Er der en sammenhæng mellem medfødte CD8+ T-celler og udviklingen af ​​tyrosinkinasehæmmerresistensmutationer i Phi+ hæmatologiske maligniteter. (TIPHI)

Før fremkomsten af ​​de første målrettede behandlinger med imatinib i 2000, var kronisk myeloid leukæmi (CML) det mest frygtede myeloproliferative syndrom (MPS, Philadelphia+), med en median overlevelse på 3 år. Bortset fra en lille procentdel af patienter, som ikke reagerer eller reagerer dårligt på tyrosinkinasehæmmere (TKI'er), er sandsynligheden for overlevelse nu meget tæt på den generelle befolknings sandsynlighed, når patienter er i livslang TKI-behandling (leukæmiske stamceller har lav følsomhed til TKI'er). Nogle patienter med god respons på behandlingen vil sandsynligvis overveje at stoppe behandlingen, men lidt over 50 % af dem bliver nødt til at genoptage den. Så mange patienter bliver nødt til at tage TKI'er for livet, hvilket giver flere problemer:

1. - intolerance over for de forskellige molekyler afhængigt af hver enkelts toksicitet
2. - udvikling af resistens over for TKI'er, karakteriseret ved en stigning i procentdelen af ​​BcrAbl1-fusions-RNA på trods af behandling eller øgede doser.

Der er mange årsager til disse resistenser, herunder dem, der er kendt for ethvert molekyle:

• farmakokinetiske årsager, som kan vurderes ved plasmadoseringen af ​​molekylerne;
• Leukæmiske celle-relaterede årsager: passage ind i cellen afhængig af antagonisme mellem influxpumpe (hOct1) og effluxpumper (MDR1) og manglende binding til BcrAbl1-målet (farmakodynamik), hovedsageligt ved mutation af tyrosinkinasedomænet i Abl1, undtagelsesvis ved amplifikation af Abl1-genet.

Disse gælder for konsolideringsfasen af ​​Phi+ akut lymfatisk leukæmi (Phi+ALL).

Mutationer i tyrosinkinasedomænet (TKD) af BcrAbl1 tegner sig for ca. 25 - 30 % af årsagerne til førstelinjebehandlingsresistens, men kan nå op på 50 – 60 % af resistensen ved 2.linjebehandling. Tilstedeværelsen af ​​disse mutationer kræver en ændring af molekyle, når det er muligt. Mere end 100 TKD-mutationer er blevet beskrevet. Udviklingen/udvælgelsen af ​​disse mutationer påvirker både førstegenerations TKI'er (imatinib) og andengenerations TKI'er (dasatinib, nilotinib og bosutinib). Resistensmutationer dukker endda op for tredje generations TKI'er (ponatinib). Følsomhedsprofiler er derfor tilgængelige for at hjælpe med at vælge de rigtige molekyler ud over førstelinjebehandling.

Blandt alle disse mutationer er nogle særligt frygtindgydende, såsom T315I (kun følsom over for ponatinib) eller T315M eller L (resistent over for alle molekyler, inklusive ponatinib). Nîmes University Hospital er et af de syv centre i STIC-programmet fra 2005, der er viet til at søge efter TDK-mutationer. I 2018 havde vi opdaget 93 forskellige mutationer i 68 patienter med resistensmutationer, herunder 23 tilfælde af T315I, ved lavfølsomhedsteknikker (Sanger-sekventering).

Vi har nu en langt mere følsom metode, der involverer brugen af ​​Next Generation Sequencing, kombineret med meget high fidelity Polymerase Chain Reactions, der tilbyder nye perspektiver.

CD8+ T-celler er klassisk involveret i tumorkontrol. Dette har ført til en lovende ny tilgang til behandling af tumorer: immunterapi rettet mod hæmmende receptorer eller "immune kontrolpunkter" (f.eks. CTLA4, PD1 eller dens ligand PDL1). Disse er negative feedback-veje, der er oprettet efter langvarig T-celleaktivering. Når T-lymfocytter stimuleres over lange perioder, begynder de at udtrykke denne type receptor på deres overflade. Disse hæmmende receptorer hæmmer T-cellefunktion og proliferation. Antistoffer, der retter sig mod disse receptorer, blokerer denne negative feedback-vej og øger derved T-celleaktivitet. Fordi lymfocytter rettet mod tumorantigener overudtrykker disse inhiberende receptorer, kan administration af antistoffer rettet mod dem øge antitumorimmunaktiviteten og hos nogle patienter inducere tumorregression.

Klassisk er tilstedeværelsen af ​​en type T315I-mutation forbundet med en eksplosiv stigning i hastigheden af ​​BcrAbl1 forbundet med en progression af kronisk myeloid leukæmi. Dette var også tilfældet for andre mutationer som E255K. Vi har således nogle få tilfælde af "atypisk" T315I med BcrAbl1-niveauer lavere end eller lig med 1 % og en procentdel af T315I tæt på 100 % i mere end et år eller en patient med et BcrAbl1-niveau på omkring 1 % i mere end 2 år og bærer en T315I på 5%.

Så det ser ud til, at den blotte tilstedeværelse af visse mutationer, såsom T315I, ikke alene forklarer udviklingen af ​​sygdommen. Denne eksplosive progression kan være forbundet med en anden begivenhed (i det mindste) specifik for leukæmicellen, såsom mutationen af ​​et andet gen (endnu ikke beskrevet) eller forbundet med leukæmicellens miljø, såsom kontrol af immunsystemet.

Den "atypiske" udvikling af disse TKI-resistensmutationer, især T315I, som er lige så hyppig, som den er skræmmende, kunne kontrolleres af disse medfødte CD8+ T-celler. Dette ville forklare de lange perioder (op til mere end 2 år dokumenteret) af tilstedeværelsen af ​​kloner, der bærer disse mutationer uden markant sygdomsprogression, bortset fra, udelukkende på et molekylært niveau, et BcrAbl1-niveau tæt på 1 %.

Formålet med dette projekt er at teste, om lave niveauer af BcrAbl1, på trods af tilstedeværelsen af ​​resistensmutationer, er relateret til høje niveauer af medfødte CD8+ T-celler, i den hypotese, at disse celler har en antitumorrolle. Denne forskning har til formål at undersøge:

• En sammenhæng mellem hastigheden af ​​medfødte CD8+ T-celler og udviklingen af ​​Phi+ patologier (kronisk myeloid leukæmi og Philadelphia kromosompositiv Akut lymfatisk leukæmi (Phi+ ALL), der bærer en resistensmutation, ifølge ELN 2013 og PFi-LMC anbefalingerne.
• En sammenhæng mellem niveauet af medfødte CD8+ T-celler og udvidelsen af ​​TKI-resistenskloner, vurderet som antallet af BcrAbl1-kopier, der bærer mutationen i forhold til antallet af Abl1-kopier.