치조열 재건

다학제적 팀 접근법의 개발로 구순구개열 치료에 많은 진전이 있었습니다. 이러한 성과에도 불구하고 치조열의 치료에는 여전히 많은 어려움이 있습니다. 치조열은 구순구개열의 덜 눈에 띄는 구성요소이므로 교정에 대한 관심을 덜 끌었습니다. 그리 멀지 않은 과거의 치료 이력 날짜는 그리스도 전 390년, 구개 수리 날짜는 1764년까지 구순구개열 수리 날짜였습니다. 골이식으로 치조열을 치료하려는 첫 번째 시도는 1901년에 이어 1908년에 다시 시도되었지만 1914년이 되어서야 Dracher가 최초의 치조골 이식을 낳은 경골을 사용하여 치조 결손의 성공적인 골 이식을 수행한 최초의 사람이 되었습니다. . 이 접근법은 나중에 개발중인 얼굴에 파괴적인 것으로 밝혀져 버려졌습니다. 그런 다음 1972년에 과도기 치열 단계에서 상악골과 잔존 치조골의 이차 골 이식이 일부 센터에서 인기를 얻었습니다.

1967년 스웨덴 성형외과의사 Tord Skoog는 뼈 없는 치조 이식편 또는 1차 골막 성형술(PPP)이라는 새로운 개념을 도입했으며, 3개월째 입술 수리 시 수행했습니다. 입술 수리시 플랩을 닫아 터널을 형성했습니다. 시간이 지나면 뼈가 터널에 형성되어 뼈 이식이 필요하지 않을 것이라고 믿었기 때문입니다. 많은 연구에서 추적 관찰한 결과 약 60~72%의 사례에서 터널에서 뼈가 발달한 것으로 나타났습니다. 18세까지의 그의 후속 연구는 18세까지 이른 나이에 안면 성장이 지연됨에도 불구하고 모두 같은 수준에 있음을 나타냈습니다.

이 연구는 아프리카 인구에서 줄기세포 요법을 사용하여 치조열에서 뼈 재생 문제를 해결하고 수술 결과를 개선하기 위해 시작되었습니다. 문서화된 모든 연구는 표현형이 약간 다르고 수술 전 치열 교정 치료에 사용하는 비아프리카 인구에서만 수행되었습니다.

줄기 세포는 자가 재생이 가능하고 특화된 세포로 분화할 수 있는 미분화 전구 세포입니다. 치은골막성형술에서 제대 줄기세포는 치조열에서 좋은 뼈 재생을 보여주고 기증자의 이동성을 최소화합니다. 그러나 우리는 그 가능성과 실효성을 외부 환경에서 확립할 필요가 있다. 이것은 우리 지역에서 구순구개열 치료 프로토콜의 첫 번째 줄기 세포 실험이 될 것입니다. 마케레레에 줄기 세포 센터를 설립하고 최근 역량 향상을 위한 자금 지원을 통해 우간다의 구순구개열 치료 개선에 기여할 수 있다고 믿습니다.

문제 설명 폐포 결손에 대해 현재 허용되는 금본위제 프로토콜은 시기, 결과 및 관련 이환율에 대해 논란의 여지가 있습니다. 따라서 3~6개월에 1차 입술 봉합 중에 수행되는 GPP(Gingivoperiosteoplasty)의 두 번째 공통 프로토콜은 더 적은 수의 수술로 조기 봉합을 제공함으로써 더 나은 대안을 제공할 것이며 또한 추가 사용으로 2차 뼈 이식의 필요성을 제거할 것입니다. 줄기 세포 이식. 치은주위골성형술에서 제대 줄기세포 이식술을 사용한 사례는 10예에 불과하며 그 결과 치조골 결손에서 골 재생이 잘 되는 것으로 나타났다. 이전 줄기 세포 치료의 성공 입증에도 불구하고 우리 환경에서 치조골 재생에서 줄기 세포의 역할과 사용을 증명하기 위해 아프리카 인구에서 임상 시험을 수행할 필요가 있습니다.

의의 이 연구 결과는 구순열 및 구개열의 치조 결함 교정에서 골 이식에 대한 효과적인 대체 골 생성기로서 줄기 세포 요법의 치료적 역할을 입증할 것입니다. 이것은 이차 뼈 이식의 필요성을 제거함으로써 구순구개열 환자 치료의 패러다임 전환을 제시할 것입니다. 이러한 연구는 또한 마케레레 대학과 정부가 줄기 세포 치료와 같은 초특수 치료의 설립을 촉진할 것입니다. 실험실에서 학계 줄기 세포와 임상 실습 사이의 격차를 좁힙니다. 현재 이 지역에서 제대혈 줄기를 사용하여 지역에서 폐포 재건에 사용하는 유일한 임상 시험인 이 연구는 줄기 세포의 추가 활용과 표준 수술 절차 개발을 위한 길을 열어줄 것입니다.

1.6. 정당화 GPP 이론은 1차 수술 결과를 최적화하여 2차 수술 횟수를 최소화하려는 목표와 일치합니다. 그리고 얻은 가장 중요한 결과는 2차 골이식의 제거이다. 안면 성장의 의원성 제한 위험을 방지하기 위해 제한된 절개를 갖는 것이 중요하므로 뼈 생성의 추가 공급원을 도입하면 광범위한 절개가 필요 없이 GPP의 결과가 더욱 향상될 것입니다. 이 연구는 또한 제대혈 줄기세포를 임상 목적으로 사용하는 것과 뼈를 생성하는 수술에 대한 지식 태도와 실습을 향상시킬 것입니다. 탯줄 줄기 세포는 높은 수와 높은 재생 속도를 가지고 있기 때문에 줄기 세포의 공급원으로 선택됩니다. 일차 폐포 복구에 대한 우리 환경의 첫 번째 연구로서 우리는 발견이 구순열에서 줄기 세포 요법의 역할을 정의할 것이라고 제안합니다. 골 이식이 필요 없는 치조골 결손 교정의 미래에 줄기세포의 유용성을 입증합니다.

2.2. 연구 절차 우리는 Mulago Women's hospital, Kawempe 및 Mukono Hospital Plus Kisenyi 보건 센터에 감시 팀을 구성할 것입니다. 이 센터의 Ante Natal Care 방사선과 팀은 관심 있는 주요 매개변수에 대해 교육을 받고 초음파에서 구순구개열이 있는 태아를 식별하면 전화 접촉을 포함하여 산모의 인구 통계를 얻습니다. 이 정보가 PI에 제공되면 어머니에게 연락하여 적격 여부를 평가합니다. 예비 적격성 기준을 충족하는 경우 사전 동의를 얻고 출산 시점까지 산모를 추적합니다.

태어난 아이가 일방적인 구순열과 구개열이 있고 치조열의 임상적 증거가 있는 경우 연구에 모집한 다음 줄기 세포 채취를 위해 태반과 제대혈을 수집하여 다음과 같은 경우를 알 수 있습니다. 탯줄과 태반 혈액을 수집할 수 없는 구순열 및 구개열의 임상 증상이 유사한 구순열 및 구개열이 대조군이 될 것입니다.

수술은 한 명의 성형외과 의사가 모든 참가자에게 동일한 수술 기법으로 진행합니다.

줄기세포 그룹 산모는 HIV 검사를 받게 되며, 줄기세포 처리 전에 간염 검사를 실시한 결과 반응이 확인되면 처리가 진행되지 않습니다.

중재적 팔 A:

제대혈 수집:

• 제대혈은 조산사가 Marcopharma 제대혈 수집 키트(https://www.macopharma.com/products/collection-bags/)를 사용하여 수집합니다. (수치 #). 아기가 안전하게 분만되면 조산사는 아기 근처에 배꼽 끝을 고정하고 적절하게 소독한 후 2cm 위에 또 다른 클램프를 추가하고 두 클램프 사이에 절단부를 만듭니다. 수집 백 세트를 사용하여 바늘을 탯줄의 정맥에 삽입하고 중력에 의해 혈액이 백으로 흐르도록 합니다. 흐름이 멈추면 혈액 백을 고정하여 누출을 방지하고 백을 8~10회 부드럽게 뒤집어 항응고제와 정상적으로 혼합되도록 합니다. 그런 다음 백에 고유한 환자 ID와 산모의 세부 정보가 적힌 라벨을 붙이고 수집 튜브 팔을 자르고 백을 밀봉합니다. 그런 다음 가방을 어머니의 세부 정보가 표시된 생물학적 위험 지퍼백에 넣은 다음 실온의 시원한 상자에 넣습니다. 그리고 실험실로 이송됩니다.

줄기 세포 처리:

• 제대혈 수집 백과 조직이 실험실에 도착하면 백에 부착된 모든 튜브를 벗겨내고 완전히 혼합하여 튜브가 밀봉되도록 합니다. 줄기 세포는 동결 보존을 위해 처리되고 준비됩니다.

줄기 세포의 동결 보존:

• 동결 보존에 필요한 세포의 밀도는 필요한 동결 보존 매체의 부피를 결정하는 데 도움이 되므로 세포 수 결과에 따라 결정됩니다.
• 세포를 동결보존 배지에 현탁시키고 200 x g에서 10분 동안 원심분리합니다. 그리고 배지가 흡인되어 세포 펠렛이 남습니다.
• 세포 펠릿은 동결 보존 배지의 적절한 부피에 재현탁됩니다.
• 정지된 세포는 멸균 냉동 바이알로 옮겨집니다.
• 세포 현탁액이 멸균된 cryovial로 옮겨지면 cryovial은 -80°C 냉동고로 옮겨지고 24시간 동안 수직으로 보관됩니다. 기간.
• 24시간이 지나면 튜브는 장기 냉동 보관을 위해 액체 질소 저장 장치로 옮겨집니다.

해동 및 침투 준비:

• 세포를 해동하기 전날 Matrigel 2웰을 준비합니다.
• 냉동 물질의 작은 조각만 남을 때까지 37oC 수조에서 유리병을 소용돌이치면 세포가 빠르게 해동됩니다.
• 바이알을 알코올로 닦고 조직 배양 후드에 넣고 내용물을 15ml 튜브로 옮깁니다.
• 예열된 배양 배지 5ml를 첨가하고 부드럽게 혼합합니다.
• 눈에 보이는 콜로니가 많으면 실온에서 5분 동안 침전되도록 합니다. 콜로니가 보이지 않으면 200g에서 5분 동안 회전합니다.
• 상청액을 흡인하고 2ml의 배양 배지에 재현탁합니다.
• Matrigel 1웰을 흡인하고 해동한 세포를 첨가합니다.
• 콜로니는 부드러운 교반에 의해 균일하게 분배되고 조직 배양 인큐베이터(37oC/5% CO2)에서 밤새 배양됩니다.
• 다음날 Matrigel의 두 번째 웰을 흡인하고 첫 번째 웰의 상층액을 옮겨 배양 배지 2ml를 첨가합니다.
• 콜로니는 부드러운 교반에 의해 고르게 분배되고 조직 배양 인큐베이터(37oC/5% CO2)에서 밤새 배양됩니다.

2.2.2.1.5. 중재적 팔 A; 수술 절차:

• 구개열 및 구개 수리는 3~6개월에 수행됩니다.
• 수리는 혈관 수축 주사로 전신 마취하에 수행됩니다.
• 2개의 폐포 분절 사이의 연조직을 제거하여 골관을 만듭니다.
• 비강 플랩을 사용하여 터널의 지붕을 만듭니다.
• 바닥은 구강 플랩을 닫음으로써 생성됩니다.
• 전방 하부 벽은 순측 플랩에 의해 생성됩니다.
• 전상벽은 입술 점막으로 만들어집니다.
• 따라서 챔버는 점막 골막 플랩에 의해 비강, 구강 및 순측으로 밀봉됩니다.

줄기 세포의 침윤:

줄기 세포는 터널 내부와 주변에 주입되고 줄기 세포 중 일부는 수술실에서 뒤섞여 뼈 터널 내에 배치됩니다.

사후 침투 처리 및 처리:

• 환자는 수술 후 48시간에서 1개월 동안 합병증에 대해 모니터링하고 3개월 및 6개월에 뼈 재생에 대해 모니터링합니다. CT 스캔을 사용합니다.

대조군; 우리는 줄기 세포의 개입이 없을 것이라는 점을 제외하고는 동일한 임상 증상 유사한 연령대와 동일한 수술 절차로 선발됩니다. 또한 1주일에서 나방 합병증에 대해 추적한 다음 3개월 및 6개월 동안 치조골 성장을 모니터링하기 위해 CT 스캔을 수행했습니다.