Badania przesiewowe urazów odbytu w kierunku wirusa HPV wysokiego ryzyka (AnalTest)

METODOLOGIA PROJEKTOWANIA: Prospektywna, przekrojowa, porównawcza, podwójnie ślepa, randomizowana.

BADANA POPULACJA:

Grupa 1, 250 pacjentów HIV-ujemnych (150 mężczyzn i 100 kobiet) ze służby onkologicznej, którzy wyrazili zgodę na udział w badaniu iz ujemnym rozpoznaniem w kierunku HIV postawionym w Poradni Chorób Zakaźnych.

Grupa 2, 250 pacjentów zakażonych wirusem HIV (150 mężczyzn i 100 kobiet) objętych przez Infectious Disease Service, u których zdiagnozowano wirusa HIV. Wielkość próbki dostosowano do oddania 500 urządzeń do testu analnego i kolejnych oznaczeń molekularnych dla każdej próbki.

PROCEDURA:

W badaniu mogą brać udział kobiety i mężczyźni w wieku od 30 do 65 lat, prowadzący aktywne życie seksualne i podatni na rozwój raka odbytu.

1. Pacjenci z obniżoną odpornością, a) zakażeni ludzkim wirusem upośledzenia odporności, HIV lub b) lekami po przeszczepieniu narządu.
2. Osoby, które odbyły lub odbyły stosunek analny. Kobiety z historią raka szyjki macicy, sromu lub pochwy.

ZAPLANOWANE ZAJĘCIA:

Po pierwsze: kandydaci na pacjentów, którzy spełniają kryteria włączenia, otrzymają wyjaśnienie znaczenia ich udziału w tym protokole, wszystkie ich wątpliwości zostaną rozwiązane i zostaną poproszeni o podpisanie oświadczenia o świadomej zgodzie ze świadkami.

Po drugie: Po podpisaniu zgody, usługodawca sporządzi ankietę, aby poznać charakterystykę kliniczną i identyfikację pacjenta, zostanie mu nadany kolejny numer.

Jeśli przypisanie nie jest liczbą, autotest zostanie przeprowadzony jako pierwszy w kolejności, po którym nastąpi cytologia płynna, a następnie anoskopia.

Jeśli przypisanie jest liczbą parzystą, jako pierwsza w kolejności zostanie wykonana cytologia płynna, a następnie autotest i anoskopia.

• W celu wykonania Samotestu: pacjent otrzyma wyrób medyczny Test Analny z następującymi zaleceniami: a) umycie rąk pacjenta, b) zdjęcie opakowania foliowego z urządzenia, c) zdjęcie pokrywy, d) trzymanie za uchwytu, urządzenie zostanie wprowadzone do odbytu, e) pacjent zostanie pozostawiony w intro-analnej przez 30 sekund, a następnie zostanie obrócony o 180 stopni, f) powoli wycofa urządzenie i g) zostanie dostarczone do asystenta pielęgniarka.
• Pielęgniarka umieści urządzenie (wraz z próbką) w probówce z 5 ml roztworu PreservCyt i szczelnie ją zamknie.
• Probówka z urządzeniem i próbka będą przechowywane w temperaturze pokojowej do czasu transportu do laboratorium w celu przetworzenia i uzyskania wyników.
• Pacjent odpowie na ankietę satysfakcji.
• Wizyta zostanie wyznaczona trzy tygodnie później w celu ustalenia wyniku.

Trzeci:

Przetwarzanie próbek i wydawanie wyników zostanie przeprowadzone w zewnętrznym laboratorium poza Hospital General de México. W Laboratorium Biologii Molekularnej kodowane próbki będą przetwarzane w następujący sposób:

1. DNA zostanie wyekstrahowane przy użyciu procedur technologii reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym (RT-PCR) firmy Abbott, przy użyciu systemu m2000. Obecność i identyfikacja zostaną określone dla HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 i 68.
2. Tylko pozytywne próbki z pierwszego etapu; mRNA zostanie wyekstrahowany, a ekspresja wirusowych białek onkologicznych E6 i E7 zostanie określona ilościowo dla następujących specyficznych HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 i 58 za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym (RT-PCR) . Wyniki badań laboratoryjnych zostaną przesłane do odpowiedzialnego badacza.

3. Przetwarzanie próbek w zewnętrznym laboratorium poza Hospital General de México i wydawanie wyników. W Laboratorium Biologii Molekularnej kodowane próbki będą przetwarzane w następujący sposób:

   1. DNA zostanie wyekstrahowane przy użyciu procedur technologii reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym (RT-PCR) firmy Abbott, przy użyciu systemu m2000. Obecność i identyfikacja zostaną określone dla HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 i 68.
   2. Tylko pozytywne próbki z pierwszego etapu; mRNA zostanie wyekstrahowany, a ekspresja wirusowych białek onkologicznych E6 i E7 zostanie określona ilościowo dla następujących specyficznych HPV-Ar 16, 18, 31, 33, 45, 52 i 58 za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym (RT-PCR) . Wyniki badań laboratoryjnych zostaną przesłane do odpowiedzialnego badacza.

Czwarty:

Jeśli wynik testu HPV-Ar jest pozytywny, badacz będzie obserwował pacjenta w celu potwierdzenia eliminacji lub utrzymywania się zakażenia HPV (obserwacja). Pacjenci z pozytywnym wynikiem na obecność informacyjnego kwasu rybonukleinowego (mRNA) E6 i E7 zostaną skierowani na anoskopię i biopsję o wysokiej rozdzielczości, pacjenci z wynikiem ujemnym będą pod obserwacją. Pacjenci, którzy są normalni lub ze zmianami śródnabłonkowymi niskiego stopnia (lSIL) (NIA1) w badaniu cytologicznym będą objęci obserwacją. Pacjenci ze zmianami śródnabłonkowymi wysokiego stopnia (HSIL) (NIA2 i NIA3) zostaną zaplanowani na anoskopię i biopsję o wysokiej rozdzielczości.

ANALIZA STATYSTYCZNA Wyniki statystyczne zostaną przedstawione najpierw w sposób opisowy, podając średnie i odchylenia standardowe głównych zmiennych badania, jak również procent obecności wirusa brodawczaka ludzkiego wysokiego ryzyka analizowanego w tym badaniu. Dwuwymiarowe testy porównawcze, takie jak testy t-Studenta lub testy chi-kwadrat, zostaną zastosowane w celu zidentyfikowania możliwych różnic między grupą osób z obecnością/nieobecnością wirusów wysokiego ryzyka oraz zmiennymi demograficznymi i klinicznymi, takimi jak obecność wirusa HIV. Gdy nie ma normalności, zastosowany zostanie nieparametryczny test U Manna-Whitneya. Korelacje liniowe będą analizowane testami korelacji Spearmana i Pearsona w zależności od rodzaju analizowanych zmiennych. Przeprowadzona zostanie analiza zgodności danych, taka jak test kappa, ponieważ ze względu na obecność podtypów wirusa brodawczaka ludzkiego HPV-Ar oraz typ zmiany w porównaniu z wynikami płynnej cytologii odbytu, badacze uznają w tym badaniu nasz „złoty standard” , oprócz wykonywania testów czułości, swoistości, dodatniej i ujemnej wartości predykcyjnej. Wreszcie, chociaż nie jest to częścią naszych głównych celów, badacze przeanalizują możliwe czynniki ryzyka związane z obecnością wirusa brodawczaka ludzkiego wysokiego ryzyka (HPV) za pomocą modeli regresji logistycznej.

ASPEKTY ETYCZNE I BEZPIECZEŃSTWO BIOLOGICZNE. ETYKA. To, co jest wskazane w odniesieniu do etyki w badaniach na ludziach, będzie ściśle przestrzegane zgodnie z Przepisami Ogólnego Prawa Zdrowia w Sprawach Badań Zdrowotnych Meksyku oraz Deklaracją Helsińską, z uwzględnieniem kolejnych wersji.

PISMO ŚWIADOMEJ ZGODY. BEZPIECZEŃSTWO Badany będzie miał pełną informację o procedurach, które będzie wykonywał. Badania będą wykonywane wyłącznie przy asyście uprawnionego zespołu badawczego oraz w gabinetach należących do Poradni Onkologicznej. Jeśli badany wyrazi chęć nieuczestniczenia w procesie, zostanie on natychmiast zawieszony.

Wszystkie badania przeprowadzane na pacjencie są całkowicie bezpieczne i nieszkodliwe.