Alveolær spalte-rekonstruktion drevet af

Der er gjort meget fremskridt i plejen af ​​læbe-ganespalte med udvikling af multidisciplinær teamtilgang. På trods af disse resultater er der stadig mange udfordringer i behandlingen af ​​alveolær spalte. Alveolær spalte, der er den mindre iøjnefaldende komponent af spalteabnormaliteten, tiltrak sig mindre interesse for dens korrektion; dets behandlingshistoriedatoer i en ikke så fjern fortid var så langt som 390 før Kristus og ganereparation i 1764. Det første forsøg på at behandle alveolær spalte med knogletransplantation var i 1901 og derefter igen i 1908, men det var først i 1914, at Dracher var den første til at udføre en vellykket knogletransplantation af alveoledefekten ved hjælp af tibial knogle, der fødte den primære alveolære knogletransplantation . Denne tilgang blev senere fundet at være ødelæggende for det udviklende ansigt og blev opgivet. Så i 1972 blev sekundær knogletransplantation af maxilla og resterende alveolære kløfter på stadiet med overgangs-tandsætninger populært i nogle centre.

I 1967 introducerede den svenske plastikkirurg Tord Skoog endnu et nyt koncept kaldet knogleløst alveolært transplantat eller primær periosteoplastik (PPP), som han udførte i løbet af læbereparationstiden efter 3 måneder i denne reparation periosteale klapper blev hævet, hvilket rensede blødt væv mellem den alveolære defekt og klapperne blev lukket for at danne en tunnel på tidspunktet for læbereparation. Dette skyldtes, at man troede, at der med tiden ville dannes knogler i tunnelen, så knogletransplantation vil ikke være nødvendig. Opfølgning i mange undersøgelser indikerede knogleudvikling i tunnelen i omkring 60 til 72 % af tilfældene. Hans opfølgende undersøgelse op til 18-årsalderen viste, at trods en forsinkelse i ansigtsvækst i en tidlig alder med 18 år, er alle på samme niveau.

Denne undersøgelse har til formål at adressere udfordringen med knogleregenerering i alveolær spalte og forbedre det kirurgiske resultat ved brug af stamcelleterapi i den afrikanske befolkning. Alle de dokumenterede undersøgelser udføres kun i ikke-afrikanske populationer, som har en lidt anderledes fænotype og anvendelse end præ-kirurgisk ortodontisk behandling.

Stamceller er udifferentierede progenitorceller, der er i stand til selvfornyelse og differentiering til alle specialiserede celler. Navlestrengsstamceller i gingivoperiosteoplastik har vist god knogleregenerering i alveolær spalte og minimerer donormobiliteten. Men der er behov for, at vi fastslår dets mulighed og effektivitet i omgivelserne. Dette vil være det første stamcelleforsøg i spaltebehandlingsprotokol i vores region. Med etableringen af ​​et stamcellecenter i Makerere og for nylig finansieret for at forbedre dets kapacitet, tror vi på, at vi kan bidrage til forbedringen af ​​spalteplejen i Uganda.

Problemformulering Den nuværende accepterede guldstandardprotokol for alveolære defekter er kontroversiel med hensyn til timing, resultat og associeret morbiditet. Derfor ville den anden fælles protokol for Gingivoperiosteoplastik (GPP) udført under primær læbereparation efter 3 til 6 måneder give et bedre alternativ ved at give tidlig reparation med et mindre antal operationer og også undgå behovet for sekundær knogletransplantation med yderligere brug af stamcelletransplantation. Anvendelse af navlestrengstamcelletransplantation i gingivoperiosteoplastik procedure er kun blevet udført i 10 tilfælde, og resultaterne indikerer god knogleregenerering i den alveolære knogledefekt. På trods af demonstrationen af ​​succes i den tidligere stamcelleterapi er der behov for at lave et klinisk forsøg i den afrikanske befolkning for at bevise rollen og brugen af ​​stamceller i alveolær knogleregenerering i vores omgivelser.

Betydning Resultaterne af denne undersøgelse vil demonstrere den terapeutiske rolle af stamcelleterapi som en effektiv alternativ knoglegenerator til knogletransplantation til korrektion af alveolær defekt i læbe-ganespalte. Dette vil præsentere et paradigmeskifte i behandlingen af ​​patienter med læbe-ganespalte ved at eliminere behovet for sekundær knogletransplantation. En sådan undersøgelse vil også fremme oprettelsen af ​​Makerere University og regeringen af ​​superspecialiseret behandling såsom stamcelleterapi. at lukke kløften mellem akademiske stamceller i laboratoriet og klinisk praksis. Dette studie, som i øjeblikket er det eneste kliniske forsøg i brugen af ​​navlestrengsblodstamme i alveolær rekonstruktion i regionen, vil bane vejen for yderligere udnyttelse af stamceller samt udvikling af standard operationsprocedurer.

1.6. Begrundelse Teorien om GPP er i overensstemmelse med målet om at minimere antallet af sekundære operationer ved at optimere resultaterne af primær operation. Og det vigtigste opnåede resultat er eliminering af sekundær knogletransplantation. Det er vigtigt at have begrænset dissektion for at forhindre risikoen for iatrogen begrænsning af ansigtsvækst, så introduktion af en yderligere kilde til knoglegenerering vil yderligere forbedre resultatet af GPP uden behov for omfattende dissektion. Denne undersøgelse vil også forbedre vidensholdningen og praksis for brugen af ​​navlestrengsblodstamceller til kliniske formål og mere i kirurgi for at generere knogle. Navlestrengsstamcellen er valgt som kilden til stamceller, fordi den har et højt antal og høj regenereringshastighed. Da det er det første studie i vores omgivelser om primær alveolær reparation, foreslår vi, at resultatet vil definere rollen af ​​stamcelleterapi ved læbespalte og ganekirurgi og demonstrere nytten af ​​stamceller i fremtiden til at korrigere alveolær defekt uden behov for knogletransplantation.

2.2. STUDIEPROCEDURE Vi vil etablere et overvågningsteam i Mulago Kvindehospital, Kawempe og Mukono Hospital Plus Kisenyi sundhedscenter. Ante Natal Care-radiologiteamet i disse centre vil blive trænet i de vigtigste parametre af interesse, og når de identificerer et foster med en læbe-ganespalte på ultralyd, vil de indhente mødres demografi, inklusive telefonkontakten. Når disse oplysninger er givet til PI, vil mødrene blive kontaktet og evalueret for berettigelse. Hvis de opfylder de foreløbige berettigelseskriterier, vil der blive indhentet informeret samtykke, og mødrene vil blive fulgt op til tidspunktet for fødslen.

Hvis det fødte barn har en ensidig læbe- og ganespalte med kliniske tegn på alveolær spalte vil blive rekrutteret ind i undersøgelsen, og derefter vil placenta og navlestrengsblod blive indsamlet til høst af stamceller vil være kendt tilfældene: A arm Arm B: Børn med læbe-ganespalte med lignende klinisk præsentation af læbe-ganespalte, hvor det ikke var muligt at opsamle navlestrengs- og placentablod, vil være kontrolgruppen.

Det kirurgiske indgreb vil blive udført af en enkelt plastikkirurg og den samme kirurgiske teknik for alle deltagere.

Stamcellegruppemødre vil have screening for hiv, hepatitis udført før behandling af stamcellen, hvis fundet reaktiv, vil processen ikke fortsætte.

Interventionsarm A:

Indsamling af navlestrengsblod:

• Navlestrengsblod vil blive indsamlet af jordemødre ved hjælp af Marcopharma Navlestrengsblodopsamlingskit (https://www.macopharma.com/products/collection-bags/) (figur #). Når barnet er sikkert født, vil jordemoderen klemme navleenden tæt på barnet og tilføje endnu en klemme to centimeter over og en gennemskæring mellem begge klemmer efter passende desinficering. Ved hjælp af opsamlingsposesættet vil en nål blive indsat i venen i ledningen, og blod får lov til at strømme ind i posen ved hjælp af tyngdekraften. Når flowet stopper, klemmes blodposen for at forhindre lækage, og posen vendes forsigtigt 8 til 10 gange for at tillade normal blanding med antikoagulanten. Posen vil derefter blive mærket med det unikke patient-id og mors detaljer, opsamlingsslangearm klippet og posen forseglet. Posen vil derefter blive placeret i en biohazard ziplock-pose mærket med moderens detaljer og derefter anbragt i en køleboks ved stuetemperatur. Og transporteret til laboratoriet.

Behandling af stamceller:

• Når navlestrengsblodopsamlingsposerne og vævet når laboratoriet, vil enhver slange, der er fastgjort til posen, blive fjernet og blandet meget grundigt, så det sikres, at slangerne er forseglet. Stamcellerne vil blive behandlet og klargjort til kryokonservering.

Kryokonservering af stamceller:

• Tætheden af ​​celler, der kræves til Cryopreservation, vil blive bestemt baseret på celletællingsresultaterne, da dette vil hjælpe med at bestemme mængden af ​​Cryopreservation Medium, der er nødvendig.
• Celler vil blive suspenderet i kryokonserveringsmediet og centrifugeret ved 200 x g i 10 min. Og medierne aspirerede og efterlod cellepelleten.
• Cellepelleten vil blive resuspenderet i det passende volumen af ​​kryokonserveringsmediet.
• Suspenderede celler vil blive overført til sterile kryovials.
• Når cellesuspensionen er blevet overført til et sterilt kryovial, overføres kryovialet til en -80°C fryser og opbevares lodret i 24 timer. tidsperiode.
• I slutningen af ​​24 timer vil rørene blive overført til en opbevaringsenhed for flydende nitrogen til langvarig kryolagring.

Optøning og forberedelse til infiltration:

• 2 brønde af Matrigel vil blive klargjort dagen før optøning af cellerne.
• Celler vil blive optøet hurtigt ved at hvirvle hætteglasset i et 37oC vandbad, indtil der kun er en lille chip af frosset materiale tilbage.
• Hætteglasset vil blive vasket med alkohol og anbringes i vævskulturhætten, og indholdet overføres til et 15 ml rør
• 5 ml forvarmet dyrkningsmedium tilsættes og blandes forsigtigt.
• Hvis der er mange synlige kolonier, får de lov til at sedimentere ved stuetemperatur i 5 min. Hvis kolonierne ikke er synlige, centrifugeres ved 200 g i 5 min.
• Supernatanten vil blive aspireret og resuspenderet i 2 ml dyrkningsmedium.
• 1 brønd Matrigel vil blive aspireret og optøede celler tilføjet til den.
• Kolonier vil blive jævnt fordelt ved forsigtig omrøring og inkuberes natten over i en vævskulturinkubator (37oC/5 % CO2).
• Den næste dag vil den anden brønd af Matrigel blive aspireret, og supernatanten overføres fra den første brønd til den, og 2 ml dyrkningsmedium tilsættes.
• Kolonierne vil blive jævnt fordelt ved forsigtig omrøring og inkuberet natten over i en vævskulturinkubator (37oC/5 % CO2).

2.2.2.1.5. Interventionsarm A; Kirurgisk procedure:

• Reparation af ganespalte og ganespalte vil blive udført efter 3 til 6 måneder
• Reparationen vil blive udført under generel anæstesi med vasokonstriktorinjektion.
• Osseus tunnel vil blive skabt ved at fjerne blødt væv mellem de 2 alveolære segmenter.
• Taget af tunnelen vil blive skabt ved hjælp af næseklapperne
• Gulvet skabes ved lukning af mundklapperne.
• Den forreste nedre væg vil blive skabt af læbeklapperne.
• Den forreste øvre væg er skabt med læbeslimhinden.
• Således er kammeret forseglet nasalt, oralt og labialt af mucoperiosteale klapper

Infiltration af stamceller:

Stamceller vil blive injiceret i og omkring tunnelen, og nogle af stamcellerne vil blive scuffled i surgicel og placeret i osseus tunnelen.

Behandling og håndtering efter infiltration:

• Patienterne vil blive overvåget efter operationen i 48 timer til en måned for eventuelle komplikationer, derefter efter 3 måneder og 6 måneder for knogleregenerering. Brug af CT-scanning.

Kontrolgruppen; Vi bliver udvalgt med den samme kliniske præsentation lignende aldersgruppe og med den samme kirurgiske procedure, bortset fra at der ikke vil være nogen indgreb fra stamceller. Og også fulgt fra en uge til en møl for komplikationer derefter 3 og 6 måneders CT-scanning for at overvåge alveolær knoglevækst.