAL ≥5 mm e PPD ≥6 mm. A perda óssea radiográfica foi ≥30% do comprimento da raiz afetando ≥3 dentes além dos primeiros molares e incisivos. Este padrão generalizado de destruição severa era inconsistente com a quantidade de depósitos microbianos. Os pacientes tinham pelo menos um outro membro da família apresentando ou tendo um histórico de problemas periodontais graves. Indivíduos periodontalmente saudáveis ​​(n=20) no grupo controle não tinham sítios com PPD >3 mm e CAL >2 mm e também nenhuma evidência radiográfica de perda óssea alveolar. BOP foi <15% em toda a boca.

Tratamento

Os pacientes G-AgP recrutados receberam raspagem de quadrante convencional e alisamento radicular (SRP) sob anestesia local por 3 semanas. A SRP foi realizada pelo mesmo periodontista (que era diferente do investigador que registrou os parâmetros periodontais) usando inserções ultrassônicas e curetas periodontais manuais. As reavaliações foram realizadas 1 e 3 meses após a conclusão do SRP no quadrante inferior direito. Nenhuma intervenção periodontal foi realizada nos controles periodontalmente saudáveis.

amostragem GCF

GCF foi amostrado de dois bolsos mais profundos de dentes unitários na linha de base no grupo G-AgP imediatamente antes do tratamento do quadrante superior direito. A amostragem foi repetida nos mesmos locais após a conclusão do SRP no quadrante inferior direito. GCF foi amostrado dos aspectos vestibulares de dois sítios interproximais não adjacentes em dentes uniradiculares com. As amostras foram coletadas dos locais sem BOP no grupo periodontalmente saudável. Tiras de papel de filtro padronizadas foram usadas para amostragem GCF. Tiras de papel estéril foram gentilmente inseridas no sulco ou bolsa gengival até que uma leve resistência fosse sentida e deixadas lá por 30 segundos. O volume de fluido absorvido foi medido com um dispositivo eletrônico pré-calibrado. As tiras de papel foram armazenadas a -40◦C para posterior análise.

Medição dos níveis de HIF-1α, VEGF e TNF-α no GCF

Duas tiras de papel foram agrupadas, colocadas em 300 µL de PBS-T (0,05%). Os níveis de HIF-1α, VEGF e TNF-α em amostras de GCF foram medidos pelo ensaio imunossorvente ligado a enzima usando kits comerciais de acordo com as diretrizes do fabricante. Os resultados GCF foram expressos como ambas as quantidades totais em dois locais por tempo de amostragem.

Análise estatística

Todas as análises estatísticas foram realizadas com o pacote de software estatístico padrão. Para as comparações intragrupo, se os dados não fossem normalmente alterados, o teste de Friedman e o teste de Dunn com correção de Bonferroni foram usados ​​para analisar a mudança entre a linha de base e 1 mês e 3 meses após o tratamento. Para comparações entre grupos, teste U de Mann-Whitney para dados com perturbações normais e não normais. O teste de correlação de postos de Spearman foi utilizado para detectar as correlações dos parâmetros bioquímicos com os parâmetros clínicos e entre si no grupo doente antes e após o tratamento. Todos os testes foram realizados com nível de significância de P < 0,05.