呼気凝縮液中のバイオマーカーを用いた侵襲性肺アスペルギルス症の非侵襲的診断 (NIPA)

バックグラウンド：

PA の診断を強化および改善するためのバイオマーカーの探索が進行中であり、主に血液および気管支肺胞洗浄 (BAL) 液で検出されるマーカーに焦点を当てています。 この研究では、研究者は呼気凝縮液がPAの診断に有用な情報源であるかどうかを既存の方法（すなわち、 アスペルギルスDNAのポリメラーゼ連鎖反応（PCR）検出）またはプロテオームの分析による。 しかし、アスペルギルス DNA の抽出は、これまで EBC で行われたことはありません。 このパイロット研究では、研究者は、ニューモシスチス肺炎の診断検査がより感度が高く特異的であり、またニューモシスチス肺炎がより一般的であるという事実のために、ニューモシスチス肺炎が証明された患者のEBCからニューモシスチス由来のDNAを精製することが可能かどうかを調査します。 PAより。 治験責任医師は、この研究でのタンパク質分析のために患者 PA から EBC サンプルを割愛します。

PA感染症の診断ツールとしてのEBCタンパク質分析の可能性を調査した以前の研究はありません。 このパイロット研究では、研究者は、アスペルギルスタンパク質が証明済み/可能性/可能性のあるPA患者のEBCに存在するかどうかをテストします.

方法:

この研究では、肺アスペルギルス（PA）感染が証明された、可能性が高い、または可能性がある患者と、定期的な診断検査でPAが除外されたPA感染が疑われる患者、および陰性対照、つまり血液科、感染症科、呼吸器科、心臓胸部外科の外来診療所から、年齢（10歳の範囲内）と性別が同じで、良性/怠惰な状態で、PAの疑いがない場合の精密検査を受けるオールボー大学病院。 主な結果、すなわち EBC サンプル中の特定のタンパク質の相対量の平均は、次の比較で 2 つのグループ内の正規性と標準偏差を評価した後、対応のない t 検定によって比較されます。・PAが除外された患者、および証明された/可能性が高い/可能性のあるPA対陰性対照。 3 つのグループを比較する場合、一元配置分散分析が適用されますが、これは私たちの研究の主な範囲内ではありません。

サブスタディでは、研究者は、ニューモシスチス肺炎が疑われる患者と健常対照者、すなわち、良性/怠惰な状態の診断精密検査を受け、ニューモシスチス肺炎が疑われない患者からEBCを収集します。 ニューモシスチス肺炎の診断検査は、非常に特異的で感度が高いです。 研究者は、ニューモシスチスの DNA がこれらの患者の EBC で検出可能かどうかをテストし、EBC サンプルから DNA を抽出する方法を学びます。 DNA の抽出と分析はローカルで行われます。 研究者は、関連する場合、このパイロット研究の後、EBC でのアスペルギルスの検出に関するさらなる研究の設計において、このサブ研究からの経験と結果を使用します。 研究者には、ニューモシスチス肺炎が確認された4人の患者と4人の健康な対照者が含まれます。 経口洗浄ニューモシスチス検査は、症例と健康な対照の両方についてEBCが収集される直前に収集されます。 ニューモシスチス肺炎が疑われる患者でニューモシスチス肺炎の診断が確認されない場合、その患者は陰性対照として含まれます。

血液サンプル（つまり 研究参加者（PA患者、健常対照者、ニューモシスチス肺炎患者の両方）からの定期的な診断精密検査の一環として採取された定期的な血液サンプルからの過剰な血漿/血清は、標準化と検証、および可能な調査結果の補足分析のために保存されますEBCで。 血漿は、血液サンプルの採取時に抗凝固剤が添加されたときに遠心分離後に残る血液サンプルの一部です。 したがって、一部のサンプル (クエン酸、エチレンジアミン四酢酸 (EDTA)、ヘパリン コーティング チューブ) については、研究者は血漿 (すなわち 凝固因子を含む血液の無細胞部分）、チューブ内で凝固させた血液サンプルの場合、保存される物質は血清（つまり 凝固因子を含まない血液の無細胞部分）。 標準化に最適なマーカーと基質を認定するには、血液サンプルを分析する前に EBC サンプルの分析を完了する必要があります。 生化学のみで、遺伝子解析は行われません。 健康な PA コントロールの研究者は、アスペルギルス ガラクトマンナンの検出のための余分な血液サンプルを求めます。 健康なニューモシスチス肺炎のコントロールについては、研究者はニューモシスチスのテストのためにニューモシスチスの口腔洗浄を求めます。