Niveles de GCF HIF-1α, VEGF y TNF-α en pacientes con G-AgP antes y después del tratamiento periodontal.

Población de estudio y examen clínico

Un total de 40 individuos fueron reclutados para el presente estudio. Los criterios de inclusión incluyeron: 1) edad de 25 a 45 años 2) no fumadores sin antecedentes de tabaquismo 3) tener al menos 20 dientes naturales. Los criterios de exclusión fueron los siguientes: 1) tener algún trastorno médico diagnosticado, como diabetes mellitus, enfermedades cardiovasculares, artritis reumatoide, enfermedades inmunológicas y mucocutáneas 2) uso de antibióticos, antiinflamatorios no esteroideos y agentes inmunosupresores en los últimos 6 meses 3 ) tener cualquier enfermedad periodontal destructiva no inflamatoria 4) terapia periodontal no quirúrgica/quirúrgica recibida en el último año 5) tener un requisito de tratamiento de restauración y endodoncia 6) tener aparatos de ortodoncia o una dentadura postiza parcial removible 7) mujeres embarazadas/lactantes/posmenopáusicas.

El examen periodontal clínico de toda la boca incluyó la medición de la profundidad de sondaje (PPD), el nivel de inserción clínica (CAL), la presencia de sangrado al sondaje (BOP), el índice gingival (GI) y el índice de placa (PI) en 6 sitios por diente, excepto el terceros molares. La presencia y el tipo de pérdida ósea alveolar se evaluaron en la radiografía panorámica digital de cada participante, que se complementó con radiografías periapicales si era necesario.

El estado periodontal de cada paciente fue evaluado por un solo periodoncista calibrado con una sonda manual. El diagnóstico de G-AgP o salud periodontal se determinó según la Clasificación Internacional de Enfermedades Periodontales de 1999. Los pacientes del grupo G-AgP (n=20) tenían un mínimo de tres dientes además de los primeros molares e incisivos que mostraban CAL ≥5 mm y PPD ≥6 mm. La pérdida ósea radiográfica fue ≥30 % de la longitud de la raíz y afectó a ≥3 dientes distintos de los primeros molares e incisivos. Este patrón generalizado de destrucción severa fue inconsistente con la cantidad de depósitos microbianos. Los pacientes tenían al menos otro miembro de la familia que presentaba o tenía antecedentes de problemas periodontales graves. Los individuos periodontalmente sanos (n=20) en el grupo de control no tenían sitios con PPD >3 mm y CAL >2 mm y tampoco evidencia radiográfica de pérdida de hueso alveolar. BOP fue <15% en toda la boca.

Tratamiento

Los pacientes reclutados con G-AgP recibieron raspado de cuadrantes convencional y alisado radicular (SRP) bajo anestesia local durante 3 semanas. La SRP fue realizada por el mismo periodoncista (que era diferente al investigador que registró los parámetros periodontales) usando insertos ultrasónicos y curetas periodontales manuales. Se realizaron reevaluaciones 1 y 3 meses después de completar el SRP en el cuadrante inferior derecho. No se realizó ninguna intervención periodontal en los controles periodontalmente sanos.

Muestreo de FVC

Se tomaron muestras de GCF de dos bolsillos más profundos de dientes de una sola raíz al inicio en el grupo G-AgP inmediatamente antes del tratamiento del cuadrante superior derecho. El muestreo se repitió en los mismos sitios luego de completar el SRP en el cuadrante inferior derecho. Se tomaron muestras de GCF de las caras bucales de dos sitios interproximales no adyacentes en dientes con una sola raíz. Se recogieron muestras de los sitios sin BOP en el grupo periodontalmente sano. Se utilizaron tiras de papel de filtro estandarizadas para el muestreo de GCF. Se insertaron suavemente tiras de papel estériles en el surco o bolsa gingival hasta que se sintió una leve resistencia y se dejaron allí durante 30 s. El volumen de líquido absorbido se midió con un dispositivo electrónico precalibrado. Las tiras de papel se almacenaron a -40◦C para su posterior análisis.

Medición de los niveles de HIF-1α, VEGF y TNF-α en GCF

Se agruparon dos tiras de papel, se colocaron en 300 µL de PBS-T (0,05%). Los niveles de HIF-1α, VEGF y TNF-α en muestras de GCF se midieron mediante el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas utilizando kits comerciales de acuerdo con las pautas del fabricante. Los resultados del GCF se expresaron como cantidades totales en dos sitios por tiempo de muestreo.

Análisis estadístico

Todos los análisis estadísticos se llevaron a cabo con el paquete de software estadístico estándar. Para las comparaciones intragrupo, si los datos no se alteraban normalmente, se utilizaron la prueba de Friedman y la prueba de Dunn con la corrección de Bonferroni para analizar el cambio entre el inicio y 1 mes y 3 meses después del tratamiento. Para comparaciones entre grupos, prueba U de Mann-Whitney para datos con perturbaciones normales y no normales. Se utilizó la prueba de correlación de rangos de Spearman para detectar las correlaciones de los parámetros bioquímicos con los parámetros clínicos y entre sí en el grupo enfermo antes y después del tratamiento. Todas las pruebas se realizaron a un nivel de significación de P <0,05.