Valutazione del fluido crevicolare gengivale e dei livelli sierici di ErbB4/Neuregulin-4 nella malattia parodontale e nella salute

Un totale di 80 individui, di cui 20 pazienti con parodontite di grado B in stadio II (Gruppo P1), 20 pazienti con parodontite di grado B in stadio III (Gruppo P2), 20 pazienti con gengivite (Gruppo G) e 20 controlli parodontalmente sani (Gruppo H) ) sono stati coinvolti nello studio.

I partecipanti sono stati classificati in quattro gruppi a seconda dello stato di salute parodontale in conformità con i rapporti di consenso del Workshop mondiale 2017:

1. gruppo parodontalmente sano (H): nessuna perdita di attacco interprossimale (AL), profondità di sondaggio (PD) ≤3 mm, punteggi di sanguinamento al sondaggio (BOP) <10%;
2. gruppo gengivite (G): nessun AL interprossimale, PD ≤3 mm e BOP ≥10%;
3. gruppo parodontite stadio II grado B (P1): 3 <PD ≤5 mm e 3 ≤ perdita clinica di attacco (CAL) <5 mm in uno o più siti dei 2 denti non adiacenti in almeno due quadranti della bocca, pieno bocca BOP ≥ 10% e nessuna perdita dei denti dovuta a parodontite
4. gruppo di parodontite (P2) stadio III grado B: PD >5 mm e CAL ≥ 5 mm in uno o più siti dei 2 denti non adiacenti in almeno due quadranti della bocca, BOP a bocca piena >10% e perdita dei denti dovuta alla parodontite di ≤4 denti.

I criteri di inclusione sono stati i seguenti:

1. di età >18 anni,
2. avere almeno 16 denti naturali (esclusi i terzi molari),
3. non avere alcuna malattia medica diagnosticata o assunzione di farmaci che potrebbero influenzare la condizione parodontale.

I criteri di esclusione erano i seguenti:

1. I pazienti che avevano assunto antibiotici, antinfiammatori non steroidei o qualsiasi altro farmaco negli ultimi 3 mesi,
2. ha ricevuto un trattamento parodontale non chirurgico o chirurgico,
3. un requisito di terapia riparativa ed endodontica,
4. una protesi parziale rimovibile e/o una terapia ortodontica
5. Gravidanza o allattamento in corso, obesità, forte fumo e presenza di proteina C reattiva sierica (CRP) > 3 mg/L.

Tutti gli individui sono stati esaminati al basale e quattro settimane dopo il trattamento parodontale non chirurgico, inclusi profondità di sondaggio dell'intera bocca (PD), CAL, presenza di sanguinamento al sondaggio (BOP), indice di sanguinamento papillare (PBI), indice gengivale (GI) e placca indice (PI) tranne i terzi molari. PD e CAL sono stati misurati in sei siti per dente utilizzando una sonda parodontale manuale.

Il trattamento parodontale non chirurgico per i gruppi P1 e P2 includeva scaling sopra e sottogengivale, levigatura radicolare e istruzioni per l'igiene orale. Il ridimensionamento sottogengivale e la levigatura radicolare sono stati eseguiti in anestesia locale in due sessioni entro 48-72 ore. Il gruppo gengivite aveva istruzioni per il ridimensionamento, la lucidatura e l'igiene orale sopra e sottogengivale. Il trattamento dei pazienti con gengivite e parodontite è stato eseguito da un parodontologo (BM) utilizzando strumenti manuali e ad ultrasuoni. Tutte le misurazioni sono state eseguite dallo stesso esaminatore calibrato (BM).

Prelievo di fluido crevicolare gengivale (GCF).

I campioni GCF sono stati ottenuti da quattro siti interprossimali non adiacenti in due denti multi-radicali mascellari e due mandibolari mediante strisce di carta da filtro standardizzate. I campioni GCF sono stati prelevati da quattro siti con GI <1, PD ≤ 3, PBI = 0 e CAL = 0 nel gruppo H; da quattro siti con GI ≥2, PD ≤3, PBI >2 e CAL=0 nel gruppo G; da quattro siti (tasche più profonde 3 <PD ≤5) con GI ≥2, PBI >2 e 3 ≤CAL <5 mm nel gruppo P1; e da quattro siti (tasche più profonde PD ≥5) con GI ≥2, PBI >2 e CAL ≥5 mm nel gruppo P2 in base alle misurazioni cliniche di base.

Campionamento del siero

I campioni di siero sono stati prelevati dopo il campionamento GCF prima del trattamento parodontale. Sono stati ottenuti sei millilitri di sangue venoso mediante un metodo standard di venipuntura e il siero è stato separato dal sangue mediante centrifugazione a 1.500 g per 20 minuti.

Saggi biochimici

I livelli di GCF ErbB4, Nrg4, IL-6, IL-10 e i livelli sierici di ErbB4, Nrg4, ossido nitrico sintasi (NOS)2 e Arg1 sono stati misurati mediante il saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) utilizzando kit commerciali secondo le istruzioni del produttore linee guida.

Analisi statistica

Tutte le analisi dei dati sono state eseguite utilizzando un pacchetto software statistico. I confronti dei parametri clinici e biochimici tra i gruppi di studio sono stati eseguiti utilizzando il test U di Kruskal-Wallis con Mann Whitney con il metodo di correzione di Bonferroni. I confronti intragruppo (al basale e al primo mese) sono stati eseguiti utilizzando il test di Wilcoxon per campioni appaiati. Le associazioni tra livelli di GCF e biomarcatori sierici e parametri clinici sono state esaminate anche utilizzando l'analisi di correlazione del rango di Spearman.