EMT 对前列腺癌 CTC 和疾病进展的影响

前列腺癌患者血液中循环肿瘤细胞 (CTC) 的存在已被证明是转移性疾病和预后不良的重要指标。 此外，已证明在整个治疗过程中 CTC 数量的变化反映了治疗反应。 尽管这些细胞非常罕见（每 105-107 个白细胞约 1 个 CTC），但最近的技术进步现在促进了 CTC 的灵敏计数和表征。 富集和分析 CTC 的技术包括基于大小和/或密度的分离和基于抗体的技术，有/没有微流体的帮助，而检测技术几乎完全依赖于蛋白质（免疫荧光/流式细胞术）或核酸（ RT-PCR/qRT-PCR) 测定。 然而，CellSearch® (Menarini-Silicon Biosystems) 是目前唯一获得 FDA 和加拿大卫生部批准的 CTC 平台，因此被认为是当前临床 CTC 分析的“黄金标准”。

CellSearch® 使用基于上皮的标记物方法对 CTC 进行免疫磁性富集、分离和定量免疫荧光。 使用该测定法，已经证明在约 65% 的去势抵抗性前列腺癌 (CRPC) 患者中很容易检测到 CTC，并且在 7.5ml 血液中存在≥5 个 CTC 表明进行性转移性疾病和降低的总生存期. 值得注意的是，在约 35% 的转移性 CRPC 患者中检测不到 CTC。 这表明 CTC 确实不存在于 >1/3 的晚期转移性疾病患者中；和/或 CTC 存在但检测不到，因为它们不符合标准 CellSearch® 对 CTC 的定义 (EpCAM+/Cytokeratin 8/18/19 [CK]+/DAPI+/CD45-)。 鉴于越来越多的证据表明前列腺癌细胞在向更具转移性的表型进化时会失去上皮特征，研究人员认为后一种情况最有可能发生。

上皮-间质转化 (EMT) 是胚胎发育和癌症转移过程中的关键过程。 EMT 的激活导致显着的表型变化，导致细胞极性丧失、细胞间粘附丧失、细胞凋亡抗性以及迁移/侵袭特性的获得。 还有人提出，肿瘤细胞（通过间充质-上皮转变 [MET]）可能会恢复到上皮表型，以促进继发部位的转移生长，这表明表型可塑性在转移进展过程中的作用。 在分子水平上，EMT 是由上皮蛋白（E-钙粘蛋白、CK、EpCAM）表达减少介导的；以及间充质因子（N-钙粘蛋白、波形蛋白、Twist、Zeb）的相应增加，MET 由相反的变化介导。

临床上，格里森分级可以说是 EMT 的形态学证据，因为格里森评分的增加与上皮结构的逐渐丧失、确定的基底膜/细胞极性丧失和侵袭增加有关。 支持这一点的研究表明，原发性前列腺肿瘤中 E-钙粘蛋白表达降低或间充质标记物（波形蛋白、N-钙粘蛋白、SNAIL）表达增加与晚期格里森评分、转移和/或不良预后相关。 尽管雄激素受体 (AR) 信号在 EMT 中的作用知之甚少，但研究还表明，雄激素剥夺、去势抵抗和/或雄激素信号中断可能会促进 EMT。

重要的是，几项临床研究表明，具有纯间充质表型的 CTC 无法通过 CellSearch® 检测到，但具有混合上皮-间充质表型的 CTC 上存在间充质标记物表达表明预后不良。 此外，Allan 实验室先前的临床前数据表明，在动物模型中，具有间充质表型的前列腺癌比具有上皮表型的前列腺癌更快地脱落更多的 CTC，并且具有更大的转移能力。 值得注意的是，临床上使用的基于 CellSearch® 的测定捕获了体内早期疾病期间脱落的大部分 CTC，并且仅在转移建立后才存在大量无法检测到的 CTC。 这表明当前的临床检测可能限制了利用 CTC 全部潜力的能力，并且有必要更好地了解 CTC 生物学，以指导未来的技术开发和临床转化。