Screening delle lesioni anali per HPV ad alto rischio (AnalTest)

METODOLOGIA DI PROGETTAZIONE: prospettico, trasversale, comparativo, in doppio cieco, randomizzato.

POPOLAZIONE STUDIO:

Gruppo 1, 250 pazienti HIV negativi (150 uomini e 100 donne) del servizio di oncologia che accettano di partecipare allo studio e con diagnosi di HIV negativa fatta al Servizio di Malattie Infettive.

Gruppo 2, 250 pazienti sieropositivi (150 uomini e 100 donne) assistiti dal Servizio Malattie Infettive diagnosticati sieropositivi. La dimensione del campione è stata adeguata alla donazione di 500 dispositivi Anal Test e alle successive determinazioni molecolari per ciascun campione.

PROCEDURA:

A questo studio possono partecipare uomini e donne tra i 30 ei 65 anni con una vita sessuale attiva e che sono suscettibili allo sviluppo del cancro anale.

1. Pazienti immunodepressi, a) infetti dal virus dell'immunodeficienza umana, HIV o b) da farmaci dopo aver ricevuto un trapianto di organi.
2. Individui che hanno o hanno avuto rapporti anali. Donne con una storia di cancro cervicale, vulvare o vaginale.

ATTIVITÀ PREVISTE:

Primo: i pazienti candidati che soddisfano i criteri di inclusione avranno una spiegazione dell'importanza della loro partecipazione a questo protocollo, tutti i loro dubbi saranno risolti e verrà chiesto loro di firmare la lettera di consenso informato con i testimoni.

Secondo: Dopo aver firmato la lettera di consenso, il fornitore del servizio farà un questionario per conoscere le caratteristiche cliniche e l'identificazione del paziente, gli verrà assegnato un numero progressivo.

Se l'assegnazione non è un numero, l'autotest verrà eseguito come primo in sequenza, seguito dalla citologia liquida e quindi dall'anoscopia.

Se l'assegnazione è un numero pari, la citologia liquida verrà eseguita come prima in sequenza, seguita dall'autotest e dall'anoscopia.

• Per l'autotest: al paziente verrà consegnato il dispositivo medico Anal Test con le seguenti raccomandazioni: a) lavaggio delle mani del paziente, b) rimozione dell'imballaggio in plastica dal dispositivo, c) rimozione del coperchio, d) Tenendolo per il maniglia, il dispositivo verrà inserito nell'ano, e) il paziente verrà lasciato intro-anale per 30 secondi e poi verrà ruotato di 180 gradi, f) ritirerà lentamente il dispositivo e g) verrà consegnato all'assistente infermiera.
• L'infermiere inserirà il dispositivo (con il campione) in una provetta con 5 ml di soluzione PreservCyt e la chiuderà ermeticamente.
• La provetta con il dispositivo e il campione saranno conservati a temperatura ambiente fino al trasporto al laboratorio per l'elaborazione e l'ottenimento dei risultati.
• Il paziente risponderà a un questionario di soddisfazione.
• Tre settimane dopo verrà fissato un appuntamento per garantire il risultato.

Terzo:

L'elaborazione dei campioni e l'emissione dei risultati saranno effettuati in un laboratorio esterno all'esterno dell'Hospital General de México. Nel Laboratorio di Biologia Molecolare i campioni codificati verranno processati come segue:

1. Il DNA sarà estratto utilizzando le procedure della tecnologia Abbott Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR), con il sistema m2000. La presenza e l'identificazione saranno determinate per HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 e 68.
2. Solo i campioni positivi del primo passaggio; L'mRNA sarà estratto e l'espressione delle proteine ​​oncologiche virali di E6 ed E7 sarà quantificata per i seguenti specifici HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 e 58 mediante Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) . I risultati degli studi di laboratorio saranno inviati allo sperimentatore responsabile.

3. Elaborazione dei campioni in un laboratorio esterno al di fuori dell'Hospital General de México e rilascio dei risultati. Nel Laboratorio di Biologia Molecolare i campioni codificati verranno processati come segue:

   1. Il DNA sarà estratto utilizzando le procedure della tecnologia Abbott Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR), con il sistema m2000. La presenza e l'identificazione saranno determinate per HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 e 68.
   2. Solo i campioni positivi del primo passaggio; L'mRNA sarà estratto e l'espressione delle proteine ​​oncologiche virali E6 ed E7 sarà quantificata per i seguenti specifici HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 e 58 mediante Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) . I risultati degli studi di laboratorio saranno inviati allo sperimentatore responsabile.

Il quarto:

Se sono positivi all'HPV-Ar, lo sperimentatore seguirà il paziente per confermare l'eliminazione o la persistenza dell'infezione da HPV (sorveglianza). I pazienti che sono positivi per l'acido ribonucleico messaggero E6 ed E7 (mRNA) saranno citati per anoscopia e biopsia ad alta risoluzione, i pazienti negativi saranno sotto sorveglianza. I pazienti che sono normali o con lesione intraepiteliale di basso grado (lSIL) (NIA1) da citologia saranno sotto sorveglianza. I pazienti con lesione intraepiteliale di alto grado (HSIL) (NIA2 e NIA3) saranno programmati per anoscopia e biopsia ad alta risoluzione.

ANALISI STATISTICA I risultati statistici saranno riportati dapprima in modo descrittivo, riportando medie e deviazioni standard delle principali variabili di studio, nonché percentuali di presenza di papillomavirus umano ad alto rischio analizzati in questa indagine. Saranno applicati test comparativi bi-variati come t-Student o test Chi-quadrato per identificare possibili differenze tra il gruppo di persone con presenza/assenza di virus ad alto rischio e variabili demografiche e cliniche come la presenza di HIV. Quando non c'è normalità, verrà applicato il test U di Mann-Whitney non parametrico. Le correlazioni lineari saranno analizzate con i test di correlazione di Spearman e Pearson a seconda del tipo di variabili analizzate. L'analisi della concordanza dei dati come il test kappa verrà eseguita perché a causa della presenza di sottotipi HPV-Ar del papillovirus umano e del tipo di lesione rispetto ai risultati della citologia anale liquida che in questo studio i ricercatori considereranno il nostro "gold standard" , oltre a eseguire test di sensibilità, specificità, valore predittivo positivo e negativo. Infine, e sebbene non faccia parte dei nostri obiettivi principali, i ricercatori analizzeranno i possibili fattori di rischio associati alla presenza di papillovirus umano (HPV) ad alto rischio utilizzando modelli di regressione logistica.

ASPETTI ETICI E BIOSECURITY. ETICA. Quanto indicato in relazione all'etica negli studi sull'uomo sarà rigorosamente seguito secondo i Regolamenti della Legge Generale della Salute in Materia di Ricerca Sanitaria del Messico e la Dichiarazione di Helsinki, considerando le versioni successive.

LETTERA DI CONSENSO INFORMATO. SICUREZZA Il soggetto oggetto di studio avrà completa informazione sulle procedure che andrà a svolgere. Gli studi saranno svolti esclusivamente con l'assistenza del gruppo di ricerca autorizzato e in ambulatori appartenenti al Servizio di Oncologia. Se il soggetto in studio esprime la volontà di non partecipare al processo, questo sarà immediatamente sospeso.

Tutti gli studi da effettuare sul paziente sono totalmente sicuri e innocui.