细菌空气污染

干预 - 在择期手术前的晚上，无菌手术用品将在平静的环境下准备好，手术室只有 2 人（干预）。 此后，将用无菌罩保护无菌物品，等待手术的时间约为 12 小时（干预）。 控制是在早上准备无菌物品，手术室人数较多（约 4-5 人）。 此后，无菌物品将用无菌罩保护（等待手术的时间约为一小时）。 对于分配，将生成计算机生成的随机列表，独立秘书将在有序、密封、不透明的信封中安排显示小组分配的打印说明。

为了测量等待手术的时间，将安排带有血琼脂板的表来测量空气中的细菌污染。 将有两张桌子，一张用无菌罩保护，另一张没有保护罩（在干预组和对照组中）。

结果和材料——主要结果是需氧菌和厌氧菌血琼脂平板（血红素琼脂培养基 4.3% w/v [哥伦比亚血琼脂基础] 补充 6% w/v 巧克力化去纤维蛋白马血）和 FAA 平板（LAB 90）分离的细菌生长苛养厌氧菌琼脂 4.6% w/v 补充有 5% w/v 去纤维蛋白马血）。 次要结果是手术部位感染与细菌类型的比较。

数据收集 - 总共将使用 1260 个血琼脂平板来捕获空气中的细菌污染。 为了捕捉无菌物品在不同制备条件下细菌空气污染的差异，准备开始时，将在桌子上放置六个琼脂板（三个血红素和三个 FAA）。 准备完成后，关闭琼脂平板的盖子，收集琼脂平板。 为了测量手术前空气细菌污染的时间依赖性，新的琼脂平板（三个血红素和三个 FAA）将被放置在干预组和对照组的桌子上，并覆盖无菌布。 为了测量细菌空气污染的无菌覆盖的有效性，在干预组和对照组中，琼脂板将在等待手术时不被覆盖。 当患者准备接受手术时，盖子将被移除，所有的盘子将通过关闭盖子来收集。

微生物学——将根据特定的研究方案，在厄勒布鲁大学医院临床微生物学实验室医学系对这些板进行分析。 血红素板将在 36°C 有氧条件下孵育，而 FAA 板将在厌氧条件（10% H2、10% CO2、80% N2）和 37°C 下孵育。 在有氧培养 24 和 48 小时以及厌氧培养 5 天后，通过计算每个平板的菌落形成单位来定量确定细菌生长。 这些分离株将通过常规诊断程序进行鉴定，并通过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱法（Microflex LT 和 Biotyper 3.1，Bruker Daltonik，德国不来梅）确定物种水平。

葡萄球菌的标准抗生素敏感性试验将通过头孢西丁 (30 mg)、夫西地酸 (10 mg)、红霉素 (15 mg)、克林霉素 (2 mg)、甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲恶唑 (25 mg)、庆大霉素 ( 10 毫克）、诺氟沙星（10 毫克）、环丙沙星（5 毫克）和利福平（5 毫克）（所有抗生素圆片均来自英国贝辛斯托克的 Oxoid），在 Mueller-Hinton II 琼脂 3.8 上含有 0.85% NaCl 中的 0.5 McFarland 细菌悬浮液% w/v 板（BD Diagnostic Systems，Sparks，MD，美国）。 在 35°C 孵育 16-20 小时后，将测量区域直径，并根据欧洲抗微生物药物敏感性测试委员会 (http://www.eucast.org) 评估每个分离物。 对至少三个测试的抗生素组具有耐药性的分离株将被视为多重耐药性。

将使用梯度试验研究痤疮杆菌对苄青霉素和克林霉素的敏感性。 最低抑菌浓度将通过 Etest（bioMe´rieux，Marcy l'Etoile，法国）在 FAA 板（LAB M）上用 0.5 McFarland 细菌悬浮液在 NaCl 中测定，并在 36°C 的厌氧气氛中孵育 24 小时。 对于甲硝唑，将使用圆盘 (Oxoid)。 可以分析细菌基因组测序，以了解细菌是否来自手术室或医院环境中的人。

所有关于术后感染的数据将从当地登记处 Carath、心胸和血管外科部门检索。 病例报告表 (CRF) 将用于收集有关患者特征、手术室设置（例如 温度、空气湿度、人数、开门次数）和手术数据（例如 手术类型、手术时间）。