急性冠状动脉综合征和心房颤动的 DNA 甲基化分析：DIANA 临床试验

研究人群将包括 20 名接受心电图控制但没有进一步的心脏病学、心电图和临床心脏病学证据的健康对照、20 名 ACS 患者和 40 名 ACS 患者，无论是否受 AF 影响，均在 UOC 心脏病学的 UTIC 招募“AORN A. Cardarelli”（意大利那不勒斯）（UOC 主任：Ciro Mauro 博士，作为 AORN Cardarelli 研究部门的负责人；由心脏病学医学主任 Antonio Ruocco 博士协助）。

根据临床病史、症状、ECG、损伤生物标志物，临床诊断为 AF 和 ACS 的患者，特别是不稳定型心绞痛 (UAP)、不伴 ST 段抬高的急性心肌梗死 (NSTEMI) 和伴 ST 段抬高的急性心肌梗死 (STEMI)根据 UAP/NSTEMI 和 STEMI 指南的心脏、冠状动脉造影、风险因素和/或其他临床测试，将在“AORN A. Cardarelli”（意大利那不勒斯）的 UTIC 招募。 所有招募的受试者都将签署书面知情同意书，用于非营利研究目的的血液采样。 药物治疗、诊断信息和临床检查数据以及病史将从病历中收集。 血液样本将在正常临床实践中采集，从入院第一天起在使用肝素和造影剂等药物之前不采集额外样本（> 90% 的样本将在急性事件的一天内采集）。 原发性心肌病、先天性心脏病、瓣膜病、中风、糖尿病、自身免疫性疾病、急性感染、慢性肺部感染、慢阻肺、肺气肿、尘肺、哮喘、慢性支气管炎、肺结核、胸膜炎、慢性肝肾病、甲亢患者或将在 2 周内声称患有急性发热性疾病的受试者将被排除在研究之外。

全血的采集将在正常临床实践期间从患者和对照中进行。 生物样本将立即在 U.O.C. 的区域参考生物库中进行处理并在 +4°C 下储存。坎帕尼亚大学“Luigi Vanvitelli”（意大利那不勒斯）内科系的临床免疫学和免疫血液学、输血医学和移植免疫学专业，附设器官移植免疫学 (LIT) 单一区域参考实验室。

将在 EDTA 管中收集总共 25 mL 的外周静脉血，通常在 1 小时内处理。 根据制造商的说明，使用 Histopaque®-1077 (Sigma-Aldrich) 通过 Ficoll 梯度分离外周血单核细胞 (PBMNC)。

使用 EasySep™ 人 CD4+ T 和细胞分离试剂盒和 EasySep™ 人 CD4+ T 细胞分离试剂盒 (STEMCELL Technologies) 从 PBMC 中分别纯化 CD4+ 和 CD8+ T 淋巴细胞，起始浓度分别为 5x107/mL PBMNC。

根据制造商的方案，使用 DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) 在细胞分离后立即分离来自每个研究参与者的纯化淋巴细胞子集的基因组 DNA。 DNA 浓度和纯度将通过使用 NanoDrop 分光光度计 ND-2000 (Thermo Scientific) 通过评估吸光度比 A260/A280 和在 1% 琼脂糖凝胶上检查的 DNA 完整性来确定。

RRB 测序和生物信息学分析将由外部服务执行。