SGLT2 抑制剂对 2 型糖尿病患者葡萄糖通量、脂肪分解和运动的影响 (SINGLED)

SGLT2抑制剂是一类新型药物，具有通过促进尿糖排泄以降低血糖水平的新型作用机制。 最近观察到，在服用 SGLT2 抑制剂的 1 型和 2 型糖尿病患者中，酮生成或糖尿病酮症酸中毒发作的频率似乎更高，这引起了全世界的广泛关注。 SGLT2 抑制剂似乎与正常血糖 DKA 和酮症有关，可能是因为它们的非胰岛素依赖性葡萄糖清除率、高胰高血糖素血症和容量不足。 有两篇论文对此进行了较详细的研究。 一个是 Ferrannini 等人的代谢研究和 Yabe 等人的一篇评论论文。 需要提出的核心问题是，所观察到的影响是否仅仅是由于 SGLT2 抑制剂掩盖了胰岛素缺乏状态下的血糖升高，或者 SGLT2 抑制剂是否存在某种代谢作用，使发作更容易发生。 越来越多的证据表明，SGLT2 抑制剂以多种方式影响新陈代谢，这些可能会增加酮症酸中毒的风险。 Ferrannini 等人表明，在长期使用时，脂质氧化率会发生变化，因此身体似乎通过将新陈代谢更倾向于游离脂肪酸来对失去葡萄糖产生稳态反应。 也有可能蛋白质和其他代谢物也参与了这个过程，但这些从未被研究过。

最近对新型降糖药的试验对主要心血管 (CV) 结果的影响是中性的。 然而，与安慰剂相比，接受恩格列净治疗的心血管事件高危 2 型糖尿病患者在标准治疗中加入研究药物时，主要复合心血管结局和全因死亡发生率较低。 这可能是一种类别效应，对于探索 SGLT2 抑制剂对心血管功能的影响具有重要意义。

目的：研究 2 型糖尿病患者长期服用 SGLT2 抑制剂后发生的代谢适应，并确定这些适应是否有助于酮症酸中毒的发展。

学习程序：

一旦获得道德、HRA、研究治理和监管批准，并且仅在赞助商“绿灯”发出后，招聘阶段才会开始。

招聘：来自 Cedar 中心、皇家萨里郡医院和其他地点的糖尿病诊所：当地全科医生诊所、其他医疗保健机构，包括但不限于门诊诊所、视网膜筛查、足病学、糖尿病患者团体、萨里大学工作人员。

参与者将由糖尿病研究团队进行筛选，该团队包括在 Cedar 中心研究部门工作的研究医生和护士。

知情同意——参与者将有至少 24 小时的时间来考虑是否参与研究以考虑信息，并有机会询问研究者、他们的 GP 或其他独立方以决定是否参与研究。 然后将获得书面知情同意书。

如果个体满足纳入标准并且不满足任何排除标准，他们将被接受进入研究。 所有育龄女性都需要提供尿液样本进行妊娠试验。

将根据 Cedar 中心 SOP 测量舒张压、收缩压和脉搏。 任何异常或临床上显着的恶化将被报告为不良事件。

将在筛选访视时记录体重和身高，仅在第 2-6 次访视时记录体重。将使用身体成分分析仪测量体重（脱鞋）。 使用独立的测高仪记录高度（不穿鞋），制造商不详。 每次就诊时将计算体重指数 (BMI) 并四舍五入至最接近的整数。

将进行身体检查。 筛查访视时任何异常的、有临床意义的发现都必须记录为伴随疾病。

如果发生急性肾损伤，将立即停用研究药物并使用标准指南治疗肾损伤。

筛查访问后 1 个月内的护理点或血浆 HbA1C 实验室测试。 将审查所有实验室结果，并根据委托日志由研究者或委托人签署报告，他们将在 CRF 中记录它们是正常、异常但无临床意义，还是异常但具有临床意义。 在后一种情况下，将审查参与者的资格。

在萨里大学分析的血液样本将被视为具有研究意义的血液，不会报告给全科医生。

后续评估：

访问 2：第 1 周：基线 VO2 max 测试 VO2 max 测试将用于为每个参与者定制运动强度。 当运动测试完成时，此运动强度信息将用于访视 3 和 5。

参与者将使用健身车并戴上口罩和口罩。 参与者将以 25% VO2 max 进行 5 分钟热身。 使用 2 阶段自行车测力计协议的次最大运动测试将包括两个连续的 10 分钟阶段，恒定负载对应于 40 % 和 70 % VO2 max，然后是 5 分钟热身。 此外，还将进行与心脏功能有关的测量。

第 3 次和第 5 次访问：运动测试参与者将在运动测试前一天晚上享用标准化膳食，并在禁食过夜后到达实验室。 标准化膳食为500大卡膳食，由研究团队提供，供参与者在家准备和做饭。

将插管插入肘前静脉，并在运动前、运动中和运动后第 0、5、10、15、20、25、30 和 60 分钟采集基线血样。

参与者将被要求在健身车上完成一段固定的锻炼时间。 持续时间和强度将根据访问 2 的结果计算。他们将全程佩戴喉舌和面罩，并连接到心脏监视器。

在运动之前和期间/之后将进行以下测量：

• 血浆非酯化脂肪酸浓度、心钠素、去甲肾上腺素和肾上腺素（每次测量 n=8）
• 血浆葡萄糖、胰岛素和生长激素浓度（每次测量 n=8）
• 酮体和代谢物浓度（每次测量 n=8）
• 心电图轨迹
• BP、HR 和速率压力乘积 (RPP=HR*SBP)
• 计算的底物氧化记录为 VO2 ml/min 和 VCO2 ml/min 以及静息能量需求 (RER)
• 毛细血管乳酸浓度访问 4 和 6：代谢评估日（8-10 小时）参与者将在访问 4 和 6 之前每天接受随机研究治疗 28 天。 将在第 4 次和第 6 次访视时收集血糖研究日志。 将审查低血糖事件。 他们的家庭血糖监测数据将不会被收集用于进一步分析。

在任何代谢评估日之前的 24 小时内，参与者应避免饮酒和剧烈运动。 如果是育龄女性，将在开始任何代谢研究活动之前进行尿液妊娠试验。 将记录血压和心率。 参与者将被要求在访问 4 和访问 6 时归还未使用的 IMP。 根据随机化代码，他们将获得研究第二组所需的 IMP。

参与者将在代谢评估日的前一天晚上享用标准化膳食，并在禁食过夜后于评估日早上 7 点前往临床研究单位。 在葡萄糖分析仪（YSI 2300 Clandon Scientific, Yellow Springs Instruments, Yellow Springs, Ohio, USA）上使用葡萄糖氧化酶技术测量血糖浓度。 可以通过插入静脉滴液来维持水合作用。

所有血样将立即使用离心机分离（Heraeus Labofuge 400 离心机，Thermo Fisher Scientific。 UK）和血浆在 Cedar 中心的 -20°c 下储存过夜，然后转移到萨里大学的负 -80°c 冰箱中，稍后在萨里大学进行分析。

代谢评估日血液样本将如附录 A 所示。这些样本将用于在不同时间点测量不同的代谢物和激素。

将静脉插管插入每只手臂的肘前窝：一根用于在 -15 分钟时采血，另一根用于输注同位素 [6,6]- 2H2 葡萄糖和 [1,1,2,3,3 ]- 2H5 甘油在时间 360 分钟。 将在 -10 和 0 采集两个空腹样本，用于葡萄糖、甘油和棕榈酸酯以及 NEFA 和酮体浓度以及各种激素浓度的基线同位素富集。

在 0 分钟时，将服用研究药物，并在不到 2 分钟的时间内摄入 30 毫升橄榄油中的 U-13C 棕榈酸酯稳定同位素（200 毫克），之后将采集血液样本以富集棕榈酸酯并浓缩 TAG 和 NEFA池以及 TAG 和 NEFA 浓度。

从 360 分钟到 480 分钟将给予葡萄糖和甘油的稳定同位素灌注，并从 450 分钟到 480 分钟测量葡萄糖和甘油的浓度和富集。

在整个研究过程中，将采集样本以测定葡萄糖浓度。 将采集用于乙酰乙酸浓度和 β-羟基丁酸富集和浓度的血液样本。

将在 480 分钟时采集一份血液样本用于靶向代谢组学和心脏生物标志物。

还将采集血样用于胰岛素、胰高血糖素和皮质醇。 将要求患者排空膀胱并收集尿液以分析 120、360、450 和 480 分钟时的葡萄糖排泄（4 个样本）。

经胸超声心动图和脉搏波速度将在代谢评估日完成。 这可以在代谢评估日的任何时间点进行。

在代谢评估日结束后，将提醒参与者他们有研究团队的电话号码，可以全天 24 小时使用（身份证），并建议他们不要开车回家。

在开始第二组研究之前，将有至少 28 天的药物清除期。 参与者将在第 4 次就诊时获得第二组的试验药物。将商定第 5 次和第 6 次就诊的日期，以便研究医生建议参与者何时应开始服用研究药物以准备第 5 次和第 6 次就诊.

电话访问 1 和 2 研究小组将在每个代谢评估日后的第二天联系参与者，以确保葡萄糖水平已正常化。 如果在星期五进行代谢研究，则这可能是星期六。

电话访问 3 一旦参与者完成了两个代谢评估日，参与者将完成研究协议。 在完成最后一天的代谢评估后的 2-4 周内，每位参与者都将接受健康状况的跟进检查，并将继续接受他们通常的糖尿病医生的糖尿病护理。

如果参与者退出研究，所有样本都将被销毁，但除非参与者明确说明，否则将使用在退出时收集的匿名数据。 研究医生也可能决定参与者不再适合继续研究。 如果他们不再符合研究要求或排除标准变得明显，就会发生这种情况。 如果参与者怀孕或失去遵循研究程序的能力并同意继续进行，则参与者将被要求退出研究。