Reconstrucción de la hendidura alveolar Desarrollado por

Se ha avanzado mucho en el cuidado del labio hendido y el paladar hendido con el desarrollo de un enfoque de equipo multidisciplinario. A pesar de estos logros, todavía existen muchos desafíos en el tratamiento de la fisura alveolar. La fisura alveolar, siendo el componente menos conspicuo de la anomalía de la fisura, atrajo menos interés en su corrección; las fechas de su historial de tratamiento en un pasado no tan lejano fueron como las fechas de reparación del historial del labio hendido hasta 390 antes de Cristo y la reparación del paladar en 1764. El primer intento de tratar la fisura alveolar con injerto óseo fue en 1901 y luego nuevamente en 1908, pero no fue hasta 1914 que Dracher fue el primero en realizar un injerto óseo exitoso del defecto alveolar utilizando hueso tibial que dio origen al injerto óseo alveolar primario. . Más tarde se descubrió que este enfoque era destructivo para la cara en desarrollo y se abandonó. Luego, en 1972, el injerto óseo secundario del maxilar y las hendiduras alveolares residuales en la etapa de la dentición de transición se hizo popular en algunos centros.

En 1967, el cirujano plástico sueco Tord Skoog introdujo un nuevo concepto llamado injerto alveolar sin hueso o periosteoplastia primaria (PPP) que realizó durante el tiempo de reparación del labio a los 3 meses. En esta reparación, se levantaron colgajos periósticos limpiando el tejido blando entre el defecto alveolar y el los colgajos se cerraron para formar un túnel en el momento de la reparación del labio. Esto se debió a que se creía que con el tiempo se formaría hueso en el túnel y, por lo tanto, no se necesitaría un injerto óseo. El seguimiento en muchos estudios indicó hueso desarrollado en el túnel en alrededor del 60 al 72% de los casos. Su estudio de seguimiento hasta la edad de 18 años indicó que, a pesar de un retraso en el crecimiento facial a una edad temprana de 18 años, todos están al mismo nivel.

Este estudio tiene como objetivo abordar el desafío de la regeneración ósea en la hendidura alveolar y mejorar el resultado quirúrgico mediante el uso de la terapia con células madre en la población africana. Todos los estudios documentados se llevan a cabo solo en poblaciones no africanas que tienen un fenotipo y un uso ligeramente diferentes al tratamiento de ortodoncia prequirúrgico.

Las células madre son células progenitoras no diferenciadas capaces de autorrenovarse y diferenciarse en cualquier célula especializada. Las células madre del cordón umbilical en la gingivoperiosteoplastia han demostrado una buena regeneración ósea en la hendidura alveolar y minimizando la movilidad del donante. Pero es necesario que establezcamos su posibilidad y eficacia en el establecimiento. Este será el primer ensayo con células madre en el protocolo de tratamiento de fisuras en nuestra región. Con el establecimiento de un centro de células madre en Makerere y recientemente financiado para mejorar su capacidad, creemos que podemos contribuir a mejorar el cuidado de labio leporino en Uganda.

Planteamiento del problema El protocolo estándar de oro actualmente aceptado para el defecto alveolar es controvertido en cuanto al momento, el resultado y la morbilidad asociada. Por lo tanto, el segundo protocolo común de Gingivoperiosteoplastia (GPP) realizado durante la reparación primaria del labio a los 3 a 6 meses proporcionaría una mejor alternativa al proporcionar una reparación temprana con un número menor de cirugías y también obviaría la necesidad de un injerto óseo secundario con el uso adicional de trasplante de células madre. El uso de trasplante de células madre umbilicales en el procedimiento de gingivoperiosteoplastia solo se ha realizado en 10 casos y los resultados indican una buena regeneración ósea en el defecto óseo alveolar. A pesar de la demostración de éxito en la terapia anterior con células madre, es necesario realizar un ensayo clínico en población africana para probar el papel y el uso de las células madre en la regeneración ósea alveolar en nuestro medio.

Importancia Los hallazgos de este estudio demostrarán el papel terapéutico de la terapia con células madre como un generador óseo alternativo eficaz al injerto óseo en la corrección del defecto alveolar en el labio hendido y el paladar hendido. Esto presentará un cambio de paradigma en el tratamiento de pacientes con labio y paladar hendido al eliminar la necesidad de un injerto óseo secundario. Dicho estudio también promoverá el establecimiento por parte de la Universidad de Makerere y el gobierno de un tratamiento superespecializado como la terapia con células madre. cerrando la brecha entre la academia de células madre en el laboratorio y la práctica clínica. Este estudio, que actualmente es el único ensayo clínico en el uso de tallo sanguíneo umbilical en la reconstrucción alveolar en la región, allanará el camino para una mayor utilización de células madre, así como para desarrollar procedimientos operativos estándar.

1.6. Justificación La teoría de la GPP es coherente con el objetivo de minimizar el número de cirugías secundarias mediante la optimización de los resultados de la cirugía primaria. Y el resultado más importante obtenido es la eliminación del injerto óseo secundario. Es importante tener una disección limitada para evitar el riesgo de restricción iatrogénica del crecimiento facial, por lo que la introducción de una fuente adicional de generación ósea mejorará aún más el resultado de la GPP sin necesidad de una disección extensa. Este estudio también mejorará la actitud de conocimiento y la práctica del uso de células madre de sangre de cordón umbilical para fines clínicos y más aún en cirugía para generar hueso. Se elige la célula madre del cordón umbilical como fuente de células madre porque tiene un alto número y una alta tasa de regeneración. Al ser el primer estudio en nuestro medio sobre reparación alveolar primaria, proponemos que el hallazgo definirá el papel de la terapia con células madre en el labio hendido. y cirugía del paladar y demostrar la utilidad de las células madre en el futuro para corregir el defecto alveolar sin necesidad de injerto óseo.

2.2. PROCEDIMIENTO DE ESTUDIO Estableceremos un equipo de vigilancia en el hospital de mujeres de Mulago, Kawempe y el hospital de Mukono más el centro de salud de Kisenyi. El equipo de radiología de Ante Natal Care en estos centros recibirá capacitación sobre los parámetros clave de interés y, una vez que identifiquen cualquier feto con labio y paladar hendido en la ecografía, obtendrán los datos demográficos de las madres, incluido el contacto telefónico. Una vez que se proporcione esta información al PI, se contactará a las madres y se evaluará su elegibilidad. En caso de cumplir con los criterios preliminares de elegibilidad, se obtendrá el consentimiento informado y se dará seguimiento a las madres hasta el momento del parto.

Si el niño nacido tiene labio hendido unilateral y paladar hendido con evidencia clínica de hendidura alveolar será incluido en el estudio y luego se recolectará la placenta y la sangre del cordón umbilical para la recolección de células madre, se conocerán los casos: Brazo A Brazo B: Niños con El grupo de control será el labio hendido y el paladar hendido que tengan una presentación clínica similar al labio hendido y el paladar hendido donde no fue posible recolectar sangre del cordón umbilical y la placenta.

El procedimiento quirúrgico será realizado por un solo cirujano plástico y la misma técnica quirúrgica para todos los participantes.

A las madres del grupo de células madre se les realizará una prueba de detección de VIH y hepatitis antes del procesamiento de la célula madre, si se encuentra reactiva, el proceso no continuará.

Brazo intervencionista A:

Recolección de sangre de cordón umbilical:

• La sangre del cordón umbilical será recolectada por parteras utilizando el kit de recolección de sangre de cordón Marcopharma (https://www.macopharma.com/products/collection-bags/) (cifra #). Una vez que el bebé nazca de forma segura, la matrona pinzará el extremo del ombligo cerca del bebé y agregará otra pinza dos centímetros por encima y se realizará una sección entre ambas pinzas después de la desinfección adecuada. Con el juego de bolsa de recolección, se insertará una aguja en la vena del cordón y se permitirá que la sangre fluya por gravedad hacia la bolsa. Cuando el flujo se detenga, se sujetará la bolsa de sangre para evitar fugas y se invertirá suavemente la bolsa de 8 a 10 veces para permitir la mezcla normal con el anticoagulante. Luego, la bolsa se etiquetará con la identificación única del paciente y los detalles de la madre, se sujetará el brazo del tubo de recolección y se sellará la bolsa. Luego, la bolsa se colocará en una bolsa ziplock de riesgo biológico etiquetada con los detalles de la madre y luego se colocará en una caja fría a temperatura ambiente. Y transportado al laboratorio.

Procesamiento de las células madre:

• Una vez que las bolsas de recolección de sangre del cordón umbilical y el tejido lleguen al laboratorio, cualquier tubo conectado a la bolsa se quitará y se mezclará muy bien, asegurándose de que los tubos estén sellados. Las células madre serán procesadas y preparadas para la criopreservación.

Criopreservación de células madre:

• La densidad de células necesarias para la crioconservación se determinará en función de los resultados del recuento de células, ya que esto ayudará a determinar el volumen de medio de crioconservación necesario.
• Las células se suspenderán en el medio de crioconservación y se centrifugarán a 200 x g durante 10 min. Y los medios aspiraron, dejando atrás el sedimento celular.
• El sedimento celular se resuspenderá en el volumen apropiado del medio de crioconservación.
• Las células suspendidas se transferirán a crioviales estériles.
• Una vez que la suspensión de células se haya transferido a un criovial estéril, el criovial se transferirá a un congelador a -80 °C y se almacenará verticalmente durante 24 horas. periodo de tiempo.
• Al final de las 24 horas, los tubos se transferirán a una unidad de almacenamiento de nitrógeno líquido para almacenamiento criogénico a largo plazo.

Descongelación y preparación para la infiltración:

• Se prepararán 2 pocillos de Matrigel el día antes de descongelar las células.
• Las células se descongelarán rápidamente agitando el vial en un baño de agua a 37 °C hasta que solo quede un pequeño trozo de material congelado.
• El vial se limpiará con alcohol y se colocará en la campana de cultivo de tejidos y el contenido se transferirá a un tubo de 15 ml.
• Se añadirán 5ml de medio de cultivo precalentado y se mezclarán suavemente.
• Si hay muchas colonias visibles, se dejarán sedimentar a temperatura ambiente durante 5 min. Si las colonias no son visibles, centrifugar a 200 g durante 5 min.
• El sobrenadante será aspirado y resuspendido en 2ml de medio de cultivo.
• Se aspirará 1 pocillo de Matrigel y se le añadirán células descongeladas.
• Las colonias se distribuirán uniformemente agitando suavemente y se incubarán durante la noche en una incubadora de cultivo de tejidos (37oC/5% CO2).
• Al día siguiente, se aspirará el segundo pocillo de Matrigel y se transferirá el sobrenadante del primer pocillo al mismo y se añadirán 2ml de medio de cultivo.
• Las colonias se distribuirán uniformemente mediante agitación suave y se incubarán durante la noche en una incubadora de cultivo de tejidos (37oC/5% CO2).

2.2.2.1.5. brazo intervencionista A; Procedimiento quirúrgico:

• La reparación de labio leporino y paladar se realizará a los 3 a 6 meses.
• La reparación se realizará bajo anestesia general con inyección de vasoconstrictor.
• Se creará un túnel óseo mediante la eliminación de tejido blando entre los 2 segmentos alveolares.
• El techo del túnel se creará utilizando las aletas nasales.
• El suelo se creará mediante el cierre de los colgajos orales.
• La pared inferior anterior será creada por los colgajos labiales.
• La pared anterosuperior se crea con la mucosa del labio.
• Por lo tanto, la cámara está sellada nasal, oral y labialmente por colgajos mucoperiósticos.

Infiltración de las células madre:

Se inyectarán células madre dentro y alrededor del túnel y algunas de las células madre se mezclarán en surgicel y se colocarán dentro del túnel óseo.

Procesamiento y manejo posterior a la infiltración:

• Los pacientes serán monitoreados después de la cirugía durante 48 horas a un mes por cualquier complicación, luego a los 3 meses ya los 6 meses para la regeneración ósea. Usando tomografía computarizada.

El grupo de control; Seremos seleccionados con la misma presentación clínica, grupo de edad similar y con el mismo procedimiento quirúrgico, excepto que no habrá intervención de células madre. Y también se siguió de una semana a un mes por complicaciones y luego a los 3 y 6 meses una tomografía computarizada para monitorear el crecimiento del hueso alveolar.