DNA-metyleringsanalyse ved akutt koronarsyndrom og atrieflimmer: DIANA Clinical Trial

Studiepopulasjonen vil inkludere 20 friske kontroller innlagt til elektrokardiografisk kontroll uten ytterligere kardiologiske, elektrokardiografiske og kliniske bevis på hjertepatologier, 20 pasienter med ACS og 40 pasienter med ACS påvirket eller ikke av AF, rekruttert ved UTIC ved UOC of Cardiology ved "AORN A. Cardarelli" (Napoli, Italia) (direktør for UOC: Dr. Ciro Mauro, som enhetsleder for studien ved AORN Cardarelli; assistert av Dr. Antonio Ruocco, medisinsk direktør for kardiologi).

Pasienter med klinisk diagnostisert AF og ACS, spesielt ustabil angina pectoris (UAP), akutt hjerteinfarkt uten ST-elevasjon (NSTEMI) og akutt hjerteinfarkt med ST-elevasjon (STEMI), basert på klinisk historie, symptomer, EKG, biomarkører for skade hjerte, koronar angiografi, risikofaktorer og/eller andre kliniske tester i henhold til retningslinjene for UAP/NSTEMI og STEMI, vil bli rekruttert ved UTIC til "AORN A. Cardarelli" (Napoli, Italia). Alle rekrutterte forsøkspersoner vil signere et skriftlig informert samtykke for en blodprøvetaking for non-profit forskningsformål. Farmakologisk terapi, diagnostisk informasjon og kliniske undersøkelsesdata og sykehistorie vil bli samlet inn fra journaler. Blodprøver vil bli tatt under normal klinisk praksis uten å ta ytterligere prøver fra første innleggelsesdag før bruk av legemidler som heparin og kontrastmidler (> 90 % av prøvene vil bli tatt innen en dag etter akutt hendelse). Pasienter med primær kardiomyopati, medfødt hjertesykdom, klaffesykdommer, hjerneslag, diabetes mellitus, autoimmune sykdommer, akutte infeksjoner, kroniske lungeinfeksjoner, KOLS, emfysem, pneumokoniose, astma, kronisk bronkitt, tuberkulose, pleuritt, kronisk leversykdom og hypertyreoidisme eller forsøkspersoner som vil kreve en akutt febersykdom innen 2 uker, vil bli ekskludert fra studien.

Innsamling av fullblod vil bli utført fra pasienter og kontroller under normal klinisk praksis. Biologiske prøver vil umiddelbart bli behandlet og lagret ved +4 °C i den regionale referansebiobanken til U.O.C. of Clinical Immunology and Immunohematology, Transfusion Medicine and Transplantation Immunology med vedlagt Single Regional Reference Laboratory for Organ Transplant Immunology (LIT) ved Institutt for indremedisin ved Universitetet i Campania "Luigi Vanvitelli" (Napoli, Italia).

Totalt 25 ml perifert veneblod samles i EDTA-rør og behandles vanligvis innen 1 time. Perifere mononukleære blodceller (PBMNCs) vil bli isolert med Ficoll-gradient ved bruk av Histopaque®-1077 (Sigma-Aldrich) i henhold til produsentens instruksjoner.

CD4+ og CD8+ T-lymfocytter vil bli renset fra PBMC-er ved å bruke EasySep™ Human CD4+ T- og celleisolasjonssett og EasySep™ Human CD4+ T-celleisolasjonssett (STEMCELL Technologies), med henholdsvis 5x107/mL PBMNC-er.

Genomisk DNA fra renset lymfosittundergruppe fra hver studiedeltaker vil bli isolert umiddelbart etter celleisolering ved bruk av DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) i henhold til produsentens protokoll. DNA-konsentrasjon og renhet vil bli bestemt ved å bruke NanoDrop spektrofotometer ND-2000 (Thermo Scientific) gjennom evaluering av absorbansforholdet A260/A280 og DNA-integritet sjekket på 1 % agarosegel.

RRB-sekvensering og bioinformatiske analyser vil bli utført av en ekstern tjeneste.