Van-e összefüggés a veleszületett CD8+ T-sejtek és a tirozin-kináz-gátló rezisztencia-mutációk kialakulása között Phi+ hematológiai rosszindulatú daganatokban? (TIPHI)

Az első célzott imatinib-terápiák megjelenése előtt 2000-ben a krónikus myeloid leukémia (CML) volt a legrettegettebb mieloproliferatív szindróma (MPS, Philadelphia+), átlagosan 3 éves túlélési idővel. A tirozin-kináz-gátlókra (TKI-k) nem vagy rosszul reagáló betegek kis százalékától eltekintve a túlélési valószínűség már nagyon közel van az általános populációhoz, ha a betegek élethosszig tartó TKI-terápiában részesülnek (a leukémiás őssejtek alacsony érzékenységűek). a TKI-khoz). Néhány beteg, aki jól reagál a kezelésre, valószínűleg fontolóra veszi a kezelés abbahagyását, de alig több mint 50%-uknak újra kell kezdenie azt. Sok betegnek élete végéig TKI-t kell szednie, ami számos problémát vet fel:

1. - intolerancia a különböző molekulákkal szemben, az egyes molekulák toxicitásától függően,
2. - a TKI-kkel szembeni rezisztencia kialakulása, amelyet a BcrAbl1 fúziós RNS százalékos arányának növekedése jellemez, a kezelés vagy a megemelt dózisok ellenére.

Ezeknek az ellenállásoknak számos oka van, beleértve azokat is, amelyek bármely molekulánál ismertek:

• farmakokinetikai okok, amelyek a molekulák plazma dózisával értékelhetők;
• Leukémiás sejtekkel kapcsolatos okok: a beáramlási pumpa (hOct1) és az efflux pumpák (MDR1) közötti antagonizmustól függően a sejtbe jutás, valamint a BcrAbl1 célponthoz való kötődés kudarca (farmakodinamika), főként az Abl1 tirozin kináz doménjének mutációjával, kivételesen az Abl1 gén amplifikációja.

Ezek a Phi+ akut limfoblasztos leukémia (Phi+ALL) konszolidációs fázisára vonatkoznak.

A BcrAbl1 tirozin kináz doménjének (TKD) mutációi az első vonalbeli kezelésrezisztencia okainak körülbelül 25-30%-áért felelősek, de a 2. vonalbeli kezelés során elérhetik a rezisztencia 50-60%-át is. Ezen mutációk jelenléte megköveteli a molekula, ha lehetséges. Több mint 100 TKD mutációt írtak le. Ezeknek a mutációknak a kialakulása/kiválasztása érinti mind az első generációs TKI-ket (imatinib), mind a második generációs TKI-ket (dasatinib, nilotinib és bosutinib). Még a harmadik generációs TKI-k (ponatinib) esetében is kialakulnak rezisztenciamutációk. Ezért rendelkezésre állnak az érzékenységi profilok, amelyek segítenek kiválasztani a megfelelő molekulákat az első vonalbeli kezelésen túl.

Ezen mutációk közül néhány különösen félelmetes, például a T315I (csak a ponatinibra érzékeny) vagy a T315M vagy az L (rezisztens minden molekulára, beleértve a ponatinibet is). A Nîmes Egyetemi Kórház a 2005-ös STIC program hét központjának egyike, amely a TDK mutációk keresését célozza. 2018-ban 93 különböző mutációt észleltünk 68 rezisztenciamutációval rendelkező betegben, köztük 23 T315I esetet alacsony érzékenységű technikákkal (Sanger szekvenálás).

Mostanra van egy sokkal érzékenyebb módszerünk, amely magában foglalja a következő generációs szekvenálás alkalmazását, és nagyon nagy pontosságú polimeráz láncreakciókkal párosul, amelyek új perspektívákat kínálnak.

A CD8+ T-sejtek klasszikusan részt vesznek a tumor szabályozásában. Ez egy ígéretes új megközelítéshez vezetett a daganatok kezelésében: az immunterápia gátló receptorokat vagy „immunellenőrző pontokat” (például CTLA4, PD1 vagy liganduma, a PDL1) céloz meg. Ezek a negatív visszacsatolási utak hosszan tartó T-sejt-aktivációt követően alakulnak ki. Amikor a T-limfocitákat hosszú ideig stimulálják, elkezdenek kifejezni ezt a típusú receptort a felületükön. Ezek a gátló receptorok gátolják a T-sejtek működését és proliferációját. Az ezeket a receptorokat megcélzó antitestek blokkolják ezt a negatív visszacsatolási útvonalat, ezáltal fokozzák a T-sejt aktivitást. Mivel a tumorantigének ellen irányuló limfociták túlzottan expresszálják ezeket a gátló receptorokat, az őket megcélzó antitestek beadása fokozhatja a daganatellenes immunaktivitást, és egyes betegeknél tumor regressziót válthat ki.

Klasszikusan a T315I típusú mutáció jelenléte a BcrAbl1 arányának robbanásszerű növekedéséhez kapcsolódik, ami a krónikus mieloid leukémia progressziójához kapcsolódik. Ez más mutációk, például az E255K esetében is így volt. Így van néhány „atipikus” T315I-es esetünk, ahol a BcrAbl1 szintje 1% vagy azzal egyenlő, és a T315I százaléka közel 100% több mint egy éven át, vagy olyan betegnél, akinek a BcrAbl1 szintje 1% körüli több mint 1% 2 éves, és 5%-os T315I-t visel.

Úgy tűnik tehát, hogy bizonyos mutációk, például a T315I puszta jelenléte nem magyarázza önmagában a betegség előrehaladását. Ez a robbanásszerű progresszió egy második (legalábbis) leukémiás sejtre jellemző eseményhez, például egy másik gén mutációjához (még nem írták le), vagy a leukémiás sejt környezetéhez, például az immunrendszer általi kontrollhoz köthető.

Ezeknek a TKI-rezisztencia-mutációknak, különösen a T315I-nek az „atipikus” evolúciója, amely olyan gyakori, mint amilyen ijesztő, szabályozható lenne ezekkel a veleszületett CD8+ T-sejtekkel. Ez megmagyarázná az ezeket a mutációkat hordozó klónok jelenlétének hosszú időszakait (legfeljebb 2 évig dokumentálva), anélkül, hogy a betegség előrehaladott volna, kivéve, kizárólag molekuláris szinten, az 1%-hoz közeli BcrAbl1 szintet.

A projekt célja annak tesztelése, hogy a BcrAbl1 alacsony szintje a rezisztencia mutációk jelenléte ellenére összefüggésben van-e a veleszületett CD8+ T-sejtek magas szintjével, feltételezve, hogy ezeknek a sejteknek daganatellenes szerepük van. Ennek a kutatásnak az a célja, hogy megvizsgálja:

• Kapcsolat a veleszületett CD8+ T-sejtek aránya és a Phi+ patológiák (krónikus myeloid leukémia és Philadelphia kromoszóma-pozitív, rezisztencia mutációt hordozó akut limfocitás leukémia (Phi+ ALL) kialakulása között, az ELN 2013 és a PFi-LMC ajánlásai szerint.
• A veleszületett CD8+ T-sejtek szintje és a TKI-rezisztencia klónok terjeszkedése közötti összefüggés, amelyet a mutációt hordozó BcrAbl1 kópiák számaként értékelünk az Abl1 kópiák számához viszonyítva.