Alveolar Cleft Rekonstruktion Drivs av

Mycket har gjorts i vården av läpp- och gomspalt med utvecklingen av multidisciplinärt team. Trots dessa prestationer finns det fortfarande en hel del utmaningar vid behandling av alveolär klyfta. Alveolär spalt som är den mindre iögonfallande komponenten av spaltavvikelsen väckte mindre intresse för dess korrigering; Dess behandlingshistoriska datum i det inte så avlägset förflutna var så långt som 390 år före Kristus och gomreparation 1764. Det första försöket att behandla alveolarklyftan med bentransplantat var 1901 och sedan igen 1908, men det var inte förrän 1914 som Dracher var den första att utföra ett framgångsrikt bentransplantat av alveolärdefekten med användning av tibialben som födde det primära alveolära bentransplantatet . Detta tillvägagångssätt visade sig senare vara destruktivt för det utvecklande ansiktet och övergavs. Sedan 1972 blev sekundär bentransplantation av överkäken och kvarvarande alveolära klyftor i övergångsskedet populärt i vissa centra.

År 1967 introducerade den svenske plastikkirurgen Tord Skoog ännu ett nytt koncept som kallas benlöst alveolärt transplantat eller primär periosteoplastik (PPP) som han utförde under tiden för läppreparation vid 3 månader i denna reparation periosteala flikar höjdes genom att rensa mjuk vävnad mellan alveolärdefekten och flikarna stängdes för att bilda en tunnel vid tidpunkten för läppreparationen. Detta berodde på att man trodde att ben med tiden skulle bildas i tunneln och så bentransplantation kommer inte att behövas. Uppföljning i många studier visade att ben utvecklades i tunneln i cirka 60 till 72 % av fallen. Hans uppföljningsstudie fram till 18 års ålder indikerade att trots en fördröjning i ansiktstillväxt vid tidig ålder med 18 år är alla på samma nivå.

Denna studie är avsedd att ta itu med utmaningen med benregenerering i alveolär klyfta och förbättra det kirurgiska resultatet genom användning av stamcellsterapi i den afrikanska befolkningen. Alla de dokumenterade studierna utförs endast i icke-afrikanska populationer som har något annorlunda fenotyp och användning jämfört med pre-kirurgisk ortodontisk behandling.

Stamceller är odifferentierade progenitorceller som kan förnya sig själv och differentieras till alla specialiserade celler. Navelsträngsstamceller vid gingivoperiosteoplastik har visat god benregenerering i alveolklyftan och minimerar donatorrörligheten. Men det finns ett behov för oss att fastställa dess möjlighet och effektivitet i miljön. Detta kommer att vara den första stamcellsförsöket med spaltbehandlingsprotokoll i vår region. Med etableringen av ett stamcellscenter i Makerere och nyligen finansierat för att förbättra dess kapacitet, tror vi att vi kan bidra till att förbättra spaltvården i Uganda.

Problemformulering Det nuvarande accepterade guldstandardprotokollet för alveolär defekt är kontroversiellt när det gäller timing, resultat och tillhörande sjuklighet. Därför skulle det andra vanliga protokollet för Gingivoperiosteoplastik (GPP) som utförs under primär läppreparation vid 3 till 6 månader ge ett bättre alternativ genom att tillhandahålla tidig reparation med ett mindre antal operationer och även undanröja behovet av sekundärt bentransplantat med ytterligare användning av stamcellstransplantation. Användningen av navelstamcellstransplantation vid gingivoperiosteoplastik har endast gjorts i 10 fall och resultaten indikerar god benregenerering i den alveolära bendefekten. Trots demonstrationen av framgång i den tidigare stamcellsterapin finns det ett behov av att göra en klinisk prövning i den afrikanska befolkningen för att bevisa rollen och användningen av stamceller i alveolär benregenerering i vår miljö.

Betydelse Resultaten av denna studie kommer att visa den terapeutiska rollen av stamcellsterapi som en effektiv alternativ bengenerator till bentransplantat vid korrigering av alveolär defekt i läpp- och gomspalt. Detta kommer att presentera ett paradigmskifte i behandlingen av patienter med läpp- och gomspalt genom att eliminera behovet av sekundärt bentransplantat. En sådan studie kommer också att främja inrättandet av Makerere University och regeringen av superspecialiserade behandlingar såsom stamcellsterapi. täppa till gapet mellan akademiska stamceller i laboratoriet och klinisk praxis. Denna studie som för närvarande är den enda kliniska prövningen av användningen av navelsträngsblodstam i alveolär rekonstruktion i regionen kommer att bana väg för ytterligare användning av stamceller samt utveckling av standardoperationsprocedurer.

1.6. Motivering Teorin om GPP är förenlig med målet att minimera antalet sekundära operationer genom att optimera resultaten av primärkirurgi. Och det viktigaste resultatet som erhållits är elimineringen av sekundärt bentransplantat. Det är viktigt att ha begränsad dissektion för att förhindra risken för iatrogen begränsning av ansiktsväxten så införandet av en ytterligare källa till bengenerering kommer att förbättra resultatet av GPP ytterligare utan behov av omfattande dissektion. Denna studie kommer också att förbättra kunskapsinställningen och praxis för användning av stamceller från navelsträngsblod för kliniska ändamål och mer så vid kirurgi för att generera ben. Navelsträngsstamcellen är vald som källan till stamceller eftersom den har ett högt antal och hög regenereringshastighet. Eftersom den är den första studien i vår miljö om primär alveolär reparation föreslår vi att fyndet kommer att definiera rollen av stamcellsterapi vid läppspalt och gomkirurgi och demonstrera användbarheten av stamceller i framtiden för att korrigera alveolär defekt utan behov av bentransplantat.

2.2. STUDIEPROCEDUR Vi kommer att etablera ett övervakningsteam i Mulago Women's Hospital, Kawempe och Mukono Hospital Plus Kisenyi hälsocenter. Ante Natal Care-röntgenteamet i dessa centra kommer att utbildas på nyckelparametrarna av intresse och när de identifierar ett foster med en läpp- och gomspalt på ultraljud, kommer de att få moderns demografi inklusive telefonkontakt. När denna information har lämnats till PI, kommer mammorna att kontaktas och utvärderas för behörighet. Om de uppfyller de preliminära behörighetskriterierna kommer informerat samtycke att erhållas och mödrarna kommer att följas upp till förlossningen.

Om barnet som föds har en ensidig läpp- och gomspalt med kliniska tecken på alveolär spalt kommer att rekryteras in i studien och sedan kommer placenta och navelsträngsblod att samlas in för skörd av stamceller kommer att vara kända fallen: A arm Arm B: Barn med läpp- och gomspalt med liknande klinisk presentation av läpp- och gomspalt där det inte var möjligt att samla navelsträngs- och placentablod kommer att vara kontrollgruppen.

Det kirurgiska ingreppet kommer att göras av en enda plastikkirurg och samma kirurgiska teknik för alla deltagare.

Stamcellsgruppmödrar kommer att ha screening för HIV, Hepatit görs innan bearbetning av stamcellen om den befinns reaktiv kommer processen inte att fortsätta.

Interventionsarm A:

Insamling av navelsträngsblod:

• Navelsträngsblod kommer att samlas in av barnmorskor med hjälp av Marcopharma Navelsträngsbloduppsamlingskit (https://www.macopharma.com/products/collection-bags/) (figur #). När barnet väl är förlöst kommer barnmorskan att klämma fast naveländen nära barnet och lägga till ytterligare en klämma två centimeter ovanför och en tvärsektion mellan båda klämmorna efter lämplig desinficering. Med hjälp av uppsamlingspåsset kommer en nål att föras in i venen i naveln och blodet tillåts rinna genom gravitationen in i påsen. När flödet stannar, kommer blodpåsen att klämmas fast för att förhindra läckage och påsen vänds försiktigt upp och ner 8 till 10 gånger för att tillåta normal blandning med antikoagulanten. Påsen kommer sedan att märkas med det unika patient-ID och moderns detaljer, uppsamlingsslangen klipps ihop och påsen förseglas. Påsen kommer sedan att placeras i en biohazard ziplock-påse märkt med moderns detaljer och sedan placeras i en kylbox i rumstemperatur. Och transporteras till laboratoriet.

Bearbetning av stamceller:

• När navelsträngsbloduppsamlingspåsarna och vävnaden når laboratoriet kommer alla slangar som är fästa på påsen att tas av och blandas mycket noggrant för att säkerställa att slangarna är förseglade. Stamcellerna kommer att bearbetas och förberedas för kryokonservering.

Kryokonservering av stamceller:

• Tätheten av celler som krävs för kryokonservering kommer att bestämmas baserat på cellräkningsresultaten eftersom detta kommer att hjälpa till att bestämma volymen av kryokonserveringsmedel som behövs.
• Celler kommer att suspenderas i kryokonserveringsmediet och centrifugeras vid 200 x g under 10 minuter. Och media aspirerade och lämnade cellpelleten bakom sig.
• Cellpelleten kommer att återsuspenderas i lämplig volym av kryokonserveringsmediet.
• Suspenderade celler kommer att överföras till sterila cryovials.
• När cellsuspensionen har överförts till en steril kryovial, kommer kryovialen att överföras till en -80°C frys och förvaras vertikalt i 24 timmar. tidsperiod.
• I slutet av 24 timmar kommer rören att överföras till en lagringsenhet för flytande kväve för långvarig kryolagring.

Upptining och förberedelse för infiltration:

• 2 brunnar av Matrigel kommer att förberedas dagen före upptining av cellerna.
• Celler kommer att tinas snabbt genom att snurra flaskan i ett 37oC vattenbad tills endast ett litet fragment av fruset material återstår.
• Flaskan kommer att torkas av med alkohol och placeras i vävnadsodlingshuven och innehållet överförs till ett 15 ml rör
• 5 ml förvärmt odlingsmedium tillsätts och blandas försiktigt.
• Om det finns många synliga kolonier kommer de att tillåtas sedimentera i rumstemperatur i 5 min. Om kolonier inte är synliga, snurra vid 200g i 5 min.
• Supernatanten kommer att aspireras och återsuspenderas i 2 ml odlingsmedium.
• 1 brunn av Matrigel kommer att aspireras och tinade celler tillsätts till den.
• Kolonier kommer att fördelas jämnt genom försiktig omrörning och inkuberas över natten i en vävnadskulturinkubator (37oC/5 % CO2).
• Nästa dag kommer den andra brunnen i Matrigel att aspireras och supernatanten överföras från den första brunnen till den och 2 ml odlingsmedium tillsätts.
• Kolonierna kommer att fördelas jämnt genom försiktig omrörning och inkuberas över natten i en vävnadskulturinkubator (37oC/5 % CO2).

2.2.2.1.5. Interventionsarm A; Kirurgiskt ingrepp:

• Reparation av gomspalt och gomspalt kommer att göras efter 3 till 6 månader
• Reparationen kommer att göras under generell anestesi med vasokonstriktorinjektion.
• Osseus tunnel kommer att skapas genom att ta bort mjuk vävnad mellan de två alveolära segmenten.
• Tunneltaket kommer att skapas med hjälp av näsflikarna
• Golvet kommer att skapas genom stängning av munflikarna.
• Den främre undre väggen kommer att skapas av blygdläpparna.
• Den främre övre väggen skapas med läppslemhinnan.
• Således förseglas kammaren nasalt, oralt och labialt av mucoperiosteala flikar

Infiltration av stamceller:

Stamceller kommer att injiceras i och runt tunneln och några av stamcellerna kommer att scuffles i surgicel och placeras i osseus tunneln.

Bearbetning och hantering efter infiltration:

• Patienterna kommer att övervakas efter operationen i 48 timmar till en månad för eventuella komplikationer, sedan efter 3 månader och 6 månader för benregenerering. Använder CT-skanning.

Kontrollgruppen; Vi väljs ut med samma kliniska presentation liknande åldersgrupp och med samma kirurgiska ingrepp förutom att det inte kommer att ske någon ingripande av stamceller. Och följde också från en vecka till en natt för komplikationer sedan 3 och 6 månaders CT-skanning för att övervaka alveolär bentillväxt.