歯槽裂再建 Powered by

学際的なチームアプローチの開発により、口唇口蓋裂のケアは大きく進歩しました。 これらの成果にもかかわらず、歯槽裂の治療にはまだ多くの課題があります。 歯槽裂は、裂け目異常のあまり目立たない構成要素であるため、その矯正に対する関心は低くなりました。それほど遠くない過去のその治療歴は、キリスト以前の 390 年までの口唇裂の修復歴と 1764 年の口蓋修復歴でした。 歯槽裂を骨移植で治療する最初の試みは 1901 年で、その後 1908 年に再び行われましたが、1914 年になって初めて、Dracher が脛骨を使用して歯槽骨欠損の骨移植に成功し、最初の歯槽骨移植が行われました。 . このアプローチは、後に発達中の顔に破壊的であることが判明し、放棄されました. その後、1972 年に移行歯列の段階での上顎骨と残存歯槽裂の二次骨移植がいくつかのセンターで普及するようになりました。

1967 年に、スウェーデンの形成外科医であるトード・スクーグは、骨のない歯槽移植片または一次骨膜形成術 (PPP) と呼ばれる新しい概念を導入しました。これは、3 か月の唇の修復中に行われました。唇の修復時にフラップを閉じてトンネルを形成しました。 これは、時間が経つにつれてトンネル内で骨が形成されるため、骨移植は必要ないと考えられていたためです。 多くの研究のフォロー アップでは、症例の約 60 ～ 72% でトンネル内で骨が発達したことが示されました。 彼の 18 歳までのフォローアップ研究では、18 歳までの幼い頃の顔の成長の遅れにもかかわらず、すべてが同じレベルにあることが示されました。

この研究は、歯槽裂における骨再生の課題に対処し、アフリカの人口における幹細胞療法の使用によって外科的結果を改善するために設定されています。 文書化されたすべての研究は、わずかに異なる表現型を持ち、手術前の歯列矯正治療を使用しているアフリカ以外の集団でのみ実施されています.

幹細胞は、自己再生および任意の特殊化された細胞への分化が可能な未分化の前駆細胞です。 歯肉骨膜骨形成術における臍帯幹細胞は、歯槽裂で良好な骨再生を示し、ドナーの可動性を最小限に抑えます。 しかし、その可能性と有効性を現場で確立する必要があります。 これは、私たちの地域での裂傷治療プロトコルにおける最初の幹細胞試験になります。 マケレレに幹細胞センターを設立し、最近その能力を向上させるために資金を提供したことで、ウガンダの口唇裂ケアの改善に貢献できると信じています。

問題の説明 現在認められている肺胞欠損症のゴールド スタンダード プロトコルは、タイミング、結果、および関連する罹患率について議論の余地があります。 したがって、歯肉骨膜骨形成術 (GPP) の 2 番目の一般的なプロトコルは、3 ～ 6 か月で一次唇修復中に実施され、より少ない数の手術で早期修復を提供することにより、より良い代替手段を提供し、さらに幹細胞移植。 歯肉骨膜骨形成術における臍帯幹細胞移植の使用は、10例でのみ行われており、結果は歯槽骨欠損における良好な骨再生を示しています。 以前の幹細胞療法の成功の実証にもかかわらず、私たちの環境での歯槽骨再生における幹細胞の役割と使用を証明するために、アフリカの人口で臨床試験を行う必要があります.

重要性 この研究の結果は、口唇口蓋裂の歯槽骨欠損の矯正における骨移植に代わる効果的な骨生成器としての幹細胞療法の治療的役割を実証します。 これは、二次骨移植の必要性を排除することにより、口唇口蓋裂患者の治療にパラダイムシフトをもたらすでしょう。 このような研究は、マケレレ大学と政府による幹細胞療法などの超専門治療の確立も促進します。 実験室での学界の幹細胞と臨床現場との間のギャップを埋めます。 現在、この地域での肺胞再建における臍帯血幹の使用に関する唯一の臨床試験であるこの研究は、幹細胞のさらなる利用と標準的な手術手順の開発への道を開くでしょう。

1.6。 正当化 GPP の理論は、一次手術の結果を最適化することによって二次手術の数を最小限に抑えるという目標と一致しています。 そして得られる最も重要な結果は、二次骨移植の排除です。 顔面成長の医原性制限のリスクを防ぐために解剖を制限することが重要であるため、骨生成の追加のソースの導入は、広範な解剖を必要とせずにGPPの結果をさらに改善します. この研究はまた、臨床目的での臍帯血幹細胞の使用に関する知識と実践を改善し、骨を生成するための手術においても改善します。 臍帯幹細胞は、幹細胞の供給源として選択されています。その理由は、再生率が高く、数が多いためです。一次肺胞修復に関する私たちの設定における最初の研究であるため、この発見は、口唇裂における幹細胞療法の役割を定義することを提案します。および口蓋手術を行い、骨移植を必要とせずに肺胞欠損を修正する将来における幹細胞の有用性を実証します。

2.2. 調査手順 我々は、ムラゴ女性病院、カウェンペ、ムコノ病院プラスキセニ保健センターに監視チームを設立する。 これらのセンターの出産前ケア放射線科チームは、関心のある重要なパラメーターについて訓練を受け、超音波で口唇口蓋裂のある胎児を特定すると、電話連絡先を含む母親の人口統計を取得します。 この情報が PI に提供されると、母親は連絡を受け、適格性について評価されます。 彼らが予備的な適格基準を満たしている場合、インフォームドコンセントが得られ、母親は出産時まで追跡されます.

生まれた子供が片側の口唇裂と口蓋裂を持っている場合、歯槽裂の臨床的証拠が研究に採用され、その後、幹細胞の採取のために胎盤と臍帯血が採取されます。臍帯および胎盤血を採取することができなかった口唇裂および口蓋裂の同様の臨床症状を有する口唇および口蓋裂は、対照群となる。

外科的処置は、1 人の形成外科医によって行われ、すべての参加者に対して同じ手術手技が行われます。

幹細胞グループの母親は、HIV のスクリーニングを受けます。幹細胞の処理の前に肝炎が行われます。反応性が見つかった場合、処理は続行されません。

介入アーム A:

臍帯血の採取:

• 助産師がマルコファーマ臍帯血採取キットを使用して臍帯血を採取します (https://www.macopharma.com/products/collection-bags/)。 （形 ＃）。 赤ちゃんが安全に出産されると、助産師はへそ端を赤ちゃんの近くでクランプし、2 センチメートル上に別のクランプを追加し、適切に消毒した後、両方のクランプの間で離断を行います。 回収バッグセットを使用して、臍帯の静脈に針を挿入し、重力によって血液をバッグに流し込みます。 流れが止まったら、血液バッグをクランプして漏れを防ぎ、バッグを 8 ～ 10 回静かに反転させて、抗凝固剤と正常に混合させます。 バッグには固有の患者 ID と母親の詳細が記載されたラベルが付けられ、コレクション チューブのアームが切り取られ、バッグが密封されます。 バッグは、母親の詳細が記載されたバイオハザードのジップロックバッグに入れられ、室温のクールボックスに入れられます. そして研究所に運ばれます。

幹細胞の処理:

• 臍帯血採取バッグと組織が検査室に到着したら、バッグに取り付けられているチューブを剥がし、完全に混合して、チューブが密閉されるようにします。 幹細胞は処理され、凍結保存用に準備されます。

幹細胞の凍結保存:

• 凍結保存に必要な細胞の密度は、必要な凍結保存培地の量を決定するのに役立つため、細胞数の結果に基づいて決定されます。
• 細胞を凍結保存培地に懸濁し、200 x g で 10 分間遠心分離します。 培地は吸引され、細胞ペレットが残りました。
• 細胞ペレットは、適切な量の凍結保存培地に再懸濁されます。
• 中断された細胞は、滅菌クライオバイアルに移されます。
• 細胞懸濁液を滅菌クライオバイアルに移したら、クライオバイアルを-80°Cの冷凍庫に移し、垂直に24時間保存します。 期間。
• 24時間後、チューブは長期凍結保存用の液体窒素保存ユニットに移されます。

解凍と浸潤の準備:

• マトリゲルの 2 つの井戸は、細胞を解凍する前日に準備されます。
• 細胞は、凍結した材料の小さな破片だけが残るまで、37oC のウォーターバスでバイアルを回転させることによって急速に解凍されます。
• バイアルをアルコールで拭き取り、組織培養フードに入れ、内容物を 15ml チューブに移します。
• 5mlの予熱した培地を加え、穏やかに混合します。
• 目に見えるコロニーが多い場合は、室温で 5 分間沈降させます。 コロニーが見えない場合は、200g で 5 分間スピンしてください。
• 上清を吸引し、2mlの培地に再懸濁します。
• マトリゲルの 1 ウェルを吸引し、解凍した細胞を加えます。
• 穏やかに攪拌してコロニーを均等に分配し、組織培養インキュベーター (37oC/5% CO2) で一晩インキュベートします。
• 翌日、マトリゲルの 2 番目のウェルを吸引し、最初のウェルから上清を移し、2ml の培養液を加えます。
• コロニーを穏やかに攪拌して均一に分散させ、組織培養インキュベーター (37oC/5% CO2) で一晩インキュベートします。

2.2.2.1.5. 介入アーム A;外科的処置:

• 口蓋裂と口蓋裂の修復は 3 ～ 6 か月で行われます
• 修復は、血管収縮剤注射による全身麻酔下で行われます。
• 骨トンネルは、2 つの肺胞セグメント間の軟部組織を除去することによって作成されます。
• トンネルの屋根は、鼻フラップを使用して作成されます
• 床は口腔フラップの閉鎖によって作成されます。
• 前下壁は、唇弁によって作成されます。
• 上前壁は唇の粘膜で作られます。
• したがって、チャンバーは粘膜骨膜フラップによって鼻、口、および唇で密閉されます

幹細胞の浸潤:

幹細胞はトンネル内およびその周囲に注入され、一部の幹細胞はサージセルでかき混ぜられ、骨トンネル内に配置されます。

浸潤後の処理と取り扱い:

• 患者は手術後 48 時間から 1 か月間、合併症がないか監視され、その後 3 か月と 6 か月で骨再生が監視されます。 CTスキャンを使用。

対照群。私たちは、幹細胞の介入がないことを除いて、同じ臨床症状の同様の年齢層で選択され、同じ外科的処置を受けています。 また、合併症のために1週間から1ヶ月まで続き、その後3か月と6か月のCTスキャンで歯槽骨の成長を監視しました.