Alveolar Cleft Rekonstruksjon Drevet av

Mye har gjort fremskritt i behandlingen av leppe- og ganespalte med utvikling av tverrfaglig teamtilnærming. Til tross for disse prestasjonene er det fortsatt mange utfordringer i behandlingen av alveolær spalte. Alveolær spalte som er den mindre iøynefallende komponenten av spalteavviket tiltrakk seg mindre interesse for korrigeringen; dens behandlingshistoriedatoer i en ikke så fjern fortid var like reparasjonsdatoer for leppespalte så langt som 390 før Kristus og reparasjon av gane i 1764. Det første forsøket på å behandle alveolar spalte med beintransplantasjon var i 1901 og deretter igjen i 1908, men det var ikke før i 1914 at Dracher var den første som utførte en vellykket beintransplantasjon av alveolardefekten ved bruk av tibialbein som fødte det primære alveolære beintransplantatet . Denne tilnærmingen ble senere funnet å være ødeleggende for det utviklende ansiktet og ble forlatt. Så i 1972 ble sekundær beintransplantasjon av maxilla og gjenværende alveolære spalter på stadiet med overgangstann, dette populært i noen sentre.

I 1967 introduserte den svenske plastikkirurgen Tord Skoog enda et nytt konsept kalt benfri alveolær graft eller primær periosteoplastikk (PPP) som han utførte i løpet av leppereparasjonen etter 3 måneder i denne reparasjonen. klaffer ble lukket for å danne en tunnel på tidspunktet for leppereparasjon. Dette var fordi det ble antatt at det med tiden ville dannes bein i tunnelen, og at bentransplantasjon ikke vil være nødvendig. Oppfølging i mange studier indikerte bein utviklet i tunnelen i omtrent 60 til 72 % av tilfellene. Hans oppfølgingsstudie frem til 18-årsalderen indikerte at til tross for en forsinkelse i ansiktsvekst i tidlig alder med 18 år, er alle på samme nivå.

Denne studien er satt opp for å adressere utfordringen med beinregenerering i alveolær spalte og forbedre det kirurgiske resultatet ved bruk av stamcelleterapi i afrikansk befolkning. Alle de dokumenterte studiene er kun utført i ikke-afrikanske populasjoner som har litt forskjellig fenotype og bruk enn før kirurgisk kjeveortopedisk behandling.

Stamceller er udifferensierte stamceller som er i stand til selvfornyelse og differensiering til alle spesialiserte celler. Navlestrengstamceller i gingivoperiosteoplastikk har vist god benregenerering i alveolær spalte og minimerer donormobiliteten. Men det er et behov for oss å etablere dens mulighet og effektivitet i ut setting. Dette vil være den første stamcelleforsøket i spaltebehandlingsprotokoll i vår region. Med etableringen av et stamcellesenter på Makerere og nylig finansiert for å forbedre kapasiteten, tror vi at vi kan bidra til forbedring av spaltepleie i Uganda.

Problemstilling Den nåværende aksepterte gullstandardprotokollen for alveolær defekt er kontroversiell når det gjelder timing, utfall og tilhørende sykelighet. Derfor vil den andre vanlige protokollen for Gingivoperiosteoplastikk (GPP) utført under primær leppereparasjon ved 3 til 6 måneder gi et bedre alternativ ved å gi tidlig reparasjon med et mindre antall operasjoner og også eliminere behovet for sekundær beintransplantasjon med videre bruk av stamcelletransplantasjon. Bruken av navlestrengstamcelletransplantasjon i gingivoperiosteoplastikk har kun blitt gjort i 10 tilfeller, og resultatene indikerer god benregenerering i den alveolære beindefekten. Til tross for demonstrasjonen av suksess i den tidligere stamcelleterapien, er det behov for å gjøre en klinisk prøve i afrikansk befolkning for å bevise rollen og bruken av stamceller i alveolar beinregenerering i våre omgivelser.

Betydning Funnene i denne studien vil demonstrere den terapeutiske rollen til stamcelleterapi som en effektiv alternativ bengenerator til beintransplantasjon for å korrigere alveolar defekt i leppe- og ganespalte. Dette vil presentere et paradigmeskifte i behandlingen av pasienter med leppe- og ganespalte ved å eliminere behovet for sekundær beintransplantasjon. En slik studie vil også fremme etableringen av Makerere University og regjeringen av superspesialisert behandling som stamcelleterapi. tette gapet mellom akademiske stamceller i laboratoriet og klinisk praksis. Denne studien, som for tiden er den eneste kliniske studien i bruk av navlestrengsblodstamme i alveolær rekonstruksjon i regionen, vil bane vei for videre utnyttelse av stamceller samt utvikling av standard operasjonsprosedyrer.

1.6. Begrunnelse Teorien om GPP er i samsvar med målet om å minimere antall sekundære operasjoner ved å optimalisere resultatene av primærkirurgi. Og det viktigste oppnådde resultatet er eliminering av sekundær beintransplantasjon. Det er viktig å ha begrenset disseksjon for å forhindre risiko for iatrogen begrensning av ansiktsvekst, så innføring av en ekstra kilde til bengenerering vil ytterligere forbedre resultatet av GPP uten behov for omfattende disseksjon. Denne studien vil også forbedre kunnskapsinnstillingen og praksisen for bruk av navlestrengsblodstamceller til kliniske formål og mer i kirurgi for å generere bein. Navlestrengstamcellen er valgt som kilden til stamceller fordi den har et høyt antall og høy regenereringshastighet. Siden vi er den første studien i vår setting på primær alveolar reparasjon foreslår vi at funnet vil definere rollen til stamcelleterapi ved leppespalte og ganekirurgi og demonstrere nytten av stamceller i fremtiden for å korrigere alveolær defekt uten behov for beintransplantasjon.

2.2. STUDIEPROSEDYRE Vi skal etablere et overvåkingsteam i Mulago Women's Hospital, Kawempe og Mukono Hospital Plus Kisenyi helsesenter. Ante Natal Care-radiologiteamet i disse sentrene vil bli opplært på nøkkelparametere av interesse, og når de identifiserer et foster med en leppe- og ganespalte på ultralyd, vil de få mødres demografi inkludert telefonkontakten. Når denne informasjonen er gitt til PI, vil mødrene bli kontaktet og evaluert for kvalifisering. I tilfelle de oppfyller de foreløpige kvalifikasjonskriteriene, vil informert samtykke innhentes og mødrene vil bli fulgt opp til leveringstidspunktet.

Hvis det fødte barnet har ensidig leppe- og ganespalte med kliniske tegn på alveolær spalte, vil det bli rekruttert inn i studien, og deretter vil placenta og navlestrengsblod samles inn for innhøsting av stamceller, vil tilfellene være kjent: A arm Arm B: Barn med leppe- og ganespalte med lignende klinisk presentasjon av leppe- og ganespalte der det ikke var mulig å samle navlestrengs- og placentablod vil være kontrollgruppen.

Det kirurgiske inngrepet vil bli utført av en enkelt plastikkirurg og samme kirurgiske teknikk for alle deltakerne.

Stamcellegruppemødre vil ha screening for HIV, Hepatitt gjort før behandling av stamcellen hvis funnet reaktiv vil prosessen ikke fortsette.

Intervensjonsarm A:

Innsamling av navlestrengsblod:

• Navlestrengsblod vil bli samlet inn av jordmødre ved hjelp av Marcopharma Navlestrengsblodprøvesett (https://www.macopharma.com/products/collection-bags/) (figur #). Når babyen er trygt forløst, vil jordmoren klemme navleenden nær babyen og legge til en ny klemme to centimeter over og et tverrsnitt mellom begge klemmene etter passende desinfisering. Ved å bruke oppsamlingsposesettet vil en nål settes inn i venen i ledningen og blod får strømme inn i posen ved hjelp av tyngdekraften. Når flyten stopper, vil blodposen klemmes for å forhindre lekkasje og posen snus forsiktig 8 til 10 ganger for å tillate normal blanding med antikoagulanten. Posen vil da bli merket med den unike pasient-IDen og mors detaljer, oppsamlingsslangearmen klippet og posen forseglet. Posen vil deretter bli plassert i en biohazard ziplock-pose merket med morens detaljer og deretter plassert i en kjøleboks ved romtemperatur. Og fraktet til laboratoriet.

Behandling av stamcellene:

• Så snart oppsamlingsposene og vevet fra navlestrengsblod når laboratoriet, vil alle slanger som er festet til posen, fjernes og blandes veldig grundig for å sikre at slangene er forseglet. Stamcellene vil bli behandlet og klargjort for kryokonservering.

Kryokonservering av stamceller:

• Tettheten av celler som kreves for kryokonservering vil bli bestemt basert på celletallresultatene, da dette vil bidra til å bestemme volumet av kryokonservering som trengs.
• Celler vil bli suspendert i kryokonserveringsmediet og sentrifugert ved 200 x g i 10 minutter. Og media aspirerte og etterlot cellepelleten.
• Cellepelleten vil bli resuspendert i passende volum av kryokonserveringsmediet.
• Suspenderte celler vil bli overført til sterile kryovialer.
• Når cellesuspensjonen har blitt overført til en steril kryovial, vil kryovialen bli overført til en -80 °C fryser og lagret vertikalt i 24 timer. tidsperiode.
• På slutten av 24 timer vil rørene bli overført til en flytende nitrogenlagringsenhet for langvarig kryolagring.

Tining og klargjøring for infiltrasjon:

• 2 brønner med Matrigel vil bli klargjort dagen før opptining av cellene.
• Celler vil bli tint raskt ved å virvle hetteglasset i et 37oC vannbad til bare en liten flis av frossent materiale gjenstår.
• Hetteglasset vil tørkes med alkohol og plasseres i vevskulturhetten og innholdet overføres til et 15 ml rør
• 5 ml forvarmet kulturmedium tilsettes og blandes forsiktig.
• Hvis det er mange synlige kolonier, vil de få sedimentere ved romtemperatur i 5 min. Hvis koloniene ikke er synlige, spinn ved 200g i 5 min.
• Supernatanten vil bli aspirert og resuspendert i 2 ml kulturmedium.
• 1 brønn med Matrigel vil bli aspirert og tinte celler tilsatt til den.
• Kolonier vil bli jevnt fordelt ved forsiktig omrøring og inkuberes over natten i en vevskulturinkubator (37oC/5 % CO2).
• Neste dag vil den andre brønnen til Matrigel aspireres og supernatanten overføres fra den første brønnen til den, og 2 ml kulturmedium tilsettes.
• Koloniene vil bli jevnt fordelt ved forsiktig omrøring og inkubert over natten i en vevskulturinkubator (37oC/5 % CO2).

2.2.2.1.5. Intervensjonsarm A; Kirurgisk prosedyre:

• Reparasjon av ganespalte og ganespalte vil bli utført etter 3 til 6 måneder
• Reparasjonen vil bli utført under generell anestesi med vasokonstriktorinjeksjon.
• Osseus tunnel vil bli opprettet ved å fjerne bløtvev mellom de 2 alveolære segmentene.
• Taket på tunnelen skal lages ved hjelp av neseklaffene
• Gulvet vil bli laget ved lukking av munnklaffene.
• Den fremre nedre veggen vil bli skapt av labiallappene.
• Den fremre øvre veggen er laget med leppeslimhinnen.
• Dermed er kammeret forseglet nasalt, oralt og labialt av mucoperiosteal klaffer

Infiltrasjon av stamceller:

Stamceller vil bli injisert i og rundt tunnelen, og noen av stamcellene vil bli scuffled i surgicel og plassert i osseus-tunnelen.

Behandling og håndtering etter infiltrasjon:

• Pasienter vil bli overvåket etter operasjonen i 48 timer til en måned for eventuelle komplikasjoner, deretter ved 3 måneder og 6 måneder for beinregenerering. Ved hjelp av CT-skanning.

Kontrollgruppen; Vi blir valgt med samme kliniske presentasjon lignende aldersgruppe og med samme kirurgiske prosedyre bortsett fra at det ikke vil være noen intervensjon av stamceller. Og også fulgt fra en uke til en møll for komplikasjoner, deretter 3 og 6 måneders CT-skanning for å overvåke alveolar beinvekst.