Rekonstrukcja rozszczepu wyrostka zębodołowego Powered by

Wiele poczyniono w opiece nad rozszczepem wargi i podniebienia wraz z rozwojem multidyscyplinarnego podejścia zespołowego. Pomimo tych osiągnięć nadal istnieje wiele wyzwań w leczeniu rozszczepu wyrostka zębodołowego. Rozszczep wyrostka zębodołowego jako mniej rzucający się w oczy składnik nieprawidłowości rozszczepu wzbudził mniejsze zainteresowanie jego korekcją; jego historia leczenia sięga nie tak odległej przeszłości, jak daty naprawy rozszczepu wargi aż do 390 roku przed Chrystusem i naprawy podniebienia w 1764 roku. Pierwsza próba leczenia rozszczepu wyrostka zębodołowego za pomocą przeszczepu kości miała miejsce w 1901 r., a następnie ponownie w 1908 r., ale dopiero w 1914 r. Dracher jako pierwszy wykonał udany przeszczep kości ubytku wyrostka zębodołowego przy użyciu kości piszczelowej, która dała początek pierwotnemu przeszczepowi kości wyrostka zębodołowego . Takie podejście okazało się później destrukcyjne dla rozwijającej się twarzy i zostało porzucone. Następnie w 1972 r. w niektórych ośrodkach upowszechniło się wtórne przeszczepianie kości szczęki i resztkowych rozszczepów wyrostka zębodołowego na etapie uzębienia przejściowego.

W 1967 roku szwedzki chirurg plastyczny Tord Skoog wprowadził nową koncepcję zwaną bezkostnym przeszczepem zębodołu lub pierwotną periosteoplastyką (PPP), którą wykonał w czasie naprawy ust po 3 miesiącach. klapy były zamknięte, tworząc tunel w czasie naprawy wargi. Stało się tak, ponieważ wierzono, że z czasem w tunelu utworzy się kość, więc przeszczep kości nie będzie potrzebny. Kontynuacja wielu badań wykazała, że ​​kość rozwinęła się w tunelu w około 60 do 72% przypadków. Jego badania kontrolne do 18 roku życia wykazały, że pomimo opóźnienia wzrostu twarzy we wczesnym wieku o 18 lat wszystkie są na tym samym poziomie.

Badanie to ma na celu sprostanie wyzwaniu związanemu z regeneracją kości w rozszczepie wyrostka zębodołowego i poprawę wyników chirurgicznych poprzez zastosowanie terapii komórkami macierzystymi w populacji afrykańskiej. Wszystkie udokumentowane badania prowadzone są wyłącznie w populacjach pozaafrykańskich, które mają nieco inny fenotyp i zastosowanie do przedoperacyjnego leczenia ortodontycznego.

Komórki macierzyste to niezróżnicowane komórki progenitorowe zdolne do samoodnawiania i różnicowania się w dowolne wyspecjalizowane komórki. Komórki macierzyste z pępowiny w plastyce dziąseł wykazały dobrą regenerację kości w szczelinie wyrostka zębodołowego i minimalizację ruchomości dawcy. Ale istnieje potrzeba, abyśmy ustalili jego możliwości i skuteczność w naszym otoczeniu. Będzie to pierwsze badanie komórek macierzystych w protokole leczenia rozszczepów w naszym regionie. Wierzymy, że wraz z utworzeniem centrum komórek macierzystych w Makerere i niedawno sfinansowanym w celu poprawy jego wydajności, możemy przyczynić się do poprawy opieki nad rozszczepami w Ugandzie.

Sformułowanie problemu Obecnie akceptowany złoty standard postępowania w przypadku ubytku pęcherzyka płucnego budzi kontrowersje co do czasu, wyniku i związanej z tym chorobowości. Dlatego drugi powszechny protokół plastyki dziąseł (GPP) przeprowadzany podczas pierwotnej naprawy wargi w wieku od 3 do 6 miesięcy stanowiłby lepszą alternatywę, zapewniając wczesną naprawę przy mniejszej liczbie operacji, a także eliminując potrzebę wtórnego przeszczepu kości przy dalszym stosowaniu przeszczep komórek macierzystych. Zastosowanie przeszczepu komórek macierzystych pępowiny w zabiegu plastyki dziąseł i okostnej wykonano zaledwie w 10 przypadkach, a wyniki wskazują na dobrą regenerację kości w ubytku kości wyrostka zębodołowego. Pomimo wykazania sukcesu w dotychczasowej terapii komórkami macierzystymi istnieje potrzeba przeprowadzenia badania klinicznego w populacji afrykańskiej, aby udowodnić rolę i zastosowanie komórek macierzystych w regeneracji kości wyrostka zębodołowego w naszych warunkach.

Znaczenie Wyniki tego badania wykażą terapeutyczną rolę terapii komórkami macierzystymi jako skutecznego generatora kości alternatywnego do przeszczepu kości w korekcji ubytku wyrostka zębodołowego w rozszczepie wargi i podniebienia. Doprowadzi to do zmiany paradygmatu w leczeniu pacjentów z rozszczepem wargi i podniebienia poprzez wyeliminowanie konieczności wtórnego przeszczepu kości. Takie badanie będzie również promować ustanowienie przez Uniwersytet Makerere i rząd superspecjalistycznych metod leczenia, takich jak terapia komórkami macierzystymi. wypełnienie luki między akademickimi komórkami macierzystymi w laboratorium i praktyce klinicznej. To badanie, będące obecnie jedynym badaniem klinicznym wykorzystania pnia krwi pępowinowej w rekonstrukcji wyrostka zębodołowego w regionie, utoruje drogę do dalszego wykorzystania komórek macierzystych, a także opracowania standardowych procedur operacyjnych.

1.6. Uzasadnienie Teoria GPP jest zgodna z celem, jakim jest minimalizacja liczby operacji wtórnych poprzez optymalizację wyników operacji pierwotnej. A najważniejszym uzyskanym rezultatem jest eliminacja wtórnego przeszczepu kostnego. Ważne jest, aby przeprowadzać ograniczone rozwarstwienie, aby zapobiec ryzyku jatrogennego ograniczenia wzrostu twarzy, dlatego wprowadzenie dodatkowego źródła wytwarzania kości jeszcze bardziej poprawi wyniki GPP bez konieczności przeprowadzania rozległego rozbioru. Badanie to poprawi również podejście do wiedzy i praktykę wykorzystania komórek macierzystych krwi pępowinowej do celów klinicznych, aw większym stopniu w chirurgii do generowania kości. Komórka macierzysta pępowiny została wybrana jako źródło komórek macierzystych, ponieważ ma dużą liczbę i wysoką szybkość regeneracji. Jako pierwsze badanie w naszej placówce dotyczące pierwotnej naprawy pęcherzyków płucnych, proponujemy, aby odkrycie to określiło rolę terapii komórkami macierzystymi w rozszczepie wargi i chirurgii podniebienia oraz wykazać przydatność komórek macierzystych w przyszłości do korygowania ubytku wyrostka zębodołowego bez konieczności przeszczepu kości.

2.2. PROCEDURA BADANIA Stworzymy zespół nadzorujący w szpitalu dla kobiet Mulago, Kawempe i ośrodku zdrowia Mukono Hospital Plus Kisenyi. Zespół radiologii Ante Natal Care w tych ośrodkach zostanie przeszkolony w zakresie kluczowych parametrów będących przedmiotem zainteresowania, a po zidentyfikowaniu płodu z rozszczepem wargi i podniebienia za pomocą ultradźwięków uzyska dane demograficzne matek, w tym kontakt telefoniczny. Po przekazaniu tych informacji PI skontaktuje się z matkami i oceni je pod kątem kwalifikowalności. Jeśli spełnią wstępne kryteria kwalifikacyjne, uzyskana zostanie świadoma zgoda, a matki będą obserwowane aż do czasu porodu.

Jeśli urodzone dziecko ma jednostronny rozszczep wargi i rozszczep podniebienia z klinicznymi objawami rozszczepu wyrostka zębodołowego zostanie zrekrutowane do badania, a następnie zostanie pobrane łożysko i krew pępowinowa w celu pobrania komórek macierzystych znane będą przypadki: Ramię A Ramię B: Dzieci z Grupą kontrolną będą osoby z rozszczepem wargi i podniebienia mające podobny obraz kliniczny rozszczepu wargi i podniebienia, u których nie było możliwe pobranie krwi pępowinowej i łożyska.

Zabieg chirurgiczny zostanie wykonany przez jednego chirurga plastycznego i taką samą techniką chirurgiczną dla wszystkich uczestników.

Matki z grupy komórek macierzystych będą miały badania przesiewowe w kierunku HIV, zapalenie wątroby wykonane przed przetwarzaniem komórki macierzystej, jeśli okaże się, że jest reaktywna, proces nie będzie kontynuowany.

Ramię interwencyjne A:

Pobranie krwi pępowinowej:

• Krew pępowinowa zostanie pobrana przez położne przy użyciu zestawu do pobierania krwi pępowinowej Marcopharma (https://www.macopharma.com/products/collection-bags/) (rysunek #). Po bezpiecznym porodzie położna zaciska koniec pępka w pobliżu dziecka i zakłada kolejny zacisk dwa centymetry powyżej oraz wykonuje przecięcie pomiędzy dwoma zaciskami po odpowiedniej dezynfekcji. Za pomocą zestawu worków do pobierania igła zostanie wprowadzona do żyły w pępowinie i krew może płynąć grawitacyjnie do worka. Kiedy przepływ ustanie, worek z krwią zostanie zaciśnięty, aby zapobiec wyciekowi, i delikatnie odwrócić worek 8 do 10 razy, aby umożliwić normalne wymieszanie z antykoagulantem. Worek zostanie następnie oznaczony unikalnym identyfikatorem pacjenta i danymi matki, ramię drenu zostanie zaciśnięte, a worek zapieczętowany. Torba zostanie następnie umieszczona w zamykanej torebce zabezpieczającej przed zagrożeniem biologicznym, oznaczonej danymi matki, a następnie umieszczona w chłodnym pudełku w temperaturze pokojowej. I przewieziony do laboratorium.

Przetwarzanie komórek macierzystych:

• Gdy worki do pobierania krwi pępowinowej i tkanki dotrą do laboratorium, wszelkie przewody dołączone do worka zostaną usunięte i bardzo dokładnie wymieszane, zapewniając szczelność przewodów. Komórki macierzyste zostaną przetworzone i przygotowane do kriokonserwacji.

Kriokonserwacja komórek macierzystych:

• Gęstość komórek wymaganych do kriokonserwacji zostanie określona na podstawie wyników zliczania komórek, ponieważ pomoże to określić wymaganą objętość pożywki do kriokonserwacji.
• Komórki zostaną zawieszone w pożywce do kriokonserwacji i odwirowane przy 200 x g przez 10 min. A media zasysały się, pozostawiając osad komórkowy.
• Osad komórkowy zostanie ponownie zawieszony w odpowiedniej objętości pożywki do kriokonserwacji.
• Zawieszone komórki zostaną przeniesione do sterylnych kriofiolek.
• Po przeniesieniu zawiesiny komórek do sterylnej kriofiolki, kriofiolkę przenosi się do zamrażarki o temperaturze -80°C i przechowuje pionowo przez 24 godziny. okres czasu.
• Po upływie 24 godzin probówki zostaną przeniesione do jednostki do przechowywania ciekłego azotu w celu długoterminowego przechowywania w stanie kriogenicznym.

Rozmrażanie i przygotowanie do infiltracji:

• 2 dołki Matrigelu zostaną przygotowane dzień przed rozmrożeniem komórek.
• Komórki zostaną szybko rozmrożone poprzez obracanie fiolki w łaźni wodnej o temperaturze 37oC, aż pozostanie tylko mały kawałek zamrożonego materiału.
• Fiolka zostanie nasączona alkoholem i umieszczona w kapturze do hodowli tkankowej, a zawartość przeniesiona do probówki o pojemności 15 ml
• Dodaje się 5 ml podgrzanej wcześniej pożywki hodowlanej i delikatnie miesza.
• Jeśli widocznych jest wiele kolonii, pozostawia się je na 5 minut w temperaturze pokojowej do sedymentacji. Jeśli kolonie nie są widoczne, wirować przy 200 g przez 5 min.
• Supernatant zostanie odessany i ponownie zawieszony w 2 ml pożywki hodowlanej.
• Zaaspiruje się 1 studzienkę Matrigel i doda do niej rozmrożone komórki.
• Kolonie zostaną równomiernie rozprowadzone przez delikatne mieszanie i inkubowane przez noc w inkubatorze do hodowli tkankowych (37oC/5% CO2).
• Następnego dnia zaaspiruje się drugą studzienkę Matrigel i przeniesie supernatant z pierwszej studzienki i doda 2 ml pożywki hodowlanej.
• Kolonie zostaną równomiernie rozprowadzone przez delikatne mieszanie i inkubowane przez noc w inkubatorze do hodowli tkankowych (37oC/5% CO2).

2.2.2.1.5. Ramię interwencyjne A; Zabieg chirurgiczny:

• Naprawa rozszczepu i podniebienia zostanie wykonana w wieku od 3 do 6 miesięcy
• Naprawa zostanie przeprowadzona w znieczuleniu ogólnym z wstrzyknięciem środka zwężającego naczynia krwionośne.
• Tunel kostny zostanie utworzony poprzez usunięcie tkanki miękkiej między 2 segmentami zębodołowymi.
• Dach tunelu zostanie utworzony za pomocą płatów nosowych
• Podłoga zostanie utworzona przez zamknięcie klap ustnych.
• Przednia dolna ściana zostanie utworzona przez płaty wargowe.
• Ścianę górną przednią tworzy błona śluzowa wargi.
• W ten sposób komora jest uszczelniona od strony nosowej, ustnej i wargowej płatami śluzówkowo-okostnowymi

Infiltracja komórek macierzystych:

Komórki macierzyste zostaną wstrzyknięte do tunelu i wokół niego, a niektóre z nich zostaną roztarte w surgicelu i umieszczone w tunelu kostnym.

Przetwarzanie i obsługa po infiltracji:

• Pacjenci będą monitorowani po operacji przez 48 godzin do jednego miesiąca pod kątem jakichkolwiek powikłań, a następnie po 3 miesiącach i 6 miesiącach pod kątem regeneracji kości. Korzystanie z tomografii komputerowej.

Grupa kontrolna; Zostaniemy wybrani z tą samą prezentacją kliniczną, w podobnej grupie wiekowej i po tej samej procedurze chirurgicznej, z wyjątkiem tego, że nie będzie interwencji komórek macierzystych. A także obserwowano od jednego tygodnia do ćmy pod kątem powikłań, a następnie 3 i 6 miesięcy tomografii komputerowej w celu monitorowania wzrostu kości wyrostka zębodołowego.