Bakteryjne zanieczyszczenie powietrza

Interwencja - Wieczorem przed planowaną operacją sterylne materiały chirurgiczne będą przygotowywane w spokojnych okolicznościach z tylko 2 osobami na sali operacyjnej (interwencja). Następnie sterylne towary będą zabezpieczone sterylnymi osłonami, a czas oczekiwania na operację wyniesie około 12 godzin (interwencja). Kontrola polega na przygotowaniu towaru sterylnego rano przy większej liczbie osób na sali operacyjnej (około 4-5 osób). Następnie sterylne towary będą zabezpieczone sterylnymi osłonami (czas oczekiwania na operację wyniesie około godziny). W celu przydzielenia zostanie stworzona wygenerowana komputerowo lista losowa, a niezależny sekretarz ułoży wydrukowane notatki przedstawiające przydział grupowy w uporządkowanych, zapieczętowanych, nieprzejrzystych kopertach.

Do mierzenia czasu trwania operacji ustawione zostaną stoły z płytkami agarowymi z krwią do pomiaru skażenia bakteryjnego powietrza. Będą dwa stoły, jeden zabezpieczony sterylnymi nakryciami i jeden pozostawiony bez nakryć ochronnych (zarówno w grupie interwencyjnej, jak i kontrolnej).

Wyniki i materiały — Głównym wynikiem jest wzrost bakterii wyizolowany przez płytki agarowe z krwią tlenową i beztlenową (pożywka agarowa z hematyną 4,3% w/v [Colombia Blood Agar Base] uzupełniona 6% w/v czekoladową, odwłóknioną krwią końską) i płytki FAA (LAB 90 Fastidious Anaerobe Agar 4,6% w/v uzupełniony 5% w/v odwłóknionej krwi końskiej). Wtórnym wynikiem są zakażenia miejsca operowanego z porównaniem rodzaju bakterii.

Zbieranie danych — Łącznie 1260 płytek z agarem z krwią zostanie użytych do wychwytywania bakteryjnego zanieczyszczenia powietrza. Aby uchwycić różnice w bakteryjnym zanieczyszczeniu powietrza podczas różnych warunków przygotowania produktów sterylnych, na początku przygotowania zostanie ustawionych na stole sześć płytek agarowych (trzy z hematyną i trzy z FAA). Po zakończeniu przygotowania płytki agarowe zostaną zebrane poprzez zamknięcie pokrywy płytek agarowych. Do pomiaru zależnego od czasu skażenia bakteryjnego powietrza oczekującego na operację, nowe płytki agarowe (trzy hematynę i trzy FAA), które zostaną ustawione na stołach zarówno dla grupy interwencyjnej, jak i kontrolnej i przykryte sterylnymi serwetami. Aby zmierzyć skuteczność sterylnego pokrycia z bakteryjnego zanieczyszczenia powietrza, płytki agarowe pozostaną odkryte do czasu operacji, zarówno w grupie interwencyjnej, jak i kontrolnej. Podczas przygotowywania pacjenta do zabiegu osłony zostaną zdjęte, a wszystkie płytki zostaną zebrane poprzez zamknięcie pokrywek.

Mikrobiologia — płytki będą analizowane na Wydziale Medycyny Laboratoryjnej, Mikrobiologii Klinicznej Szpitala Uniwersyteckiego Örebro, zgodnie z określonym protokołem badania. Płytki z hematyną będą inkubowane w 36°C w warunkach tlenowych, podczas gdy płytki FAA będą inkubowane w warunkach beztlenowych (10% H2, 10% CO2, 80% N2) w 37°C. Po 24 i 48 godzinach inkubacji tlenowej i pięciu dniach inkubacji beztlenowej wzrost bakterii zostanie określony ilościowo przez zliczenie jednostek tworzących kolonie na płytkę. Izolaty zostaną zidentyfikowane za pomocą rutynowych procedur diagnostycznych i określone na poziomie gatunku za pomocą spektrometrii masowej czasu przelotu desorpcji/jonizacji laserowej wspomaganej matrycą (Microflex LT i Biotyper 3.1, Bruker Daltonik, Brema, Niemcy).

Standardowe badanie wrażliwości gronkowców na antybiotyki zostanie przeprowadzone za pomocą krążkowego testu dyfuzyjnego dla cefoksytyny (30 mg), kwasu fusydowego (10 mg), erytromycyny (15 mg), klindamycyny (2 mg), trimetoprimu/sulfametoksazolu (25 mg), gentamycyny ( 3,8 % wag./obj. płytki (BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA). Po 16-20 h inkubacji w temperaturze 35°C zostaną zmierzone średnice stref i każdy izolat zostanie oceniony zgodnie z punktami granicznymi Europejskiego Komitetu ds. Testowania Wrażliwości Drobnoustrojów (http://www.eucast.org). Izolaty oporne na co najmniej trzy z badanych grup antybiotyków będą uważane za oporne na wiele leków.

Wrażliwość Cutibacterium acnes na benzylopenicylinę i klindamycynę będzie badana za pomocą testu gradientowego. Minimalne stężenia hamujące zostaną określone za pomocą Etest (bioMerieux, Marcy l'Etoile, Francja) na płytkach FAA (LAB M) z zawiesiną bakterii 0,5 McFarlanda w NaCl i inkubacji w temperaturze 36°C w atmosferze beztlenowej przez 24 godziny. W przypadku metronidazolu zostanie użyty krążek (Oxoid). Sekwencjonowanie genomu bakteryjnego może być analizowane w celu zrozumienia, czy bakteria pochodzi od osób przebywających na sali operacyjnej, czy w środowisku szpitalnym.

Wszystkie dane dotyczące infekcji pooperacyjnych zostaną pobrane z lokalnego rejestru Carath, Oddziału Kardiochirurgii i Chirurgii Naczyniowej. Formularz opisu przypadku (CRF) zostanie wykorzystany do zebrania danych dotyczących charakterystyki pacjenta, ustawień LUB (np. temperatura, wilgotność powietrza, liczba osób, liczba otwarć drzwi) oraz dane operacyjne (np. rodzaj zabiegu, czas zabiegu).