Anale letselscreening voor HPV met hoog risico (AnalTest)

ONTWERPMETHODOLOGIE: Prospectief, cross-sectioneel, vergelijkend, dubbelblind, gerandomiseerd.

ONDERZOEKSBEVOLKING:

Groep 1, 250 HIV-negatieve patiënten (150 mannen en 100 vrouwen) van de dienst oncologie die akkoord gaan met deelname aan het onderzoek en met een negatieve diagnose voor HIV gesteld bij de Dienst Infectieziekten.

Groep 2, 250 hiv-positieve patiënten (150 mannen en 100 vrouwen) bijgewoond door de Infectieziektedienst met de diagnose hiv-positief. De steekproefomvang werd aangepast aan de donatie van 500 anale testapparaten en de daaropvolgende moleculaire bepalingen voor elk monster.

PROCEDURE:

Aan dit onderzoek kunnen mannen en vrouwen tussen de 30 en 65 jaar met een actief seksueel leven en die vatbaar zijn voor het ontstaan ​​van anale kanker deelnemen.

1. Patiënten met immunosuppressie, a) geïnfecteerd met het humaan immunodeficiëntievirus, HIV of b) door medicatie na een orgaantransplantatie.
2. Personen die anale geslachtsgemeenschap hebben of hebben gehad. Vrouwen met een voorgeschiedenis van baarmoederhals-, vulva- of vaginale kanker.

GEPLANDE ACTIVITEITEN:

Ten eerste: Kandidaat-patiënten die aan de inclusiecriteria voldoen, krijgen uitleg over het belang van hun deelname aan dit protocol, al hun twijfels worden weggenomen en hen wordt gevraagd om de brief van geïnformeerde toestemming met getuigen te ondertekenen.

Ten tweede: na ondertekening van de toestemmingsverklaring zal de dienstverlener een vragenlijst opstellen om de klinische kenmerken en identificatie van de patiënt te kennen, ze krijgen een volgnummer toegewezen.

Als toewijzing een niet-nummer is, wordt de zelftest als eerste in de reeks uitgevoerd, gevolgd door vloeistofcytologie en vervolgens anoscopie.

Als de toewijzing een even getal is, wordt de vloeistofcytologie als eerste in de reeks uitgevoerd, gevolgd door de zelftest en de anoscopie.

• Voor de zelftest: de patiënt krijgt het medische apparaat voor de anale test met de volgende aanbevelingen: a) was de handen van de patiënt, b) verwijder de plastic verpakking van het apparaat, c) verwijder de hoes, d) houd het vast bij de handvat, het apparaat wordt in de anus ingebracht, e) de patiënt blijft gedurende 30 seconden intro-anaal en vervolgens wordt het 180 graden gedraaid, f) het zal het apparaat langzaam terugtrekken en g) het zal worden afgegeven aan de assistent verpleegkundige.
• De verpleegkundige plaatst het apparaatje (met het monster) in een buisje met 5 ml PreservCyt-oplossing en sluit het goed af.
• De buis met het apparaat en het monster wordt op kamertemperatuur bewaard tot het transport naar het laboratorium voor verwerking en het verkrijgen van resultaten.
• De patiënt beantwoordt een tevredenheidsenquête.
• Na drie weken wordt een afspraak gemaakt om de uitslag vast te stellen.

Derde:

De verwerking van monsters en de uitgifte van de resultaten zal gebeuren in een extern laboratorium buiten het Hospital General de México. In het Laboratorium voor Moleculaire Biologie worden de gecodeerde monsters als volgt verwerkt:

1. DNA zal worden geëxtraheerd met behulp van de Abbott Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) technologieprocedures, met het m2000-systeem. Aanwezigheid en identificatie worden bepaald voor HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 en 68.
2. Alleen de positieve monsters uit de eerste stap; mRNA zal worden geëxtraheerd en de expressie van de virale oncologie-eiwitten van de E6 en E7 zal worden gekwantificeerd voor de volgende specifieke HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 en 58 door real-time polymerasekettingreactie (RT-PCR) . De resultaten van de laboratoriumonderzoeken worden naar de verantwoordelijke onderzoeker gestuurd.

3. Verwerking van monsters in een extern laboratorium buiten het Hospital General de México en uitgifte van resultaten. In het Laboratorium voor Moleculaire Biologie worden de gecodeerde monsters als volgt verwerkt:

   1. DNA zal worden geëxtraheerd met behulp van de Abbott Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) technologieprocedures, met het m2000-systeem. De aanwezigheid en identificatie wordt bepaald voor HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 en 68.
   2. Alleen de positieve monsters uit de eerste stap; mRNA zal worden geëxtraheerd en de expressie van de virale oncologie-eiwitten E6 en E7 zal worden gekwantificeerd voor de volgende specifieke HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 en 58 door Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) . De resultaten van de laboratoriumonderzoeken worden naar de verantwoordelijke onderzoeker gestuurd.

Vierde:

Als ze positief zijn voor HPV-Ar, zal de onderzoeker de patiënt opvolgen om de eliminatie of persistentie van de HPV-infectie te bevestigen (surveillance). Patiënten die positief zijn voor E6 en E7 messenger ribonucleïnezuur (mRNA) zullen worden aangehaald voor anoscopie en biopsie met hoge resolutie, negatieve patiënten zullen onder toezicht staan. Patiënten die normaal zijn of met laaggradige intra-epitheliale laesie (lSIL) (NIA1) volgens cytologie, zullen onder toezicht staan. Patiënten met een hooggradige intra-epitheliale laesie (HSIL) (NIA2 en NIA3) zullen worden ingepland voor anoscopie en biopsie met hoge resolutie.

STATISTISCHE ANALYSE Statistische resultaten zullen eerst op een beschrijvende manier worden gerapporteerd, rapportagemiddelen en standaarddeviaties van de belangrijkste studievariabelen, evenals percentages van de aanwezigheid van hoog-risico humaan papillomavirus die in dit onderzoek zijn geanalyseerd. Bi-variate vergelijkende testen zoals t-Student of Chi-kwadraat testen zullen worden toegepast om mogelijke verschillen te identificeren tussen de groep mensen met de aanwezigheid/afwezigheid van risicovolle virussen en demografische gegevens en klinische variabelen zoals de aanwezigheid van HIV. Als er geen normaliteit is, wordt de niet-parametrische Mann-Whitney U-test toegepast. Lineaire correlaties zullen worden geanalyseerd met de Spearman en Pearson correlatietests, afhankelijk van het type geanalyseerde variabelen. Gegevensconcordantieanalyse zoals de kappa-test zal worden uitgevoerd omdat vanwege de aanwezigheid van humaan papillovirus HPV-Ar-subtypen en laesietype in vergelijking met de resultaten van vloeibare anale cytologie, de onderzoekers in deze studie onze "gouden standaard" zullen beschouwen , naast het uitvoeren van gevoeligheids-, specificiteits-, positieve en negatieve voorspellende waardetests. Ten slotte, en hoewel het geen deel uitmaakt van onze hoofddoelstellingen, zullen de onderzoekers de mogelijke geassocieerde risicofactoren analyseren met de aanwezigheid van hoog-risico humaan papillovirus (HPV) met behulp van logistische regressiemodellen.

ETHISCHE ASPECTEN EN BIOSVEILIGHEID. ETHIEK. Wat is aangegeven met betrekking tot ethiek over menselijke studies zal strikt worden gevolgd volgens de voorschriften van de algemene gezondheidswet in aangelegenheden van gezondheidsonderzoek van Mexico en de verklaring van Helsinki, rekening houdend met latere versies.

GEÏNFORMEERDE TOESTEMMINGSBRIEF. VEILIGHEID Het onderwerp dat wordt bestudeerd, heeft volledige informatie over de procedures die zullen worden uitgevoerd. De onderzoeken worden uitsluitend uitgevoerd met de hulp van het bevoegde onderzoeksteam en in de spreekkamers van de dienst Oncologie. Als de bestudeerde persoon zijn wens uitspreekt om niet deel te nemen aan het proces, wordt het onmiddellijk opgeschort.

Alle onderzoeken die bij de patiënt moeten worden uitgevoerd, zijn volkomen veilig en onschadelijk.