利用呼出气冷凝物中的生物标志物对侵袭性肺曲霉菌病进行无创诊断 (NIPA)

背景：

正在寻找生物标志物以增强和改进 PA 的诊断，主要集中在血液和支气管肺泡灌洗 (BAL) 液中检测到的标志物。 在这项研究中，研究人员将调查呼出气冷凝物是否是通过现有方法（即 聚合酶链反应 (PCR) 检测曲霉 DNA) 或通过蛋白质组分析。 然而，以前从未在 EBC 中提取过曲霉菌 DNA。 在这项初步研究中，研究人员将调查是否有可能从已确诊肺孢子虫肺炎的患者的 EBC 中纯化肺孢子虫 DNA，因为肺孢子虫肺炎的诊断测试更加敏感和特异，而且肺孢子虫肺炎更常见比PA。 研究人员将保留 PA 患者的 EBC 样本用于本研究中的蛋白质分析。

以前没有研究调查过 EBC 蛋白分析作为 PA 感染诊断工具的潜力。 在这项初步研究中，研究人员将测试曲霉菌蛋白是否存在于已证实/可能/可能患有 PA 的患者的 EBC 中。

方法：

该研究将比较从已证实、可能或可能的肺曲霉菌 (PA) 感染患者和疑似 PA 感染患者中收集的呼出气冷凝物 (EBC) 的蛋白质谱，其中常规诊断检查排除了 PA，以及阴性对照，即在血液科、传染病科、呼吸系统疾病科和心胸外科门诊接受良性/惰性病症诊断检查且无疑似 PA，年龄和性别相同（在 10 岁范围内）奥尔堡大学医院。 主要结果，即 EBC 样品中特定蛋白质的相对量的平均值，将在评估两组的正态性和标准偏差后通过未配对的 t 检验进行比较，以下比较：已证实/可能/可能的 PA 与. 排除 PA 并证明/可能/可能 PA 与阴性对照的患者。 如果比较三组，将应用单因素方差分析，但这不在我们研究的主要范围内。

在一项子研究中，研究人员将从疑似肺孢子虫肺炎患者和健康对照者（即接受良性/惰性病症诊断检查且未疑似肺孢子虫肺炎的患者）中收集 EBC。 肺孢子虫肺炎的诊断试验具有高度特异性和敏感性。 研究人员将测试是否可在这些患者的 EBC 中检测到肺孢子菌 DNA，并了解应如何从 EBC 样本中提取 DNA。 DNA 提取和分析将在当地完成。 如果相关，研究人员将在本次试点研究后，利用本子研究的经验和结果设计 EBC 中曲霉菌检测的进一步研究。 调查人员将包括四名确诊肺孢子虫肺炎的患者和四名健康对照者。 在收集病例和健康对照的 EBC 之前，将立即收集口腔洗液肺孢子虫测试。 如果疑似肺孢子虫肺炎的患者未确诊肺孢子虫肺炎，则将该患者作为阴性对照。

血液样本（即 来自研究参与者（包括 PA 患者、健康对照和肺孢子虫肺炎患者）的常规血液样本（作为常规诊断检查的一部分）的过量血浆/血清将被储存，用于标准化和验证以及对可能发现的补充分析在 EBC 中。 血浆是血液样本的一部分，当在抽取血液样本时添加抗凝剂时，离心后剩下的部分。 因此，对于某些样品（柠檬酸盐、乙二胺四乙酸 (EDTA)、肝素涂层试管），研究人员将储存血浆（即血浆）。 含有凝血因子的血液的无细胞部分）以及允许在试管中凝固的血液样本，储存的材料将是血清（即 不含凝血因子的无细胞血液部分）。 为了确定最合适的标记物和底物以进行标准化，必须在分析血液样本之前完成 EBC 样本的分析。 仅进行生化分析，不进行基因分析。 对于健康的 PA 控制，研究人员将要求额外的血液样本来检测曲霉半乳甘露聚糖。 对于健康的肺孢子虫肺炎对照，研究者会要求使用肺孢子虫口腔清洗液进行肺孢子虫检测。