先天性 CD8+ T 细胞与 Phi+ 血液恶性肿瘤中酪氨酸激酶抑制剂耐药性突变的演变之间是否存在关联。 (TIPHI)

在 2000 年伊马替尼首次靶向治疗问世之前，慢性粒细胞白血病 (CML) 是最令人恐惧的骨髓增生综合征（MPS，Philadelphia+），中位生存期为 3 年。 除了一小部分对酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) 没有反应或反应不佳的患者外，当患者接受终身 TKI 治疗（白血病干细胞敏感性低到 TKI）。 一些对治疗反应良好的患者可能会考虑停止治疗，但其中超过 50% 的患者将不得不重新开始治疗。 如此多的患者将不得不终生服用 TKI，这带来了几个问题：

1. - 对各种分子的不耐受取决于每种分子的毒性，
2. - 对 TKI 产生耐药性，其特征是 BcrAbl1 融合 RNA 的百分比上升，尽管进行了治疗或剂量增加。

这些阻力有很多原因，包括已知的任何分子：

• 可通过分子的血浆剂量评估的药代动力学原因；
• 白血病细胞相关原因：进入细胞取决于流入泵 (hOct1) 和流出泵 (MDR1) 之间的拮抗作用以及未能与 BcrAbl1 靶标结合（药效学），主要是通过 Abl1 的酪氨酸激酶结构域突变，特别是通过Abl1基因的扩增。

这些适用于 Phi+ 急性淋巴细胞白血病 (Phi+ALL) 的巩固期。

BcrAbl1 酪氨酸激酶结构域 (TKD) 的突变约占一线治疗耐药原因的 25 - 30%，但在二线治疗中可达到 50 - 60% 的耐药性。这些突变的存在需要改变分子，如果可能的话。 已经描述了超过 100 个 TKD 突变。 这些突变的发展/选择影响第一代 TKI（伊马替尼）和第二代 TKI（达沙替尼、尼罗替尼和博舒替尼）。 第三代 TKI（普纳替尼）甚至出现耐药突变。 因此，灵敏度曲线可用于帮助选择一线治疗以外的正确分子。

在所有这些突变中，有些特别可怕，例如 T315I（仅对 ponatinib 敏感）或 T315M 或 L（对所有分子均有耐药性，包括 ponatinib）。 尼姆大学医院是 2005 年 STIC 计划的七个中心之一，致力于寻找 TDK 突变。 2018年，我们通过低敏技术（Sanger测序）在68例耐药突变患者中检测到93种不同突变，其中T315I 23例。

我们现在有了一种更灵敏的方法，涉及使用下一代测序，再加上非常高保真度的聚合酶链反应，提供了新的视角。

CD8+ T 细胞通常参与肿瘤控制。 这导致了一种有前途的肿瘤治疗新方法：靶向抑制性受体或“免疫检查点”（例如 CTLA4、PD1 或其配体 PDL1）的免疫疗法。 这些是在延长的 T 细胞激活后建立的负反馈通路。 当 T 淋巴细胞长时间受到刺激时，它们开始在其表面表达这种类型的受体。 这些抑制性受体抑制 T 细胞功能和增殖。 靶向这些受体的抗体会阻断这种负反馈通路，从而增强 T 细胞活性。 由于针对肿瘤抗原的淋巴细胞会过度表达这些抑制性受体，因此针对它们施用抗体可以增强抗肿瘤免疫活性，并且在某些患者中会诱导肿瘤消退。

通常，T315I 型突变的存在与 BcrAbl1 率的爆炸性增加有关，而 BcrAbl1 与慢性粒细胞白血病的进展有关。 E255K 等其他突变也是如此。 因此，我们有一些 BcrAbl1 水平低于或等于 1% 且 T315I 百分比接近 100% 超过一年的“非典型”T315I 病例，或者 BcrAbl1 水平在 1% 左右超过一年的患者2 年，携带 T315I，电量为 5%。

因此，似乎仅存在某些突变（如 T315I）并不能单独解释疾病的进展。 这种爆炸性进展可能与（至少）特定于白血病细胞的第二个事件有关，例如另一个基因的突变（尚未描述）或与白血病细胞的环境有关，例如由免疫系统控制。

这些 TKI 抗性突变的“非典型”进化，尤其是 T315I，这种突变既频繁又可怕，可以由这些先天性 CD8+ T 细胞控制。 这可以解释携带这些突变的克隆存在的时间很长（记录的时间长达 2 年以上），但没有明显的疾病进展，除了仅在分子水平上接近 1% 的 BcrAbl1 水平。

该项目的目的是测试低水平的 BcrAbl1（尽管存在抗性突变）是否与高水平的先天 CD8+ T 细胞相关，假设这些细胞具有抗肿瘤作用。 本研究旨在调查：

• 根据 ELN 2013 和 PFi-LMC 的建议，先天性 CD8+ T 细胞率与携带耐药突变的 Phi+ 病理（慢性髓性白血病和费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病 (Phi+ ALL)）的演变之间存在关联。
• 先天 CD8+ T 细胞水平与 TKI 耐药克隆扩增之间的关联，评估为携带突变的 BcrAbl1 拷贝数相对于 Abl1 拷贝数。