DNA-methylatie-analyse bij acuut coronair syndroom en boezemfibrilleren: DIANA klinisch onderzoek

De studiepopulatie zal bestaan ​​uit 20 gezonde controles die zijn toegelaten tot elektrocardiografische controle zonder verder cardiologisch, elektrocardiografisch en klinisch bewijs van cardiale pathologieën, 20 patiënten met ACS en 40 patiënten met ACS al dan niet beïnvloed door AF, gerekruteerd bij de UTIC van de UOC of Cardiology aan de "AORN A. Cardarelli" (Napels, Italië) (Directeur van de UOC: Dr. Ciro Mauro, als hoofd van de afdeling van de studie bij AORN Cardarelli; bijgestaan ​​door Dr. Antonio Ruocco, medisch directeur Cardiologie).

Patiënten met klinisch gediagnosticeerde AF en ACS, in het bijzonder instabiele angina pectoris (UAP), acuut myocardinfarct zonder ST-elevatie (NSTEMI) en acuut myocardinfarct met ST-elevatie (STEMI), op basis van klinische geschiedenis, symptomen, ECG, biomarkers van schade cardiale, coronaire angiografie, risicofactoren en/of andere klinische tests volgens de richtlijnen voor UAP/NSTEMI en STEMI, zullen worden aangeworven bij de UTIC van de "AORN A. Cardarelli" (Napels, Italië). Alle aangeworven proefpersonen zullen een schriftelijke geïnformeerde toestemming ondertekenen voor een bloedafname voor onderzoeksdoeleinden zonder winstoogmerk. Farmacologische therapie, diagnostische informatie en klinische onderzoeksgegevens en medische geschiedenis zullen worden verzameld uit medische dossiers. Bloedmonsters zullen tijdens de normale klinische praktijk worden afgenomen zonder aanvullende monsters te nemen vanaf de eerste dag van opname vóór het gebruik van geneesmiddelen zoals heparine en contrastmiddelen (> 90% van de monsters zal worden verzameld binnen een dag van acuut voorval). Patiënten met primaire cardiomyopathieën, aangeboren hartaandoeningen, hartklepaandoeningen, beroerte, diabetes mellitus, auto-immuunziekten, acute infecties, chronische longinfecties, COPD, emfyseem, pneumoconiose, astma, chronische bronchitis, tuberculose, pleuritis, chronische leverziekte en nierziekte, hyperthyreoïdie of proefpersonen die binnen 2 weken een acute, met koorts gepaard gaande ziekte claimen, worden uitgesloten van het onderzoek.

De verzameling van volbloed zal worden uitgevoerd bij patiënten en controles tijdens de normale klinische praktijk. Biologische monsters worden direct verwerkt en bij +4 °C opgeslagen bij de regionale referentie biobank van de U.O.C. van Klinische Immunologie en Immunohematologie, Transfusiegeneeskunde en Transplantatie-Immunologie met bijgevoegd Single Regional Reference Laboratory for Organ Transplant Immunology (LIT) bij de afdeling Interne Geneeskunde van de Universiteit van Campania "Luigi Vanvitelli" (Napels, Italië).

Er wordt in totaal 25 ml perifeer veneus bloed verzameld in EDTA-buizen en gewoonlijk binnen 1 uur verwerkt. Perifere mononucleaire bloedcellen (PBMNC's) zullen worden geïsoleerd door middel van een Ficoll-gradiënt met behulp van Histopaque®-1077 (Sigma-Aldrich) volgens de instructies van de fabrikant.

CD4+ en CD8+ T-lymfocyten zullen worden gezuiverd uit PBMC's met respectievelijk EasySep™ Human CD4+ T and Cell Isolation Kit en EasySep™ Human CD4+ T Cell Isolation Kit (STEMCELL Technologies), beginnend met respectievelijk 5x107/ml PBMNC's.

Genomisch DNA van gezuiverde lymfociet-subset van elke studiedeelnemer zal onmiddellijk na celisolatie worden geïsoleerd met behulp van DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) volgens het protocol van de fabrikant. De DNA-concentratie en -zuiverheid zullen worden bepaald met behulp van de NanoDrop-spectrofotometer ND-2000 (Thermo Scientific) door middel van de evaluatie van de absorptieverhouding A260/A280 en de DNA-integriteit wordt gecontroleerd op 1% agarosegel.

RRB Sequencing en bioinformatica-analyses zullen worden uitgevoerd door een externe dienst.