Alveoláris hasadék rekonstrukció Powered by

Sokat fejlődött az ajak- és szájpadhasadék gondozása a multidiszciplináris csapatszemlélet kialakításával. Ezen eredmények ellenére még mindig sok kihívással kell szembenézni az alveoláris hasadék kezelésében. Az alveolaris hasadék, amely a hasadék rendellenességének kevésbé szembetűnő összetevője, kevésbé keltette fel az érdeklődést a korrekciója iránt; kezelési előzményei a nem is olyan távoli múltban az ajakhasadékok javítására vonatkozó adatok 390 Krisztus előtt és a szájpadlás javítása 1764-ig voltak. Az alveoláris hasadék csontátültetéssel történő kezelésére először 1901-ben, majd 1908-ban próbálkoztak, de csak 1914-ben Dracher volt az első, aki sikeres csontátültetést végzett az alveoláris defektusból olyan sípcsont segítségével, amely az elsődleges alveoláris csontgraftot szülte. . Erről a megközelítésről később kiderült, hogy romboló hatású a fejlődő arcra, és elhagyták. Majd 1972-ben az átmeneti fogazat stádiumában a maxilla és a maradék alveolaris hasadékok másodlagos csontátültetése vált népszerűvé néhány centrumban.

1967-ben Tord Skoog svéd plasztikai sebész még egy új koncepciót vezetett be csont nélküli alveoláris graftnak vagy primer periosteoplasztikának (PPP), amelyet az ajakjavítás során végzett 3 hónapos korban. Ebben a javításban a periostealis lebenyek megemelkedtek, megtisztítva a lágy szöveteket az alveoláris defektus és a a szárnyakat lezárták, hogy alagutat képezzenek az ajakjavításkor. Ez azért volt így, mert azt hitték, hogy idővel csont képződik az alagútban, és így nem lesz szükség csontátültetésre. Számos tanulmány nyomon követése azt mutatta, hogy az esetek 60-72%-ában csont fejlődött ki az alagútban. A 18 éves korig végzett nyomon követési vizsgálata azt mutatta, hogy annak ellenére, hogy az arcnövekedés korai életkorban 18 évvel késik, mindegyik ugyanazon a szinten van.

Ennek a tanulmánynak az a célja, hogy foglalkozzon a csontregeneráció kihívásával az alveoláris hasadékban, és javítsa a műtéti eredményt az őssejtterápia alkalmazásával afrikai populációban. Az összes dokumentált vizsgálatot csak nem afrikai populációkban végezték, amelyek fenotípusa kissé eltér a műtét előtti fogszabályozó kezeléstől.

Az őssejtek differenciálatlan progenitor sejtek, amelyek képesek önmegújulásra és bármilyen speciális sejtté differenciálódni. A köldökzsinór-őssejtek a gingivoperiosteoplasztikában jó csontregenerációt mutattak az alveoláris hasadékban, és minimálisra csökkentették a donor mobilitását. De szükségünk van arra, hogy megalapozzuk annak lehetőségét és hatékonyságát a külső környezetben. Ez lesz az első őssejtkísérlet a hasadékkezelési protokollban régiónkban. Egy őssejtközpont létrehozásával Makerere-ben, és a közelmúltban finanszírozták kapacitásának javítását, úgy gondoljuk, hogy hozzájárulhatunk a hasadékok ellátásának javításához Ugandában.

Problémanyilatkozat Az alveoláris defektus jelenlegi elfogadott arany standard protokollja ellentmondásos az időzítés, a kimenetel és a kapcsolódó morbiditás tekintetében. Ezért a Gingivoperiosteoplasty (GPP) második általános protokollja, amelyet az elsődleges ajakjavítás során végeznek 3-6 hónapos korban, jobb alternatívát nyújtana, mivel kisebb számú műtéttel biztosítaná a korai helyreállítást, és elkerülné a másodlagos csontgraft szükségességét a őssejt transzplantáció. Köldökös őssejt-transzplantáció alkalmazása gingivoperiosteoplasticában mindössze 10 esetben történt, és az eredmények jó csontregenerációt jeleznek az alveoláris csontdefektusban. Annak ellenére, hogy a korábbi őssejtterápia sikeres volt, szükség van egy klinikai vizsgálatra afrikai populáción, hogy igazoljuk az őssejtek szerepét és felhasználását az alveoláris csontok regenerációjában a mi környezetünkben.

Jelentőség A tanulmány eredményei az őssejtterápia terápiás szerepét mutatják be, mint a csontgraft hatékony alternatív csontgenerátorát az ajak- és szájpadhasadék alveoláris defektusának korrekciójában. Ez paradigmaváltást jelent az ajak- és szájpadhasadékos betegek kezelésében azáltal, hogy megszűnik a másodlagos csontátültetés. Egy ilyen tanulmány elősegíti majd a Makerere Egyetem és a kormány által olyan szuperspecializált kezelések létrehozását, mint az őssejtterápia. az akadémiai őssejtek laboratóriumi és klinikai gyakorlata közötti szakadék megszüntetése. Ez a tanulmány jelenleg az egyetlen klinikai vizsgálat a köldökvérszár alveoláris rekonstrukcióban való felhasználásával kapcsolatban a régióban, utat nyit az őssejtek további hasznosításához, valamint szabványos működési eljárások kidolgozásához.

1.6. Indokolás A GPP elmélete összhangban van a másodlagos műtétek számának minimalizálásával az elsődleges műtétek eredményeinek optimalizálásával. Az elért legfontosabb eredmény pedig a másodlagos csontgraft eltávolítása. Az arcnövekedés iatrogén okozta korlátozásának kockázatának megelőzése érdekében fontos a korlátozott disszekció, így egy további csontképző forrás bevezetése tovább javítja a GPP kimenetelét anélkül, hogy kiterjedt disszekcióra lenne szükség. Ez a tanulmány javítani fogja a köldökzsinórvér-őssejtek klinikai célú felhasználásának ismereteit és gyakorlatát, és még inkább a csontképző műtét során. A köldökzsinór-őssejtet azért választottuk őssejtek forrásának, mert nagy számban és nagy a regenerálódási sebessége. Mivel az első vizsgálatunk a primer alveoláris helyreállításról, azt javasoljuk, hogy az eredmény meghatározza az őssejt-terápia szerepét az ajakhasadékban. és szájpadlás műtétet végeznek, és bemutatják az őssejtek hasznosságát az alveoláris defektusok jövőbeni korrekciójában csontgraft nélkül.

2.2. VIZSGÁLATI ELJÁRÁS A Mulago Női Kórházban, a Kawempe és a Mukono Hospital Plus Kisenyi egészségügyi központban felügyeleti csoportot hozunk létre. Ezekben a centrumokban az Ante Natal Care radiológiai csapata képzést kap a legfontosabb érdekes paraméterekről, és miután ultrahangon azonosítják az ajak- és szájpadhasadékos magzatot, megkapják az anyák demográfiai adatait, beleértve a telefonos elérhetőséget is. Amint ezt az információt eljuttatják a PI-hez, felvesszük a kapcsolatot az anyákkal, és értékelik a jogosultságot. Abban az esetben, ha megfelelnek az előzetes alkalmassági feltételeknek, tájékozott beleegyezést kapnak, és az anyákat nyomon követik a szülés időpontjáig.

Ha a megszületett gyermeknek egyoldali ajak- és szájpadhasadéka van, és az alveoláris hasadék klinikai bizonyítéka van, a vizsgálatba bevonják, majd placentát és köldökzsinórvért gyűjtenek az őssejtek begyűjtéséhez, a következő esetek ismertek: A kar B kar: Gyermekek Az ajak- és szájpadhasadék hasonló klinikai megjelenésű ajak- és szájpadhasadék, ahol nem lehetett köldökzsinór- és méhlepényvért gyűjteni, a Kontroll csoport lesz.

A sebészeti beavatkozást egyetlen plasztikai sebész végzi, és minden résztvevő számára ugyanaz a műtéti technika.

Az őssejtcsoportos anyák HIV-szűréset végeznek, az őssejt feldolgozása előtt hepatitis-szűrést végeznek, ha reaktívnak találják, a folyamat nem folytatódik.

A beavatkozási kar:

Köldökzsinórvér gyűjtése:

• A köldökzsinórvért a szülésznők a Marcopharma köldökzsinórvér-gyűjtő készlettel (https://www.macopharma.com/products/collection-bags/) veszik. (#. ábra). Amint a baba biztonságosan megszületett, a szülésznő a köldök végét a baba közelében rögzíti, és két centiméterrel feljebb egy másik bilincset ad hozzá, és megfelelő fertőtlenítés után átmetszeti a két bilincs között. A gyűjtőzsák készlet használatával egy tűt szúrnak a zsinór vénájába, és a vért gravitáció útján engedik a zsákba áramolni. Amikor az áramlás leáll, a vérzsákot rögzítik, hogy megakadályozzák a szivárgást, és a zsákot 8-10-szer óvatosan megfordítják, hogy lehetővé tegyék a normál keveredést az antikoagulánssal. A táskát ezután felcímkézik az egyedi betegazonosítóval és az anya adataival, a gyűjtőcső karját levágják, és a zsákot lezárják. A táskát ezután egy biológiailag veszélyes, cipzáras, az anya adataival felcímkézett zacskóba helyezik, majd szobahőmérsékleten hűtődobozba helyezik. És elvitték a laboratóriumba.

Az őssejtek feldolgozása:

• Amint a köldökzsinórvér-gyűjtő tasakok és szövetek megérkeznek a laboratóriumba, a zsákhoz csatlakoztatott csöveket le kell csupaszítani, és nagyon alaposan össze kell keverni, biztosítva a csövek lezárását. Az őssejteket feldolgozzák és előkészítik a mélyhűtésre.

Őssejtek mélyhűtése:

• A krioprezervációhoz szükséges sejtek sűrűségét a sejtszámlálási eredmények alapján határozzák meg, mivel ez segít meghatározni a szükséges mélyhűtési táptalaj mennyiségét.
• A sejteket a mélyhűtési tápközegben szuszpendáljuk, és 200 x g-vel centrifugáljuk 10 percig. És a táptalaj leszívott, hátrahagyva a sejtpelletet.
• A sejtpelletet a megfelelő térfogatú mélyhűtési táptalajban újraszuszpendáljuk.
• A felfüggesztett sejteket steril krioviálisokba helyezik át.
• Miután a sejtszuszpenziót áthelyezték egy steril mélyhűtőbe, a krioviát -80 °C-os fagyasztóba helyezik át, és függőlegesen tárolják 24 órán keresztül. időszak.
• 24 óra elteltével a csöveket egy folyékony nitrogén tároló egységbe helyezik át hosszú távú kriotárolás céljából.

Felolvasztás és előkészítés a beszivárgásra:

• A sejtek felolvasztása előtti napon 2 mérőhelyet készítünk elő Matrigelből.
• A sejtek gyorsan felolvadnak, ha az injekciós üveget 37 oC-os vízfürdőben forgatják, amíg csak egy kis fagyott anyagdarabka marad vissza.
• Az injekciós üveget alkohollal áttöröljük, és a szövettenyésztő edénybe helyezzük, és a tartalmát átvisszük egy 15 ml-es csőbe.
• 5 ml előmelegített táptalajt adunk hozzá, és óvatosan összekeverjük.
• Ha sok látható kolónia van, hagyjuk őket szobahőmérsékleten 5 percig ülepedni. Ha a telepek nem láthatók, centrifugáljuk 200 g-on 5 percig.
• A felülúszót leszívjuk, és 2 ml táptalajban újraszuszpendáljuk.
• 1 lyuk Matrigelt leszívunk, és felolvasztott sejteket adunk hozzá.
• A telepek egyenletesen oszlanak el enyhe keveréssel, és egy éjszakán át szövettenyésztő inkubátorban inkubálják (37 oC/5% CO2).
• Másnap leszívjuk a Matrigel második üregét, és az első üregből a felülúszót átvisszük rá, és hozzáadunk 2 ml táptalajt.
• A telepeket enyhe keveréssel egyenletesen elosztjuk, és egy éjszakán át szövettenyésztő inkubátorban (37oC/5% CO2) inkubáljuk.

2.2.2.1.5. Beavatkozó kar A; Sebészeti beavatkozás:

• A szájpadhasadék- és szájpadlás javítására 3-6 hónapos korban kerül sor
• A javítást általános érzéstelenítésben, érszűkítő injekcióval végezzük.
• Az Osseus alagutat a két alveoláris szegmens közötti lágy szövetek eltávolításával hozzák létre.
• Az alagút tetejét az orrszárnyak segítségével hozzák létre
• A padló a szájszárnyak lezárásával jön létre.
• Az elülső alsó falat a ajakszárnyak hozzák létre.
• Az elülső felső fal az ajak nyálkahártyájával jön létre.
• Így a kamra nazálisan, orálisan és labiálisan nyálkahártya-lebenyekkel van lezárva

Az őssejtek infiltrációja:

Őssejteket fecskendeznek be az alagútba és annak környékén, és az őssejtek egy részét a sebészetben összekeverik, és az osseus alagútba helyezik.

Beszivárgás utáni feldolgozás és kezelés:

• A betegeket a műtét után 48 órától egy hónapig monitorozzák bármilyen szövődmény szempontjából, majd 3 és 6 hónapos korban a csontregeneráció szempontjából. CT-vizsgálat használata.

A kontrollcsoport; Ugyanazzal a klinikai képpel, hasonló korcsoporttal és azonos műtéti eljárással választunk ki minket, kivéve, hogy őssejt beavatkozásra nem kerül sor. Egy héttől egy molylepkékig követték a szövődményeket, majd 3 és 6 hónapos CT-vizsgálatot az alveoláris csontok növekedésének nyomon követésére.