牙周病和健康中龈沟液和血清 ErbB4/Neuregulin-4 水平的评估

共80人，包括20名II期B级牙周炎患者（P1组）、20名III期B级牙周炎患者（P2组）、20名牙龈炎患者（G组）和20名牙周健康对照组（H组） ) 参与了这项研究。

根据2017年世界研讨会的共识报告，参与者根据牙周健康状况分为四组：

1. 牙周健康（H）组：无邻间附着丧失（AL），探诊深度（PD）≤3mm，探诊出血（BOP）评分<10%；
2. 牙龈炎（G）组：无邻间AL，PD≤3mm，BOP≥10%；
3. II 期 B 级牙周炎 (P1) 组：口腔至少两个象限的 2 颗非相邻牙齿的一个或多个部位 3 <PD ≤5 mm 且 3 ≤ 临床附着丧失 (CAL) <5 mm，全口腔 BOP ≥ 10% 且无因牙周炎导致的牙齿脱落
4. III期B级牙周炎（P2）组：口腔至少两个象限的2颗非相邻牙齿的一处或多处PD>5mm且CAL≥5mm，全口BOP>10%且因牙缺失≤4颗牙的牙周炎。

入选标准如下：

1. 年龄 >18 岁，
2. 至少有16颗天然牙齿（不包括第三磨牙），
3. 没有任何可能影响牙周状况的确诊疾病或药物摄入。

排除标准如下：

1. 过去3个月内服用过抗生素、非甾体类抗炎药或任何其他药物的患者，
2. 接受过非手术或手术牙周治疗，
3. 修复和牙髓治疗要求，
4. 可摘局部义齿和/或正畸治疗
5. 当前怀孕或哺乳、肥胖、重度吸烟和血清 C 反应蛋白 (CRP) > 3mg/L。

所有个体均在基线和非手术牙周治疗后 4 周进行检查，包括全口探诊深度 (PD)、CAL、探诊出血 (BOP)、乳头出血指数 (PBI)、牙龈指数 (GI) 和菌斑指数 (PI) 除了第三磨牙。 使用手动牙周探针在每颗牙齿的六个位置测量 PD 和 CAL。

P1 和 P2 组的非手术牙周治疗包括龈上和龈下洗牙、根面平整和口腔卫生指导。 在局部麻醉下，在 48-72 小时内分两次进行龈下刮治和根面平整。 牙龈炎组有牙龈上下洗牙、抛光和口腔卫生指导。 牙龈炎和牙周炎患者的治疗由牙周病医生 (BM) 使用手持和超声仪器进行。 所有测量均由同一位经过校准的检查员 (BM) 执行。

龈沟液 (GCF) 取样

GCF 样品是通过标准化滤纸条从两个上颌和两个下颌多根牙齿的四个不相邻的邻间部位获得的。 GCF样本取自H组中GI<1、PD≤3、PBI=0、CAL=0的4个位点； G组中GI≥2、PD≤3、PBI>2、CAL=0的4个位点；来自 P1 组中 GI ≥ 2、PBI > 2 和 3 ≤ CAL <5 mm 的四个部位（最深袋 3 <PD ≤ 5）；根据基线临床测量，P2 组中 GI ≥ 2、PBI > 2 和 CAL ≥ 5 mm 的四个部位（最深袋 PD ≥ 5）。

血清取样

在牙周治疗之前，在 GCF 采样之后采集血清样本。 通过标准静脉穿刺法获得 6 毫升静脉血，并通过以 1,500 g 离心 20 分钟从血液中分离血清。

生化检测

GCF ErbB4、Nrg4、IL-6、IL-10 的水平和血清 ErbB4、Nrg4、一氧化氮合酶 (NOS)2 和 Arg1 的水平使用商业试剂盒根据制造商的酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 测量准则。

统计分析

所有数据分析均使用统计软件包进行。 使用 Kruskal-Wallis with Mann Whitney U 检验和 Bonferroni 校正方法对研究组之间的临床和生化参数进行比较。 使用配对样本的 Wilcoxon 检验进行组内比较（在基线和第一个月）。 还使用 Spearman 秩相关分析检查了 GCF 水平与血清​​生物标志物和临床参数之间的关联。