病毒激活的杀伤免疫细胞 (VAK) 治疗恶性胸腔和腹腔积液的安全性和有效性研究
2022年9月29日 更新者：Sheng Hu
一项关于病毒激活的杀伤免疫细胞 (VAK) 治疗恶性胸腔和腹腔积液的安全性和有效性的开放标签、随机对照临床研究
VAK理论：
- 癌症受试者的免疫细胞（如T细胞）可能被肿瘤微环境驯化，对癌细胞的杀伤效力较低。 它们可以被病毒抗原重新刺激，并在对受试者进行胸腔注射时发挥强大的肿瘤杀伤作用。
- 释放肿瘤相关抗原可诱导特异性抗肿瘤免疫反应。
VAK的制备：
- 将免疫细胞和肿瘤细胞与恶性胸腔和腹腔积液分离。
- 用灭活的病毒和肿瘤细胞孵育免疫细胞。
- 洗去杂质。
- 胸腔内的免疫细胞给患者
研究概览
详细说明
肿瘤微环境中存在大量处于免疫耐受状态的免疫细胞。 本临床研究的理论基础是利用紫外线灭活的溶瘤单纯疱疹病毒2型（UV-oHSV2）在体外激活恶性胸水和腹水中处于免疫耐受状态的PBMC或免疫细胞，并将激活的免疫细胞回输对患者的外周血或胸腹腔积液进行杀灭恶性胸腹腔积液中的肿瘤细胞，进一步控制恶性胸腹腔积液的体积。
我们的研究表明，UV-oHSV2 有效激活人外周血单核细胞，导致体外和体内抗肿瘤活性增加。 我们还发现UV-oHSV2可以诱导NK细胞（从健康供体的PBMC或患者胸腔积液中分离）增殖，分泌IFN-γ。 我们进一步发现 UV-oHSV2 可以增强 NK 细胞（从健康 PBMC 或患者胸腔积液中分离）的体外和体内抗肿瘤能力。
基于上述研究，我们开展了一项开放、单中心、前瞻性的临床试验，以评价VAK细胞治疗恶性胸腹腔积液的安全性和有效性。
详细协议如下：
从患者的胸腔积液或腹水中分离淋巴细胞：
- 将胸水加入50ml离心管中，400g离心，弃上清。
- 用40ml生理盐水重悬沉淀物并过70μM U.M，然后用5ml生理盐水冲洗细胞滤器一次。
- 弃去细胞滤膜，将过滤后的细胞悬液在离心管中400g离心5min。 离心后，弃去上清液，用 5ml 生理盐水重悬细胞沉淀。
- 使用前将Ficoll倒置混合，取一个新的15ml离心管，加入5ml Ficoll（用注射器吸）。
- 将 5-6ml 细胞悬液轻轻加入 Ficoll 层。
- 离心机400g，30-40min，18℃-20℃，需缓慢升降离心机，关闭急停刹车设置。
- 将中间的白色膜层（淋巴细胞）放入新的离心管中。
- 向吸收的淋巴细胞中加入3倍体积的生理盐水，重悬细胞，400-500g，18℃-20℃离心10-15min。
- 重复洗涤一次，最后的沉淀用5ml无血清培养基（RPMI1640）重悬。
- 取20μL细胞悬液于EP管中，加入等体积的台盼蓝染色液，轻轻吹气，用细胞计数仪计数。
- 在接种分离的免疫细胞过程中，细胞培养密度控制在106以内，并加入10%的自体血浆。
- 取4ml细胞悬液进行分离培养，在剩余的细胞悬液中加入相应量的灭活病毒，感染数MOI=1。 计算公式如下：加入的uv-oh2体积=（1×每孔板或每瓶加入的细胞数/oh2病毒滴度）
- 免疫细胞种植后，置于5% CO2培养箱中36h-48h。
细胞培养后，将制备好的淋巴细胞30-50ML（经PCR无菌检验和内毒素检验合格）分别注入患者胸腹腔。
研究类型
介入性
注册 (预期的)
90
阶段
- 第一阶段早期
联系人和位置
本节提供了进行研究的人员的详细联系信息，以及有关进行该研究的地点的信息。
学习联系方式
- 姓名：Sheng Hu, MD
- 电话号码：15377602179
- 邮箱：ehusmn@163.com
研究联系人备份
- 姓名：Shuang Dong, UK
- 电话号码：15802766720
- 邮箱：dongshuang_2008@163.com
学习地点
-
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Hubei
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Wuhan、Hubei、中国、430079
- 招聘中
- Hubei Cancer Hospital
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接触：
- Sheng Hu, MD
- 电话号码：15377602179
- 邮箱：ehusmn@163.com
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接触：
- Shuang Dong, UK
- 电话号码：15802766720
- 邮箱：dongshuang_2008@163.com
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参与标准
研究人员寻找符合特定描述的人，称为资格标准。这些标准的一些例子是一个人的一般健康状况或先前的治疗。
资格标准
适合学习的年龄
18年 及以上 (成人、年长者)
接受健康志愿者
不
有资格学习的性别
全部
描述
纳入标准：
- 愿意签署知情同意书；
- 病理证实为晚期恶性肿瘤伴有恶性胸腔或腹腔积液；
- 生命体征稳定，东部肿瘤合作组 (ECOG) 表现状态 0-2；
- 年龄≥18岁，性别不限；
- 预计生存期3个月以上；
- 受试者同意在入组时和入组后4个月内采取有效的避孕措施。 女性患者妊娠试验必须为阴性；
足够的骨髓、肝肾功能。 首次用药前7天内的实验室检查符合下列要求：
- 凝血功能：APTT≤1.5×ULN，同时INR或PT≤1.5×ULN（未接受抗凝治疗）； ②血常规检查：Hgb≥80g/L，WBC>3×10^9/L、NEU≥1.0 × 10^9/L、PLT≥80 × 10^9/L；
- 肝功能：总胆红素≤正常值上限（ULN）的1.5倍； AST和alt≤2.5倍ULN（如果肝功能异常主要是肿瘤浸润引起，可≤5倍ULN；碱性磷酸酶≤2.5倍ULN；④肾功能：bun和Cr≤1.5倍ULN，肌酐清除率≥40ml / min（由 Cockcroft Gault 公式计算）。
排除标准：
- 因肠梗阻或血管受压需要紧急治疗的受试者；
- 患有活动性溶血性贫血的受试者；
- 有活动性中枢神经系统转移的受试者除外，有脑转移或脑脊液中发现无症状癌细胞者除外；
- 怀孕或哺乳期女性；
- 全身活动性感染、严重凝血障碍或严重心脏、呼吸系统和免疫系统疾病；
- 先天性或获得性免疫功能缺陷（如HIV感染）、乙型肝炎感染（HBV-DNA≥10^4/ml）、丙型肝炎感染（HCV抗体和HCV RNA阳性）；
- 排除首次用药前4周内发生严重感染的受试者，包括但不限于感染性并发症、菌血症和需住院治疗的重症肺炎；
患有活动性自身免疫性疾病或有可能复发的自身免疫性疾病病史的受试者，但不排除以下情况：
- 1型糖尿病
- 甲状腺功能减退症（如果仅通过激素替代疗法控制）
- 已控制的乳糜泻 ④ 未经全身治疗的皮肤病（如白斑、牛皮癣、脱发） ⑤ 任何其他无外因不复发的疾病。
- 既往对本方案所用药物有严重过敏史者；
- 准备或之前接受过组织/器官移植的受试者；
- 排除大量心包积液的受试者；
- 排除2年内患过其他恶性肿瘤者，除宫颈原位癌、低危胃肠道间质瘤、皮肤基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌、甲状腺乳头状癌、乳腺导管原位癌有效者外已删除；
- 排除首次接种前4周内已接种或将接种活疫苗的受试者；
- 研究者认为不宜进行临床试验的其他情况。
学习计划
本节提供研究计划的详细信息，包括研究的设计方式和研究的衡量标准。
研究是如何设计的？
设计细节
- 主要用途：治疗
- 分配：随机化
- 介入模型：并行分配
- 屏蔽：无（打开标签）
武器和干预
参与者组/臂 |
干预/治疗 |
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实验性的：病毒活化杀伤免疫细胞（VAK）
VAK应每周给药一次，一圈三次。
VAK 可以为每个主题给出 1 或 2 个圆圈。
胸腔积液（30-50mL溶剂中大于10^5/kg细胞）与腹腔积液（30-50mL溶剂中大于10^4/kg细胞）用量不同
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胸腔积液制成的VAK用于治疗恶性胸腔积液。腹腔积液制成的VAK用于治疗恶性腹腔积液。
其他名称：
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安慰剂比较：盐水
生理盐水50ml每周注射1次，3圈。每人注射1～2圈。
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生理盐水的使用同VAK组。
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研究衡量的是什么？
主要结果指标
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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AE 和 SAE 的发生率
大体时间：最后一次治疗后 28 天。
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根据国家癌症研究所 (NCI) 不良事件通用术语标准 (CTCAE) v5.0 分级的不良事件 (AE) 和严重不良事件 (SAE) 的发生率。
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最后一次治疗后 28 天。
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次要结果测量
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
|---|---|---|
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WHO 1997 年恶性胸腔和腹腔积液的 ORR
大体时间：最后一次治疗后 28 天。
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采用螺旋CT机体积软件测量胸腹腔积液量，判断治疗前后胸腹腔积液量的变化。
ORR=PR+CR。
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最后一次治疗后 28 天。
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无进展生存期
大体时间：长达 1 年。
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从治疗第 1 天到死亡或进展的无进展生存期。
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长达 1 年。
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总生存期
大体时间：长达 2 年。
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从治疗第 1 天到死亡的总生存期。
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长达 2 年。
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合作者和调查者
在这里您可以找到参与这项研究的人员和组织。
研究记录日期
这些日期跟踪向 ClinicalTrials.gov 提交研究记录和摘要结果的进度。研究记录和报告的结果由国家医学图书馆 (NLM) 审查，以确保它们在发布到公共网站之前符合特定的质量控制标准。
研究主要日期
学习开始 (实际的)
2020年7月24日
初级完成 (预期的)
2023年12月31日
研究完成 (预期的)
2024年6月30日
研究注册日期
首次提交
2022年9月29日
首先提交符合 QC 标准的
2022年9月29日
首次发布 (实际的)
2022年10月4日
研究记录更新
最后更新发布 (实际的)
2022年10月4日
上次提交的符合 QC 标准的更新
2022年9月29日
最后验证
2022年9月1日
更多信息
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