Avaliação do Fluido Crevicular Gengival e dos Níveis de ErbB4/Neuregulina-4 no Soro na Doença e Saúde Periodontais

Um total de 80 indivíduos, compreendendo 20 pacientes com periodontite grau B estágio II (Grupo P1), 20 pacientes com periodontite grau B estágio III (Grupo P2), 20 pacientes com gengivite (Grupo G) e 20 controles periodontais saudáveis ​​(Grupo H ) participaram do estudo.

Os participantes foram classificados em quatro grupos, dependendo do estado de saúde periodontal, de acordo com os relatórios de consenso do World Workshop 2017:

1. grupo periodontalmente saudável (H): sem perda de inserção interproximal (AL), profundidade de sondagem (PD) ≤3 mm, escores de sangramento à sondagem (BOP) <10%;
2. grupo gengivite (G): sem AL interproximal, PD ≤3 mm e BOP ≥10%;
3. grupo de periodontite grau B estágio II (P1): 3 <PD ≤ 5 mm e 3 ≤ perda de inserção clínica (CAL) < 5 mm em um ou mais locais dos 2 dentes não adjacentes em pelo menos dois quadrantes da boca, completos Boca BOP ≥ 10% e sem perda dentária devido a periodontite
4. grupo de periodontite grau B estágio III (P2): PD > 5 mm e CAL ≥ 5 mm em um ou mais locais dos 2 dentes não adjacentes em pelo menos dois quadrantes da boca, boca cheia BOP > 10% e perda dentária devido à periodontite de ≤4 dentes.

Os critérios de inclusão foram os seguintes:

1. com idade > 18 anos,
2. ter pelo menos 16 dentes naturais (excluindo o terceiro molar),
3. não ter nenhuma doença médica diagnosticada ou ingestão de medicamentos que possam afetar a condição periodontal.

Os critérios de exclusão foram os seguintes:

1. Os pacientes que tomaram antibióticos, antiinflamatórios não esteróides ou quaisquer outras drogas nos últimos 3 meses,
2. recebeu tratamento periodontal não cirúrgico ou cirúrgico,
3. um requisito de terapia restauradora e endodôntica,
4. uma prótese parcial removível e/ou ter terapia ortodôntica
5. Gravidez ou lactação atual, obesidade, tabagismo pesado e proteína C reativa (PCR) sérica > 3mg/L.

Todos os indivíduos foram examinados no início e quatro semanas após o tratamento periodontal não cirúrgico, incluindo profundidade de sondagem de toda a boca (PD), CAL, presença de sangramento à sondagem (BOP), índice de sangramento papilar (PBI), índice gengival (GI) e placa índice (PI), exceto os terceiros molares. PD e CAL foram medidos em seis locais por dente usando uma sonda periodontal manual.

O tratamento periodontal não cirúrgico para os grupos P1 e P2 incluiu raspagem supra e subgengival, alisamento radicular e instruções de higiene oral. Raspagem subgengival e alisamento radicular foram realizados sob anestesia local em duas sessões dentro de 48-72 h. O grupo gengivite teve raspagem supra e subgengival, polimento e instruções de higiene oral. O tratamento de pacientes com gengivite e periodontite foi realizado por um periodontista (BM) usando instrumentos manuais e ultrassônicos. Todas as medidas foram realizadas pelo mesmo examinador calibrado (BM).

Amostragem de fluido crevicular gengival (GCF)

Amostras GCF foram obtidas de quatro sítios interproximais não adjacentes em dois dentes multirradiculares superiores e dois inferiores por meio de tiras de papel de filtro padronizadas. Amostras GCF foram retiradas de quatro locais com GI <1, PD ≤ 3, PBI =0 e CAL =0 no grupo H; de quatro locais com GI ≥2, PD ≤3, PBI >2 e CAL=0 no grupo G; de quatro locais (bolsas mais profundas 3 <PD ≤5) com GI ≥2, PBI >2 e 3 ≤CAL <5 mm no grupo P1; e de quatro locais (bolsas mais profundas PD ≥5) com GI ≥2, PBI >2 e CAL ≥5 mm no grupo P2 de acordo com as medidas clínicas basais.

Amostragem de soro

Amostras de soro foram coletadas após amostragem GCF antes do tratamento periodontal. Seis mililitros de sangue venoso foram obtidos pelo método padrão de punção venosa e o soro foi separado do sangue por centrifugação a 1.500 g por 20 minutos.

Ensaios Bioquímicos

Os níveis de GCF ErbB4, Nrg4, IL-6, IL-10 e os níveis séricos de ErbB4, Nrg4, óxido nítrico sintase (NOS)2 e Arg1 foram medidos pelo ensaio imunoenzimático (ELISA) usando kits comerciais de acordo com o fabricante diretrizes.

Análise estatística

Todas as análises de dados foram realizadas usando um pacote de software estatístico. As comparações dos parâmetros clínicos e bioquímicos entre os grupos de estudo foram realizadas por meio do teste de Kruskal-Wallis com Mann Whitney U com correção de Bonferroni. As comparações intragrupo (no início e no primeiro mês) foram realizadas usando o teste de Wilcoxon para amostras pareadas. As associações entre os níveis de GCF e biomarcadores séricos e parâmetros clínicos também foram examinadas usando a análise de correlação de classificação de Spearman.