高危 HPV 的肛门损伤筛查 (AnalTest)

设计方法：前瞻性、横断面、比较、双盲、随机。

研究人群：

第 1 组，来自肿瘤科的 250 名 HIV 阴性患者（150 名男性和 100 名女性）同意参与研究，并且在传染病服务处做出 HIV 阴性诊断。

第 2 组，250 名 HIV 阳性患者（150 名男性和 100 名女性）在传染病服务处就诊，被诊断为 HIV 阳性。 样本量根据捐赠的 500 个肛门测试装置和每个样本的后续分子测定进行了调整。

程序：

在这项研究中，性生活活跃且易患肛门癌的 30 至 65 岁男性和女性均可参与。

1. 免疫抑制患者，a) 感染了人类免疫缺陷病毒，HIV 或 b) 在接受器官移植后接受药物治疗。
2. 有过或曾经有过肛交的人。 有宫颈癌、外阴癌或阴道癌病史的女性。

计划开展的活动：

第一：符合纳入标准的候选患者将得到其参与本方案重要性的解释，所有疑虑将得到解决，并被要求在有见证人的情况下签署知情同意书。

第二：签署同意书后，服务提供者会进行问卷调查，了解患者的临床特征和身份，并为其分配一个连续的编号。

如果指定为非数字，则将按顺序首先进行自检，然后进行液体细胞学检查，然后进行肛门镜检查。

如果分配是偶数，则按顺序首先进行液体细胞学检查，然后进行自检和肛门镜检查。

• 对于自检：将按照以下建议为患者提供肛门测试医疗设备：a) 洗手，b) 从设备上取下塑料包装，c) 取下盖子，d) 用手握住它手柄，设备将插入肛门，e) 患者将留在肛门内 30 秒，然后将其旋转 180 度，f) 设备将慢慢退出设备，g) 将其交给助手护士。
• 护士会将设备（与样本）放入装有 5 毫升 PreservCyt 溶液的试管中，然后将其紧紧关闭。
• 带有设备和样品的试管将保持在室温下，直到运送到实验室进行处理并获得结果。
• 患者将回答满意度问卷。
• 将在三周后进行预约以授予结果。

第三：

样本处理和结果发布将在墨西哥总医院外的外部实验室进行。 在分子生物学实验室，编码样本将被处理如下：

1. 将使用雅培实时聚合酶链反应 (RT-PCR) 技术程序和 m2000 系统提取 DNA。 将确定 HPV-Ar 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66 和 68 的存在和鉴定。
2. 只有第一步的正样本；将提取 mRNA，并通过实时聚合酶链反应 (RT-PCR) 对以下特定 HPV-Ar 16、18、31、33、45、52 和 58 的 E6 和 E7 的病毒肿瘤蛋白表达进行定量. 实验室研究的结果将发送给负责的研究者。

3. 在墨西哥总医院以外的外部实验室处理样本并发布结果。 在分子生物学实验室，编码样本将被处理如下：

   1. 将使用雅培实时聚合酶链反应 (RT-PCR) 技术程序和 m2000 系统提取 DNA。 将确定 HPV-Ar 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66 和 68 的存在和鉴定。
   2. 只有第一步的正样本；将提取 mRNA，并通过实时聚合酶链反应 (RT-PCR) 对以下特定 HPV-Ar 16、18、31、33、45、52 和 58 的病毒肿瘤蛋白 E6 和 E7 的表达进行定量. 实验室研究的结果将发送给负责的研究者。

第四：

如果他们对 HPV-Ar 呈阳性，研究者将对患者进行随访以证实 HPV 感染的消除或持续存在（监测）。 E6 和 E7 信使核糖核酸 (mRNA) 呈阳性的患者将被引用进行高分辨率肛门镜检查和活检，阴性患者将受到监测。 细胞学检查结果正常或具有低度上皮内病变 (lSIL) (NIA1) 的患者将接受监测。 高级上皮内病变 (HSIL) 患者（NIA2 和 NIA3）将被安排进行高分辨率肛门镜检查和活检。

统计分析 首先将以描述性方式报告统计结果，报告主要研究变量的均值和标准差，以及本调查中分析的高危人乳头瘤病毒的存在百分比。 将应用双变量比较测试（例如 t-Student 或卡方检验）来确定存在/不存在高风险病毒的人群和人口统计数据以及临床变量（例如是否存在 HIV）之间可能存在的差异。 当没有正态性时，将应用非参数 Mann-Whitney U 检验。 线性相关性将根据分析变量的类型使用 Spearman 和 Pearson 相关性检验进行分析。 由于存在人乳头状病毒 HPV-Ar 亚型以及与液体肛门细胞学结果相比的病变类型，因此将进行 kappa 检验等数据一致性分析，研究人员将在本研究中将其视为我们的“黄金标准” , 除了进行敏感性、特异性、阳性和阴性预测值测试。 最后，虽然这不是我们主要目标的一部分，但研究人员将使用逻辑回归模型分析可能存在的与高危人乳头病毒 (HPV) 相关的风险因素。

伦理方面和生物安全。 伦理。 考虑到后续版本，将根据墨西哥卫生研究事项中的一般卫生法和赫尔辛基宣言的规定，严格遵守与人体研究伦理相关的规定。

知情同意书。 安全 所研究的对象将拥有关于将要执行的程序的完整信息。 这些研究将完全在授权研究团队的协助下在属于肿瘤服务的咨询室进行。 如果被研究对象表示不想参与该过程，将立即中止。

所有对患者进行的研究都是完全安全和无害的。