DNA-metyleringsanalys vid akut kranskärlssyndrom och förmaksflimmer: DIANA Clinical Trial

Studiepopulationen kommer att inkludera 20 friska kontroller som antagits till elektrokardiografisk kontroll utan ytterligare kardiologiska, elektrokardiografiska och kliniska bevis på hjärtpatologier, 20 patienter med ACS och 40 patienter med ACS påverkade eller inte av AF, rekryterade vid UTIC vid UOC of Cardiology vid "AORN A. Cardarelli" (Neapel, Italien) (direktör för UOC: Dr. Ciro Mauro, som enhetschef för studien vid AORN Cardarelli; assisterad av Dr Antonio Ruocco, medicinsk chef för kardiologi).

Patienter med kliniskt diagnostiserade AF och ACS, särskilt instabil angina pectoris (UAP), akut hjärtinfarkt utan ST-höjning (NSTEMI) och akut hjärtinfarkt med ST-höjning (STEMI), baserat på klinisk historia, symtom, EKG, biomarkörer för skada hjärt-, koronarangiografi, riskfaktorer och/eller andra kliniska tester enligt riktlinjerna för UAP/NSTEMI och STEMI, kommer att rekryteras vid UTIC av "AORN A. Cardarelli" (Neapel, Italien). Alla rekryterade försökspersoner kommer att underteckna ett skriftligt informerat samtycke för en blodprovstagning för ideella forskningsändamål. Farmakologisk terapi, diagnostisk information och klinisk undersökningsdata och medicinsk historia kommer att samlas in från journaler. Blodprover kommer att tas under normal klinisk praxis utan att ta ytterligare prover från första inläggningsdagen före användning av läkemedel som heparin och kontrastmedel (> 90 % av proverna kommer att samlas in inom en dag efter akut händelse). Patienter med primär kardiomyopati, medfödd hjärtsjukdom, klaffsjukdomar, stroke, diabetes mellitus, autoimmuna sjukdomar, akuta infektioner, kroniska lunginfektioner, KOL, emfysem, pneumokonios, astma, kronisk bronkit, tuberkulos, pleurit, kronisk leversjukdom, hypertyreoidism och hypertyreoidism eller försökspersoner som kommer att göra anspråk på en akut febersjukdom inom 2 veckor, kommer att uteslutas från studien.

Insamlingen av helblod kommer att utföras från patienter och kontroller under normal klinisk praxis. Biologiska prover kommer omedelbart att behandlas och lagras vid +4 °C i U.O.C.s regionala referensbiobank. of Clinical Immunology and Immunohematology, Transfusion Medicine and Transplantation Immunology med bifogat Single Regional Reference Laboratory for Organ Transplant Immunology (LIT) vid Institutionen för internmedicin vid Campanias universitet "Luigi Vanvitelli" (Neapel, Italien).

Totalt 25 ml perifert venöst blod samlas upp i EDTA-rör och behandlas vanligtvis inom 1 timme. Perifera mononukleära blodceller (PBMNC) kommer att isoleras med Ficoll-gradient med Histopaque®-1077 (Sigma-Aldrich) enligt tillverkarens instruktioner.

CD4+ och CD8+ T-lymfocyter kommer att renas från PBMCs med hjälp av EasySep™ Human CD4+ T och Cell Isolation Kit och EasySep™ Human CD4+ T Cell Isolation Kit (STEMCELL Technologies), med start av 5x107/mL PBMNCs, respektive.

Genomiskt DNA från renad lymfocite-undergrupp från varje studiedeltagare kommer att isoleras omedelbart efter cellisolering med DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) enligt tillverkarens protokoll. DNA-koncentration och renhet kommer att bestämmas med hjälp av NanoDrop-spektrofotometer ND-2000 (Thermo Scientific) genom utvärdering av absorbansförhållandet A260/A280 och DNA-integritet kontrollerad på 1 % agarosgel.

RRB-sekvensering och bioinformatiska analyser kommer att utföras av en extern tjänst.