Stanovení gingivální crevikulární tekutiny a sérových hladin ErbB4/Neuregulinu-4 u onemocnění a zdraví parodontu

Celkem 80 jedinců, z toho 20 pacientů s parodontitidou stupně II stupně B (skupina P1), 20 pacientů s parodontitidou stupně III stupně B (skupina P2), 20 pacientů s gingivitidou (skupina G) a 20 periodontálně zdravých kontrol (skupina H ) byli zapojeni do studie.

Účastníci byli rozděleni do čtyř skupin v závislosti na zdravotním stavu parodontu v souladu s konsensuálními zprávami Světového workshopu 2017:

1. periodontálně zdravá (H) skupina: žádná interproximální ztráta úponu (AL), hloubka sondování (PD) ≤ 3 mm, skóre krvácení při sondování (BOP) <10 %;
2. skupina gingivitidy (G): žádná interproximální AL, PD ≤ 3 mm a BOP ≥ 10 %;
3. skupina II stupně B periodontitis (P1): 3 <PD ≤ 5 mm a 3 ≤ klinická ztráta úponu (CAL) < 5 mm na jednom nebo více místech 2 nesousedících zubů alespoň ve dvou kvadrantech úst, plná BOP v ústech ≥ 10 % a žádná ztráta zubů v důsledku paradentózy
4. skupina III stupně B periodontitis (P2): PD >5 mm a CAL ≥ 5 mm na jednom nebo více místech 2 nesousedících zubů alespoň ve dvou kvadrantech úst, BOP plných úst >10 % a ztráta zubu v důsledku k paradentóze ≤4 zubů.

Kritéria zařazení byla následující:

1. ve věku >18 let,
2. mít alespoň 16 přirozených zubů (kromě třetího moláru),
3. nemá žádné diagnostikované onemocnění nebo příjem léků, které by mohly ovlivnit stav parodontu.

Kritéria vyloučení byla následující:

1. Pacienti, kteří během posledních 3 měsíců užívali antibiotika, nesteroidní antirevmatika nebo jiné léky,
2. podstoupil nechirurgickou nebo chirurgickou parodontální léčbu,
3. požadavek na restorativní a endodontickou terapii,
4. odstranitelnou částečnou zubní protézu a/nebo s ortodontickou terapií
5. Současné těhotenství nebo kojení, obezita, silné kouření a sérový C reaktivní protein (CRP) > 3 mg/l.

Všichni jedinci byli vyšetřeni na začátku a čtyři týdny po nechirurgickém parodontologickém ošetření včetně hloubky sondování celých úst (PD), CAL, přítomnosti krvácení při sondování (BOP), indexu papilárního krvácení (PBI), indexu dásní (GI) a plaku index (PI) kromě třetích molárů. PD a CAL byly měřeny na šesti místech na zub pomocí manuální periodontální sondy.

Nechirurgická parodontologická léčba u skupin P1 a P2 zahrnovala supra- a subgingivální škálování, hoblování kořenů a pokyny pro ústní hygienu. Subgingivální škálování a hoblování kořenů bylo provedeno v lokální anestezii ve dvou sezeních během 48-72 hodin. Skupina s gingivitidou měla pokyny pro supra- a subgingivální škálování, leštění a ústní hygienu. Léčbu pacientů s gingivitidou a parodontitidou prováděl parodontolog (BM) pomocí ručních a ultrazvukových nástrojů. Všechna měření byla provedena stejným kalibrovaným examinátorem (BM).

Odběr vzorků gingivální krevikulární tekutiny (GCF).

Vzorky GCF byly získány ze čtyř nesousedících interproximálních míst ve dvou maxilárních a dvou mandibulárních vícekořenových zubech pomocí standardizovaných proužků filtračního papíru. Vzorky GCF byly odebrány ze čtyř míst s GI <1, PD ≤ 3, PBI = 0 a CAL = 0 ve skupině H; ze čtyř míst s GI ≥2, PD ≤3, PBI >2 a CAL=0 v G skupině; ze čtyř míst (nejhlubší kapsy 3 <PD ≤5) s GI ≥2, PBI >2 a 3 ≤CAL <5 mm ve skupině P1; a ze čtyř míst (nejhlubší kapsy PD ≥5) s GI ≥2, PBI >2 a CAL ≥5 mm ve skupině P2 podle výchozích klinických měření.

Odběr vzorků séra

Vzorky séra byly odebrány po odběru GCF před periodontálním ošetřením. Šest mililitrů žilní krve bylo získáno standardní metodou venepunkce a sérum bylo odděleno od krve centrifugací při 1500 g po dobu 20 minut.

Biochemické testy

Hladiny GCF ErbB4, Nrg4, IL-6, IL-10 a hladiny sérových ErbB4, Nrg4, syntázy oxidu dusnatého (NOS)2 a Arg1 byly měřeny pomocí enzymové imunoanalýzy (ELISA) za použití komerčních souprav podle výrobce. pokyny.

Statistická analýza

Všechny analýzy dat byly provedeny pomocí statistického softwarového balíku. Porovnání klinických a biochemických parametrů mezi studijními skupinami bylo provedeno pomocí Kruskal-Wallisova s ​​Mann Whitney U testu s Bonferroniho korekční metodou. Vnitroskupinová srovnání (na začátku a v prvním měsíci) byla provedena pomocí Wilcoxonova testu pro párové vzorky. Asociace mezi hladinami GCF a sérovými biomarkery a klinickými parametry byly také zkoumány pomocí Spearmanovy korelační analýzy.