肺泡裂重建 Powered by

随着多学科团队方法的发展，唇腭裂的护理取得了很大进展。 尽管取得了这些成就，但牙槽裂的治疗仍然存在许多挑战。 牙槽裂是裂隙异常中不太显眼的部分，对其矫正的兴趣不大；它的治疗历史可追溯至不远的过去，唇裂修复历史可追溯到公元前 390 年，上颚修复历史可追溯至 1764 年。 第一次尝试用植骨治疗牙槽裂是在 1901 年，然后在 1908 年再次尝试，但直到 1914 年 Dracher 才第一个使用胫骨成功地进行牙槽骨缺损的骨移植，从而产生了初级牙槽骨移植物. 后来发现这种方法对开发面具有破坏性，因此被放弃。 1972年上颌及移牙列残余牙槽裂二次植骨在一些中心开始流行。

1967 年，瑞典整形外科医生 Tord Skoog 引入了一种新概念，称为无骨牙槽骨移植物或原发性骨膜成形术 (PPP)，他在 3 个月的唇部修复期间进行了这项修复，骨膜瓣被抬起，清除了牙槽骨缺损和牙槽骨之间的软组织唇瓣修复时关闭皮瓣形成隧道。 这是因为人们相信随着时间的推移骨会在隧道中形成，因此不需要植骨。 许多研究的后续研究表明，在大约 60% 到 72% 的病例中，隧道内有骨骼发育。 他对 18 岁的后续研究表明，尽管面部发育在 18 岁时延迟，但所有人都处于同一水平。

本研究旨在解决牙槽裂骨再生的挑战，并通过在非洲人群中使用干细胞疗法来改善手术结果。 所有记录在案的研究仅在非非洲人群中进行，这些人群的表型略有不同并用于术前正畸治疗。

干细胞是未分化的祖细胞，能够自我更新和分化成任何特化细胞。 脐带干细胞在牙龈骨膜成形术中显示出良好的牙槽骨再生能力，并最大限度地减少了供体的流动性。 但是我们需要在外部环境中确定它的可能性和有效性。 这将是我们地区第一个唇腭裂治疗方案的干细胞试验。 随着在 Makerere 建立干细胞中心并最近获得资金以提高其能力，我们相信我们可以为改善乌干达的唇腭裂护理做出贡献。

问题陈述 目前公认的肺泡缺损金标准方案在时间、结果和相关发病率方面存在争议。 因此，在 3 至 6 个月的初级唇修复期间进行的第二种常见的牙龈骨膜成形术 (GPP) 方案将通过提供早期修复和较少手术次数来提供更好的替代方案，并且还避免了进一步使用二次骨移植的需要干细胞移植。 脐带干细胞移植在牙龈骨膜成形术中的应用仅在 10 例中进行，结果表明牙槽骨缺损的骨再生良好。 尽管先前的干细胞疗法取得了成功，但仍需要在非洲人群中进行临床试验，以证明干细胞在我们环境中的牙槽骨再生中的作用和用途。

意义 本研究的结果将证明干细胞疗法作为骨移植的有效替代骨生成器在矫正唇裂和腭裂牙槽骨缺损方面的治疗作用。 这将通过消除二次骨移植的需要，为唇腭裂患者的治疗带来范式转变。 这样的研究也将推动马凯雷雷大学和政府建立干细胞疗法等超专业治疗。 缩小实验室和临床实践中学术界干细胞之间的差距。 该研究目前是该地区唯一在肺泡重建中使用脐带血干细胞的临床试验，将为干细胞的进一步利用以及制定标准操作程序铺平道路。

1.6. 论证 GPP理论与通过优化初次手术结果来减少二次手术次数的目标是一致的。 获得的最重要结果是消除了二次植骨。 限制解剖以防止医源性面部生长受限的风险非常重要，因此引入额外的骨生成源将进一步改善 GPP 的结果，而无需进行广泛的解剖。 这项研究也将提高人们对脐带血干细胞用于临床目的，尤其是在手术中用于骨生成的认识态度和实践。 脐带干细胞被选为干细胞的来源，因为它具有高数量和高再生率作为我们在原发性肺泡修复环境中的第一项研究，我们建议该发现将定义干细胞治疗在唇裂中的作用和上颚手术，并证明干细胞在未来无需植骨即可矫正牙槽骨缺损方面的用途。

2.2. 研究程序 我们将在 Mulago 妇女医院、Kawempe 和 Mukono 医院以及 Kisenyi 健康中心建立一个监测小组。 这些中心的产前护理放射学团队将接受有关关键参数的培训，一旦他们通过超声波识别出任何患有唇裂和腭裂的胎儿，他们将获得母亲的人口统计信息，包括电话联系方式。 一旦将此信息提供给 PI，将联系母亲并评估其资格。 如果她们符合初步资格标准，将获得知情同意，并将对母亲进行随访直至分娩。

如果出生的孩子有单侧唇裂和腭裂，并有牙槽裂的临床证据，将被招募到研究中，然后将收集胎盘和脐带血用于收获干细胞。具有与唇腭裂相似的临床表现但无法采集脐带和胎盘血的唇腭裂患者将作为对照组。

外科手术将由一名整形外科医生完成，所有参与者均采用相同的手术技术。

干细胞组的母亲将在处理干细胞之前进行 HIV、肝炎筛查，如果发现有反应，则该过程将不会继续。

介入臂A：

脐带血采集：

• 脐带血将由助产士使用 Marcopharma 脐带血采集套件 (https://www.macopharma.com/products/collection-bags/) 采集 （数字 ＃）。 宝宝平安娩出后，助产士将靠近宝宝的脐端夹住，并在上方两公分处加一个夹子，适当消毒后在两个夹子之间横断。 使用收集袋套件，将一根针头插入脐带的静脉，让血液在重力作用下流入袋子。 当血流停止时，将血袋夹紧以防渗漏，将血袋轻轻倒置 8 至 10 次，使其与抗凝剂正常混合。 然后袋子上会贴上唯一的患者 ID 和母亲的详细信息，夹住收集管臂并密封袋子。 然后将袋子放入标有母亲详细信息的生物危害自封袋中，然后放入室温下的冷藏箱中。 并运送到实验室。

干细胞处理：

• 一旦脐带血采集袋和组织到达实验室，任何连接到袋子上的管子都将被剥离并彻底混合，确保管子被密封。 干细胞将被处理并准备用于冷冻保存。

干细胞冷冻保存：

• 冷冻保存所需的细胞密度将根据细胞计数结果确定，因为这将有助于确定所需冷冻保存培养基的体积。
• 细胞将悬浮在冷冻保存介质中，并以 200 x g 离心 10 分钟。 吸出培养基，留下细胞沉淀。
• 将细胞沉淀重悬于适当体积的冷冻保存培养基中。
• 悬浮的细胞将被转移到无菌冷冻管中。
• 一旦细胞悬浮液被转移到无菌冷冻管中，冷冻管将被转移到 -80°C 冰箱并垂直储存 24 小时。 时间段。
• 24小时结束后，将管子转移到液氮储存装置中长期冷冻保存。

解冻和浸润准备：

• 在解冻细胞前一天准备 2 孔 Matrigel。
• 通过在 37oC 水浴中旋转小瓶，细胞将快速解冻，直到只剩下一小块冷冻材料。
• 小瓶将用酒精擦拭并放置在组织培养罩中，并将内容物转移到 15ml 试管中
• 加入 5ml 预热的培养基并轻轻混匀。
• 如果有许多可见的菌落，将允许它们在室温下沉淀 5 分钟。 如果菌落不可见，则以 200g 离心 5 分钟。
• 吸出上清液并重悬于 2ml 培养基中。
• 吸出 1 孔 Matrigel 并将解冻的细胞加入其中。
• 菌落将通过轻轻搅拌均匀分布，并在组织培养箱（37oC/5% CO2）中孵育过夜。
• 第二天，将Matrigel的第二个孔吸出并将上清液从第一个孔转移到其上并加入2ml培养基。
• 菌落将通过轻轻搅拌均匀分布，并在组织培养箱（37oC/5% CO2）中孵育过夜。

2.2.2.1.5。 介入A组；手术过程：

• 腭裂修复将在 3 至 6 个月时完成
• 修复将在注射血管收缩剂的全身麻醉下进行。
• 将通过去除 2 个牙槽段之间的软组织来创建骨隧道。
• 隧道的顶部将使用鼻瓣创建
• 地板将通过关闭口瓣形成。
• 前下壁将由唇瓣形成。
• 前上壁由唇粘膜形成。
• 因此，腔室通过粘骨膜瓣在鼻腔、口腔和唇侧密封

干细胞浸润：

干细胞将被注射到隧道内和周围，一些干细胞将在 surgicel 中混合并放置在骨隧道内。

渗透后加工处理：

• 将在手术后48 小时至1 个月内监测患者是否出现任何并发症，然后在3 个月和6 个月内监测骨再生情况。 使用 CT 扫描。

对照组；我们被选为具有相同临床表现的相似年龄组并具有相同的手术程序，只是没有干细胞干预。 并且还跟踪了一周到一个月的并发症，然后是 3 个月和 6 个月的 CT 扫描以监测牙槽骨生长。