Detección de lesiones anales para VPH de alto riesgo (AnalTest)

METODOLOGÍA DE DISEÑO: Prospectivo, transversal, comparativo, doble ciego, aleatorizado.

POBLACIÓN DE ESTUDIO:

Grupo 1, 250 pacientes VIH negativos (150 hombres y 100 mujeres) del servicio de oncología que aceptaron participar en el estudio y con diagnóstico negativo para VIH realizado en el Servicio de Enfermedades Infecciosas.

Grupo 2, 250 pacientes VIH positivos (150 hombres y 100 mujeres) atendidos por el Servicio de Enfermedades Infecciosas con diagnóstico de VIH positivo. El tamaño de la muestra se ajustó a la donación de 500 dispositivos Anal Test y las posteriores determinaciones moleculares de cada muestra.

PROCEDIMIENTO:

En este estudio pueden participar hombres y mujeres entre 30 y 65 años con vida sexual activa y que sean susceptibles al desarrollo de cáncer anal.

1. Pacientes inmunodeprimidos, a) infectados por el virus de la inmunodeficiencia humana, VIH o b) por medicación después de recibir un trasplante de órgano.
2. Individuos que tienen o han tenido relaciones sexuales anales. Mujeres con antecedentes de cáncer de cuello uterino, vulva o vagina.

ACTIVIDADES PLANIFICADAS:

Primero: A los pacientes candidatos que cumplan con los criterios de inclusión se les explicará la importancia de su participación en este protocolo, se resolverán todas sus dudas y se les pedirá que firmen la carta de consentimiento informado con testigos.

Segundo: Luego de firmar la carta de consentimiento, el prestador del servicio realizará un cuestionario para conocer las características clínicas e identificación del paciente, se le asignará un número correlativo.

Si la asignación no es un número, la autoprueba se realizará como la primera en la secuencia, seguida de la citología líquida y luego la anoscopia.

Si la asignación es un número par, la citología líquida se realizará como la primera en secuencia, seguida del autoexamen y la anoscopia.

• Para el Autotest: al paciente se le entregará el dispositivo médico Anal Test con las siguientes recomendaciones: a) lavado de manos del paciente, b) retirar el envoltorio plástico del dispositivo, c) quitar la funda, d) sujetarlo por el mango, se introducirá el dispositivo en el ano, e) se dejará introanal al paciente durante 30 segundos y luego se girará 180 grados, f) se retirará lentamente el dispositivo y g) se entregará al asistente enfermero.
• La enfermera colocará el dispositivo (con la muestra) en un tubo con 5 ml de solución PreservCyt y lo cerrará herméticamente.
• El tubo con el dispositivo y la muestra se mantendrán a temperatura ambiente hasta su transporte al laboratorio para su procesamiento y obtención de resultados.
• El paciente responderá a un cuestionario de satisfacción.
• Se dará cita tres semanas después para otorgar el resultado.

Tercero:

El procesamiento de muestras y emisión de resultados se realizará en un laboratorio externo fuera del Hospital General de México. En el Laboratorio de Biología Molecular, las muestras codificadas se procesarán de la siguiente manera:

1. El ADN se extraerá utilizando los procedimientos de la tecnología Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) de Abbott, con el sistema m2000. Se determinará presencia e identificación para HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 y 68.
2. Solo las muestras positivas del primer paso; Se extraerá ARNm y se cuantificará la expresión de proteínas de oncología viral de E6 y E7 para los siguientes VPH-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 y 58 específicos mediante la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) . Los resultados de los estudios de laboratorio serán enviados al investigador responsable.

3. Procesamiento de muestras en laboratorio externo fuera del Hospital General de México y emisión de resultados. En el Laboratorio de Biología Molecular, las muestras codificadas se procesarán de la siguiente manera:

   1. El ADN se extraerá utilizando los procedimientos de la tecnología Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) de Abbott, con el sistema m2000. Se determinará la presencia e identificación para HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 y 68.
   2. Solo las muestras positivas del primer paso; Se extraerá el ARNm y se cuantificará la expresión de las proteínas de oncología viral E6 y E7 para los siguientes HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 y 58 específicos mediante la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) . Los resultados de los estudios de laboratorio serán enviados al investigador responsable.

Cuatro:

Si son positivos a VPH-Ar, el investigador realizará un seguimiento del paciente para corroborar la eliminación o persistencia de la infección por VPH (vigilancia). Los pacientes que sean positivos para ácido ribonucleico mensajero (ARNm) E6 y E7 serán citados para anoscopia de alta resolución y biopsia, los pacientes negativos estarán en vigilancia. Los pacientes normales o con Lesión Intraepitelial de Bajo grado (lSIL) (NIA1) por citología estarán en vigilancia. Los pacientes con lesiones intraepiteliales de alto grado (HSIL) (NIA2 y NIA3) serán programados para una anoscopia y biopsia de alta resolución.

ANÁLISIS ESTADÍSTICO Los resultados estadísticos se reportarán primero de manera descriptiva, reportando medias y desviaciones estándar de las principales variables de estudio, así como porcentajes de presencia del virus del papiloma humano de alto riesgo analizados en esta investigación. Se aplicarán pruebas comparativas bivariadas como t-Student o Chi-cuadrado para identificar posibles diferencias entre el grupo de personas con presencia/ausencia de virus de alto riesgo y variables demográficas y clínicas como la presencia de VIH. Cuando no exista normalidad, se aplicará la prueba no paramétrica U de Mann-Whitney. Las correlaciones lineales se analizarán con las pruebas de correlación de Spearman y Pearson dependiendo del tipo de variables analizadas. Se realizará un análisis de concordancia de datos, como la prueba kappa, debido a la presencia de subtipos de VPH-Ar del papilovirus humano, así como al tipo de lesión en comparación con los resultados de la citología anal líquida, que en este estudio los investigadores considerarán nuestro "estándar de oro". , además de realizar pruebas de sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y negativo. Finalmente, y aunque no forma parte de nuestros objetivos principales, los investigadores analizarán los posibles factores de riesgo asociados a la presencia del virus del papiloma humano (VPH) de alto riesgo mediante modelos de regresión logística.

ASPECTOS ÉTICOS Y BIOSEGURIDAD. ÉTICA. Lo indicado en relación con la ética en estudios humanos se seguirá estrictamente de acuerdo con el Reglamento de la Ley General de Salud en Materia de Investigación en Salud de México, y la Declaración de Helsinki, considerando versiones posteriores.

CARTA DE CONSENTIMIENTO INFORMADO. SEGURIDAD El sujeto en estudio tendrá información completa sobre los procedimientos que estará realizando. Los estudios se realizarán exclusivamente con la asistencia del equipo de investigación autorizado y en consultorios pertenecientes al Servicio de Oncología. Si el sujeto en estudio manifiesta su deseo de no participar en el proceso, éste será suspendido de inmediato.

Todos los estudios a realizar al paciente son totalmente seguros e inocuos.