Analyse de la méthylation de l'ADN dans le syndrome coronarien aigu et la fibrillation auriculaire : essai clinique DIANA

La population d'étude comprendra 20 témoins sains admis au contrôle électrocardiographique sans autre preuve cardiologique, électrocardiographique et clinique de pathologies cardiaques, 20 patients atteints de SCA, et 40 patients atteints de SCA touchés ou non par la FA, recrutés à l'UTIC de l'UOC de Cardiologie à "AORN A. Cardarelli" (Naples, Italie) (Directeur de l'UOC : Dr Ciro Mauro, en tant que chef d'unité de l'étude à AORN Cardarelli ; assisté du Dr Antonio Ruocco, directeur médical de la cardiologie).

Patients présentant un diagnostic clinique de FA et de SCA, en particulier une angine de poitrine instable (UAP), un infarctus aigu du myocarde sans élévation du segment ST (NSTEMI) et un infarctus aigu du myocarde avec élévation du segment ST (STEMI), sur la base des antécédents cliniques, des symptômes, de l'ECG, des biomarqueurs de dommages cardiaque, coronarographie, facteurs de risque et/ou autres tests cliniques selon les lignes directrices pour UAP/NSTEMI et STEMI, seront recrutés à l'UTIC de l'"AORN A. Cardarelli" (Naples, Italie). Tous les sujets recrutés signeront un consentement éclairé écrit pour un prélèvement sanguin à des fins de recherche à but non lucratif. La thérapie pharmacologique, les informations de diagnostic et les données d'examen clinique et les antécédents médicaux seront collectés à partir des dossiers médicaux. Des échantillons de sang seront prélevés pendant la pratique clinique normale sans prélever d'échantillons supplémentaires dès le premier jour d'admission avant l'utilisation de médicaments tels que l'héparine et les agents de contraste (> 90 % des échantillons seront prélevés dans la journée suivant l'événement aigu). Patients atteints de cardiomyopathies primaires, cardiopathie congénitale, maladies valvulaires, accident vasculaire cérébral, diabète sucré, maladies auto-immunes, infections aiguës, infections pulmonaires chroniques, BPCO, emphysème, pneumoconiose, asthme, bronchite chronique, tuberculose, pleurésie, maladie hépatique et rénale chroniques, hyperthyroïdie ou les sujets qui déclareront une maladie fébrile aiguë dans les 2 semaines, seront exclus de l'étude.

La collecte de sang total sera effectuée à partir de patients et de témoins au cours de la pratique clinique normale. Les échantillons biologiques seront immédiatement traités et stockés à +4 °C à la biobanque régionale de référence de l'U.O.C. d'immunologie clinique et d'immunohématologie, de médecine transfusionnelle et d'immunologie de la transplantation avec en annexe le laboratoire régional unique de référence pour l'immunologie de la transplantation d'organes (LIT) du département de médecine interne de l'Université de Campanie "Luigi Vanvitelli" (Naples, Italie).

Un total de 25 ml de sang veineux périphérique sera prélevé dans des tubes EDTA et généralement traité en 1 heure. Les cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMNC) seront isolées par gradient de Ficoll en utilisant Histopaque®-1077 (Sigma-Aldrich) conformément aux instructions du fabricant.

Les lymphocytes T CD4+ et CD8+ seront purifiés à partir des PBMC à l'aide du kit d'isolement EasySep™ Human CD4+ T and Cell Isolation et du kit d'isolement EasySep™ Human CD4+ T Cell (STEMCELL Technologies), en commençant par 5x107/mL de PBMNC, respectivement.

L'ADN génomique du sous-ensemble de lymphocite purifié de chaque participant à l'étude sera isolé immédiatement après l'isolement des cellules à l'aide du kit DNeasy Blood & Tissue (Qiagen) conformément au protocole du fabricant. La concentration et la pureté de l'ADN seront déterminées à l'aide du spectrophotomètre NanoDrop ND-2000 (Thermo Scientific) en évaluant le rapport d'absorbance A260/A280 et l'intégrité de l'ADN vérifiée sur un gel d'agarose à 1 %.

Le séquençage RRB et les analyses bioinformatiques seront effectués par un service externe.