Скрининг анальных травм на наличие ВПЧ высокого риска (AnalTest)

МЕТОДОЛОГИЯ РАЗРАБОТКИ: Проспективный, кросс-секционный, сравнительный, двойной слепой, рандомизированный.

ИССЛЕДУЕМОЕ НАСЕЛЕНИЕ:

1 группа – 250 ВИЧ-негативных пациентов (150 мужчин и 100 женщин) из онкологической службы, давших согласие на участие в исследовании и с отрицательным диагнозом на ВИЧ, поставленным в инфекционной службе.

2 группа – 250 ВИЧ-позитивных пациентов (150 мужчин и 100 женщин), обратившихся в инфекционную службу с диагнозом «ВИЧ-положительный». Размер образца был скорректирован с учетом пожертвования 500 устройств для анального теста и последующего молекулярного определения для каждого образца.

ПРОЦЕДУРА:

В этом исследовании могут участвовать мужчины и женщины в возрасте от 30 до 65 лет, ведущие активную половую жизнь и подверженные развитию рака анального канала.

1. Пациенты с иммунодефицитом, а) инфицированные вирусом иммунодефицита человека, ВИЧ или б) медикаментозно после пересадки органов.
2. Лица, которые имеют или имели анальный секс. Женщины с историей рака шейки матки, вульвы или влагалища.

ПЛАНИРУЕМЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ:

Во-первых: пациентам-кандидатам, отвечающим критериям включения, будет разъяснена важность их участия в этом протоколе, все их сомнения будут разрешены, и им будет предложено подписать письмо об информированном согласии со свидетелями.

Во-вторых: после подписания письма-согласия поставщик услуг составит анкету, чтобы узнать клинические характеристики и идентификацию пациента, им будет присвоен порядковый номер.

Если присвоение не является числом, самодиагностика будет выполняться первой в последовательности, за ней следует жидкостная цитология, а затем аноскопия.

Если присвоение является четным числом, жидкостная цитология будет выполняться первой в последовательности, за которой следуют самотестирование и аноскопия.

• Для самотестирования: пациенту выдается медицинский прибор «Анальный тест» со следующими рекомендациями: а) мытье рук пациента, б) снятие пластиковой упаковки с прибора, в) снятие крышки, г) удерживание его за рукоятку, устройство будет введено в задний проход, д) пациента оставят интро-анально на 30 секунд, а затем повернут на 180 градусов, е) устройство будет медленно извлекаться и ж) оно будет доставлено ассистенту медсестра.
• Медсестра поместит устройство (с образцом) в пробирку с 5 мл раствора PreservCyt и плотно ее закроет.
• Пробирка с устройством и образец будут храниться при комнатной температуре до транспортировки в лабораторию для обработки и получения результатов.
• Пациент отвечает на вопросник удовлетворенности.
• Назначение будет назначено через три недели, чтобы предоставить результат.

Третий:

Обработка образцов и выдача результатов будут осуществляться во внешней лаборатории за пределами больницы General de México. В лаборатории молекулярной биологии закодированные образцы будут обрабатываться следующим образом:

1. ДНК будет извлечена с использованием технологии полимеразной цепной реакции Abbott в реальном времени (RT-PCR) с помощью системы m2000. Наличие и идентификация будут определены для HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68.
2. Только положительные образцы с первого шага; Будет извлечена мРНК, и экспрессия белков вирусной онкологии E6 и E7 будет количественно определена для следующих конкретных HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 и 58 с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени (RT-PCR). . Результаты лабораторных исследований будут отправлены ответственному исследователю.

3. Обработка образцов во внешней лаборатории за пределами больницы General de México и выдача результатов. В лаборатории молекулярной биологии закодированные образцы будут обрабатываться следующим образом:

   1. ДНК будет извлечена с использованием технологии полимеразной цепной реакции Abbott в реальном времени (RT-PCR) с помощью системы m2000. Наличие и идентификация будут определяться для HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68.
   2. Только положительные образцы с первого шага; Будет извлечена мРНК, и будет количественно определена экспрессия белков вирусной онкологии E6 и E7 для следующих конкретных HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 и 58 с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени (RT-PCR). . Результаты лабораторных исследований будут отправлены ответственному исследователю.

Четвертое:

Если они положительны на HPV-Ar, исследователь будет наблюдать за пациентом, чтобы подтвердить элиминацию или персистенцию инфекции HPV (наблюдение). Пациенты с положительным результатом на E6 и E7 информационную рибонуклеиновую кислоту (мРНК) будут направлены на аноскопию высокого разрешения и биопсию, пациенты с отрицательным результатом будут находиться под наблюдением. Пациенты, которые здоровы или имеют внутриэпителиальное поражение низкой степени (lSIL) (NIA1) по данным цитологии, будут находиться под наблюдением. Пациентам с интраэпителиальным поражением высокой степени (HSIL) (NIA2 и NIA3) будет назначена аноскопия с высоким разрешением и биопсия.

СТАТИСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ Статистические результаты будут представлены сначала в описательной форме с указанием средних значений и стандартных отклонений основных переменных исследования, а также процентного содержания вируса папилломы человека высокого риска, проанализированного в этом исследовании. Двумерные сравнительные тесты, такие как t-критерий Стьюдента или хи-квадрат, будут применяться для выявления возможных различий между группой людей с наличием/отсутствием вирусов высокого риска и демографическими и клиническими переменными, такими как наличие ВИЧ. При отсутствии нормальности применяется непараметрический U-критерий Манна-Уитни. Линейные корреляции будут анализироваться с помощью корреляционных тестов Спирмена и Пирсона в зависимости от типа анализируемых переменных. Анализ соответствия данных, такой как каппа-тест, будет выполняться, потому что из-за наличия подтипов HPV-Ar папилловируса человека, а также типа поражения по сравнению с результатами жидкостной анальной цитологии исследователи будут считать в этом исследовании наш «золотой стандарт». , в дополнение к выполнению тестов на чувствительность, специфичность, положительную и отрицательную прогностическую ценность. Наконец, хотя это и не является частью наших основных задач, исследователи проанализируют возможные факторы риска, связанные с наличием папилловируса человека (ВПЧ) высокого риска, используя модели логистической регрессии.

ЭТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ И БИОБЕЗОПАСНОСТЬ. ЭТИКА. То, что указано в отношении этики исследований на людях, будет строго соблюдаться в соответствии с Положениями Общего закона о здравоохранении в вопросах медицинских исследований Мексики и Хельсинкской декларацией с учетом последующих версий.

ИНФОРМИРОВАННОЕ СОГЛАСИЕ. БЕЗОПАСНОСТЬ Испытуемый будет иметь полную информацию о процедурах, которые будут проводиться. Исследования будут проводиться исключительно при содействии уполномоченной исследовательской группы и в кабинетах, принадлежащих Онкологической службе. Если исследуемый субъект изъявит желание не участвовать в процессе, он будет немедленно приостановлен.

Все исследования, проводимые на пациенте, абсолютно безопасны и безвредны.