Evaluación de los niveles de ErbB4/Neureregulina-4 en líquido crevicular gingival y suero en la salud y la enfermedad periodontal

Un total de 80 individuos, incluidos 20 pacientes con periodontitis grado B en estadio II (Grupo P1), 20 pacientes con periodontitis grado B en estadio III (Grupo P2), 20 pacientes con gingivitis (Grupo G) y 20 controles periodontalmente sanos (Grupo H ) participaron en el estudio.

Los participantes se clasificaron en cuatro grupos según el estado de salud periodontal de acuerdo con los informes de consenso del Taller Mundial 2017:

1. grupo periodontalmente sano (H): sin pérdida de inserción interproximal (AL), profundidad de sondaje (PD) ≤3 mm, puntajes de sangrado al sondaje (BOP) <10%;
2. grupo de gingivitis (G): sin AL interproximal, PD ≤3 mm y BOP ≥10%;
3. Grupo de periodontitis grado B (P1) en estadio II: 3 <PD ≤5 mm y 3 ≤pérdida de inserción clínica (CAL) <5 mm en uno o más sitios de los 2 dientes no adyacentes en al menos dos cuadrantes de la boca, llenos BOP en boca ≥ 10% y sin pérdida de dientes por periodontitis
4. Grupo periodontitis grado B estadio III (P2): PD >5 mm y CAL ≥ 5 mm en uno o más sitios de los 2 dientes no adyacentes en al menos dos cuadrantes de la boca, boca completa BOP >10% y pérdida de dientes debido a a la periodontitis de ≤4 dientes.

Los criterios de inclusión fueron los siguientes:

1. mayores de 18 años,
2. tener al menos 16 dientes naturales (excluyendo el tercer molar),
3. no tener ninguna enfermedad médica diagnosticada o ingesta de medicamentos que puedan afectar la condición periodontal.

Los criterios de exclusión fueron los siguientes:

1. Los pacientes que habían tomado antibióticos, antiinflamatorios no esteroideos o cualquier otro medicamento en los últimos 3 meses,
2. recibió tratamiento periodontal no quirúrgico o quirúrgico,
3. un requisito de terapia restauradora y endodóntica,
4. una dentadura postiza parcial removible y/o tener terapia de ortodoncia
5. Embarazo o lactancia actual, obesidad, tabaquismo intenso y proteína C reactiva sérica (PCR) > 3 mg/L.

Todos los individuos fueron examinados al inicio y cuatro semanas después del tratamiento periodontal no quirúrgico, incluida la profundidad de sondaje (PD) de toda la boca, CAL, presencia de sangrado al sondaje (BOP), índice de sangrado papilar (PBI), índice gingival (GI) y placa índice (PI) excepto los terceros molares. Se midieron PD y CAL en seis sitios por diente utilizando una sonda periodontal manual.

El tratamiento periodontal no quirúrgico para los grupos P1 y P2 incluyó raspado supragingival y subgingival, alisado radicular e instrucciones de higiene oral. El raspado subgingival y el alisado radicular se realizaron bajo anestesia local en dos sesiones dentro de las 48-72 h. El grupo de gingivitis tenía instrucciones de limpieza, pulido e higiene bucal supra y subgingival. El tratamiento de pacientes con gingivitis y periodontitis fue realizado por un periodoncista (BM) utilizando instrumentos manuales y ultrasónicos. Todas las mediciones fueron realizadas por el mismo examinador calibrado (BM).

Muestreo de líquido crevicular gingival (GCF)

Las muestras de GCF se obtuvieron de cuatro sitios interproximales no adyacentes en dos dientes maxilares y dos mandibulares con múltiples raíces mediante tiras de papel de filtro estandarizadas. Se tomaron muestras de GCF de cuatro sitios con GI <1, PD ≤ 3, PBI =0 y CAL =0 en el grupo H; de cuatro sitios con GI ≥2, PD ≤3, PBI >2 y CAL=0 en el grupo G; de cuatro sitios (bolsas más profundas 3 <PD ≤5) con GI ≥2, PBI >2 y 3 ≤CAL <5 mm en el grupo P1; y de cuatro sitios (bolsas más profundas PD ≥5) con GI ≥2, PBI >2 y CAL ≥5 mm en el grupo P2 según las mediciones clínicas basales.

Muestreo de suero

Se tomaron muestras de suero siguiendo el muestreo de GCF antes del tratamiento periodontal. Se obtuvieron seis mililitros de sangre venosa mediante un método estándar de venopunción y el suero se separó de la sangre mediante centrifugación a 1500 g durante 20 minutos.

Ensayos bioquímicos

Los niveles de GCF ErbB4, Nrg4, IL-6, IL-10 y los niveles séricos de ErbB4, Nrg4, óxido nítrico sintasa (NOS)2 y Arg1 se midieron mediante el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) utilizando kits comerciales de acuerdo con las instrucciones del fabricante. pautas.

Análisis estadístico

Todos los análisis de datos se realizaron utilizando un paquete de software estadístico. Las comparaciones de parámetros clínicos y bioquímicos entre los grupos de estudio se realizaron utilizando la prueba U de Kruskal-Wallis con Mann Whitney con el método de corrección de Bonferroni. Las comparaciones intragrupo (al inicio y al primer mes) se realizaron mediante la prueba de Wilcoxon para muestras pareadas. También se examinaron las asociaciones entre los niveles del GCF y los biomarcadores séricos y los parámetros clínicos mediante el análisis de correlación de rangos de Spearman.