Triagem de lesões anais para HPV de alto risco (AnalTest)

METODOLOGIA DE DESENHO: Prospectivo, transversal, comparativo, duplo-cego, randomizado.

POPULAÇÃO DO ESTUDO:

Grupo 1, 250 pacientes HIV negativos (150 homens e 100 mulheres) do serviço de oncologia que concordaram em participar do estudo e com diagnóstico negativo para HIV feito no Serviço de Infectologia.

Grupo 2, 250 pacientes HIV positivos (150 homens e 100 mulheres) atendidos pelo Serviço de Infectologia com diagnóstico de HIV positivo. O tamanho da amostra foi ajustado para a doação de 500 aparelhos de Teste Anal e as subsequentes determinações moleculares para cada amostra.

PROCEDIMENTO:

Podem participar deste estudo homens e mulheres entre 30 e 65 anos com vida sexual ativa e susceptíveis ao desenvolvimento de câncer anal.

1. Pacientes imunossuprimidos, a) infectados com o vírus da imunodeficiência humana, HIV ou b) por medicação após receberem um transplante de órgão.
2. Indivíduos que têm ou tiveram relações sexuais anais. Mulheres com histórico de câncer cervical, vulvar ou vaginal.

ATIVIDADES PLANEJADAS:

Primeiro: Os pacientes candidatos que atenderem aos critérios de inclusão terão uma explicação sobre a importância de sua participação neste protocolo, todas as suas dúvidas serão sanadas e será solicitado que assinem o termo de consentimento livre e esclarecido com testemunhas.

Segundo: Após a assinatura do termo de consentimento, o prestador de serviço fará um questionário para conhecer as características clínicas e identificação do paciente, será atribuído a eles um número consecutivo.

Se a atribuição for não numérica, o autoteste será realizado como o primeiro da sequência, seguido da citologia líquida e depois da anuscopia.

Se a atribuição for um número par, a citologia líquida será feita como a primeira da sequência, seguida do autoteste e da anuscopia.

• Para o Autoteste: o paciente receberá o dispositivo médico Teste Anal com as seguintes recomendações: a) lavar as mãos do paciente, b) remover a embalagem plástica do dispositivo, c) remover a tampa, d) Segurá-lo pela manopla, o dispositivo será inserido no ânus, e) paciente será deixado intro-anal por 30 segundos e em seguida será girado 180 graus, f) retirará lentamente o dispositivo e g) será entregue ao assistente enfermeira.
• A enfermeira colocará o dispositivo (com a amostra) em um tubo com 5 ml de solução PreservCyt e fechará bem.
• O tubo com o aparelho e a amostra serão mantidos em temperatura ambiente até o transporte ao laboratório para processamento e obtenção dos resultados.
• O paciente responderá a um questionário de satisfação.
• Uma consulta será marcada três semanas depois para conceder o resultado.

Terceiro:

O processamento das amostras e a emissão dos resultados serão feitos em um laboratório externo fora do Hospital General de México. No Laboratório de Biologia Molecular, as amostras codificadas serão processadas da seguinte forma:

1. O DNA será extraído usando os procedimentos da tecnologia Abbott Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR), com o sistema m2000. A presença e identificação serão determinadas para os HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 e 68.
2. Apenas as amostras positivas da primeira etapa; O mRNA será extraído e a expressão das proteínas virais oncológicas do E6 e E7 serão quantificadas para os seguintes HPV-Ar específicos 16, 18, 31, 33, 45, 52 e 58 por Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (RT-PCR) . Os resultados dos estudos laboratoriais serão enviados ao investigador responsável.

3. Processamento de amostras em laboratório externo fora do Hospital General de México e emissão de resultados. No Laboratório de Biologia Molecular, as amostras codificadas serão processadas da seguinte forma:

   1. O DNA será extraído usando os procedimentos da tecnologia Abbott Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR), com o sistema m2000. A presença e identificação serão determinadas para os HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 e 68.
   2. Apenas as amostras positivas da primeira etapa; O mRNA será extraído e a expressão das proteínas virais oncológicas E6 e E7 será quantificada para os seguintes HPV-Ar específicos 16, 18, 31, 33, 45, 52 e 58 por Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (RT-PCR) . Os resultados dos estudos laboratoriais serão enviados ao investigador responsável.

Quarto:

Se forem positivos para HPV-Ar, o investigador fará o acompanhamento do paciente para corroborar a eliminação ou persistência da infecção pelo HPV (vigilância). Os pacientes positivos para ácido ribonucléico mensageiro (mRNA) E6 e E7 serão citados para anuscopia de alta resolução e biópsia, pacientes negativos estarão sob vigilância. Os pacientes normais ou com Lesão Intraepitelial de Baixo Grau (ILSIL) (NIA1) por citologia estarão sob vigilância. Os pacientes com lesão intraepitelial de alto grau (HSIL) (NIA2 e NIA3) serão agendados para anuscopia e biópsia de alta resolução.

ANÁLISE ESTATÍSTICA Os resultados estatísticos serão relatados primeiramente de forma descritiva, relatando as médias e desvios padrão das principais variáveis ​​do estudo, bem como os percentuais da presença do papilomavírus humano de alto risco analisados ​​nesta investigação. Testes comparativos bivariados como os testes t-Student ou Qui-quadrado serão aplicados para identificar possíveis diferenças entre o grupo de pessoas com presença/ausência de vírus de alto risco e variáveis ​​demográficas e clínicas como a presença de HIV. Quando não houver normalidade, será aplicado o teste não paramétrico U de Mann-Whitney. As correlações lineares serão analisadas com os testes de correlação de Spearman e Pearson dependendo do tipo de variáveis ​​analisadas. A análise de concordância de dados, como o teste kappa, será realizada devido à presença de subtipos de papilovírus humano HPV-Ar, bem como ao tipo de lesão em comparação com os resultados da citologia anal líquida que, neste estudo, os investigadores considerarão nosso "padrão ouro" , além de realizar testes de sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e negativo. Finalmente, e embora não faça parte dos nossos objetivos principais, os investigadores irão analisar os possíveis fatores de risco associados à presença de papilovírus humano (HPV) de alto risco utilizando modelos de regressão logística.

ASPECTOS ÉTICOS E BIOSSEGURANÇA. ÉTICA. O que for indicado em relação à ética em estudos humanos será estritamente seguido de acordo com o Regulamento da Lei Geral de Saúde em Matéria de Pesquisa em Saúde do México e a Declaração de Helsinki, considerando versões posteriores.

CARTA DE CONSENTIMENTO INFORMADO. SEGURANÇA O sujeito em estudo terá informações completas sobre os procedimentos que estará realizando. Os estudos serão realizados exclusivamente com o auxílio da equipe de pesquisa autorizada e em consultórios pertencentes ao Serviço de Oncologia. Caso o sujeito em estudo manifeste o desejo de não participar do processo, este será suspenso imediatamente.

Todos os estudos a serem realizados no paciente são totalmente seguros e inócuos.