Screening análního poranění na vysoce rizikové HPV (AnalTest)

METODIKA NÁVRHU: Prospektivní, průřezová, srovnávací, dvojitě zaslepená, randomizovaná.

STUDIJNÍ POPULACE:

Skupina 1, 250 HIV negativních pacientů (150 mužů a 100 žen) z onkologické služby, kteří souhlasí s účastí ve studii a s negativní diagnózou HIV provedenou na infekčním oddělení.

Skupina 2, 250 HIV pozitivních pacientů (150 mužů a 100 žen) navštěvovaných Infekční službou s diagnózou HIV pozitivní. Velikost vzorku byla upravena podle daru 500 zařízení Anal Test a následných molekulárních stanovení pro každý vzorek.

POSTUP:

Této studie se mohou zúčastnit muži a ženy ve věku 30 až 65 let s aktivním sexuálním životem, kteří jsou náchylní k rozvoji rakoviny konečníku.

1. Imunosuprimovaní pacienti, a) infikovaní virem lidské imunodeficience, HIV nebo b) medikací po transplantaci orgánu.
2. Jedinci, kteří mají nebo měli anální styk. Ženy s anamnézou rakoviny děložního čípku, vulvy nebo pochvy.

PLÁNOVANÉ AKTIVITY:

Za prvé: Kandidátským pacientům, kteří splňují kritéria pro zařazení, bude vysvětlena důležitost jejich účasti v tomto protokolu, všechny jejich pochybnosti budou vyřešeny a budou požádáni, aby podepsali informovaný souhlas se svědky.

Za druhé: Po podepsání schvalovacího dopisu poskytovatel služeb vyhotoví dotazník ke zjištění klinických charakteristik a identifikace pacienta, bude jim přiděleno pořadové číslo.

Pokud je přiřazení jiné než číslo, provede se autotest jako první v pořadí, následuje tekutá cytologie a poté anoskopie.

Pokud je přiřazení sudé číslo, provede se tekutá cytologie jako první v pořadí, následuje autotest a anoskopie.

• Pro autotest: pacient dostane zdravotnický prostředek Anal Test s následujícími doporučeními: a) mytí rukou pacienta, b) odstranění plastového obalu z přístroje, c) odstranění krytu, d) držení za rukojetí, přístroj se zavede do řitního otvoru, e) pacient se ponechá intraanálně 30 sekund a poté se otočí o 180 stupňů, f) přístroj pomalu vytáhne a g) bude doručen asistentovi zdravotní sestřička.
• Sestra vloží přístroj (se vzorkem) do zkumavky s 5 ml roztoku PreservCyt a pevně uzavře.
• Zkumavka se zařízením a vzorek budou uchovávány při pokojové teplotě až do transportu do laboratoře ke zpracování a získání výsledků.
• Pacient odpoví na dotazník spokojenosti.
• O tři týdny později bude schůzka k předání výsledku.

Třetí:

Zpracování vzorků a výdej výsledků bude probíhat v externí laboratoři mimo Hospital General de México. V Laboratoři molekulární biologie budou kódované vzorky zpracovány následovně:

1. DNA bude extrahována pomocí technologie Abbott Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) se systémem m2000. U HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 a 68 bude stanovena přítomnost a identifikace.
2. Pouze pozitivní vzorky z prvního kroku; mRNA bude extrahována a exprese virových onkologických proteinů E6 a E7 bude kvantifikována pro následující specifické HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 a 58 pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase (RT-PCR) . Výsledky laboratorních studií budou zaslány odpovědnému zkoušejícímu.

3. Zpracování vzorků v externí laboratoři mimo Hospital General de México a výdej výsledků. V Laboratoři molekulární biologie budou kódované vzorky zpracovány následovně:

   1. DNA bude extrahována pomocí technologie Abbott Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) se systémem m2000. U HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 a 68 bude stanovena přítomnost a identifikace.
   2. Pouze pozitivní vzorky z prvního kroku; mRNA bude extrahována a exprese virových onkologických proteinů E6 a E7 bude kvantifikována pro následující specifické HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 a 58 pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase (RT-PCR) . Výsledky laboratorních studií budou zaslány odpovědnému zkoušejícímu.

Čtvrtý:

Pokud jsou pozitivní na HPV-Ar, vyšetřovatel bude pacienta sledovat, aby potvrdil eliminaci nebo přetrvávání infekce HPV (sledování). Pacienti, kteří jsou pozitivní na E6 a E7 messenger ribonukleovou kyselinu (mRNA), budou citováni pro anoskopii a biopsii s vysokým rozlišením, negativní pacienti budou pod dohledem. Pacienti, kteří jsou normální nebo mají cytologicky nízký stupeň intraepiteliální léze (lSIL) (NIA1), budou pod dohledem. U pacientů s intraepiteliální lézí vysokého stupně (HSIL) (NIA2 a NIA3) bude naplánována anoskopie s vysokým rozlišením a biopsie.

STATISTICKÁ ANALÝZA Statistické výsledky budou uvedeny nejprve popisným způsobem, budou uváděny průměry a standardní odchylky hlavních proměnných studie, stejně jako procenta přítomnosti vysoce rizikového lidského papilomaviru analyzovaného v tomto šetření. K identifikaci možných rozdílů mezi skupinou lidí s přítomností/nepřítomností vysoce rizikových virů a demografickými a klinickými proměnnými, jako je přítomnost HIV, budou použity dvourozměrné srovnávací testy, jako jsou t-Student nebo Chí-kvadrát testy. Pokud neexistuje žádná normalita, použije se neparametrický Mann-Whitney U test. Lineární korelace budou analyzovány Spearmanovým a Pearsonovým korelačním testem v závislosti na typu analyzovaných proměnných. Analýza konkordance dat, jako je kappa test, bude provedena, protože vzhledem k přítomnosti podtypů lidského papiloviru HPV-Ar a typu léze ve srovnání s výsledky tekuté anální cytologie budou v této studii vyšetřovatelé považovat náš "zlatý standard" , kromě provádění testů citlivosti, specificity, pozitivní a negativní prediktivní hodnoty. A konečně, ačkoli to není součástí našich hlavních cílů, vyšetřovatelé budou analyzovat možné související rizikové faktory s přítomností vysoce rizikového lidského papilloviru (HPV) pomocí logistických regresních modelů.

ETICKÉ ASPEKTY A BEZPEČNOST. ETIKA. To, co je uvedeno v souvislosti s etikou při studiích na lidech, bude přísně dodržováno v souladu s nařízeními obecného zákona o zdraví ve věcech výzkumu zdraví z Mexika a Helsinskou deklarací s ohledem na následující verze.

DOPIS INFORMOVANÉHO SOUHLASU. BEZPEČNOST Zkoumaný subjekt bude mít úplné informace o postupech, které bude provádět. Studie budou prováděny výhradně za asistence autorizovaného výzkumného týmu a v ordinacích Onkologické služby. Pokud studovaný subjekt projeví přání neúčastnit se procesu, bude okamžitě pozastaven.

Všechny studie, které mají být provedeny na pacientovi, jsou zcela bezpečné a neškodné.