Contaminação bacteriana do ar

Intervenção - Na noite anterior a uma cirurgia eletiva, os materiais cirúrgicos estéreis serão preparados em circunstâncias calmas com apenas 2 pessoas na sala de cirurgia (intervenção). Posteriormente, os bens estéreis serão protegidos com capas estéreis e o tempo até a cirurgia será de aproximadamente 12 horas (intervenção). O controle é preparar os materiais estéreis pela manhã com mais pessoas na sala de cirurgia (aproximadamente 4-5 pessoas). Posteriormente, os produtos estéreis serão protegidos com capas estéreis (o tempo até a cirurgia será de aproximadamente uma hora). Para a alocação, uma lista de randomização gerada por computador será produzida e uma secretária independente organizará as notas impressas mostrando a atribuição do grupo em envelopes ordenados, selados e não transparentes.

Para medir o tempo de espera da cirurgia, as mesas serão dispostas com placas de ágar sangue para medir a contaminação bacteriana do ar. Haverá duas mesas, uma protegida com capas estéreis e outra deixada sem capas protetoras (tanto no grupo intervenção quanto no grupo controle).

Resultados e materiais - O resultado primário é o crescimento bacteriano isolado por placas de ágar de sangue aeróbios e anaeróbicos (meio de ágar hematina 4,3% p/v [Colombia Blood Agar Base] suplementado com 6% p/v de sangue de cavalo desfibrinado achocolatado) e placas FAA (LAB 90 Fastidious Anaerobe Agar 4,6% p/v suplementado com 5% p/v de sangue de cavalo desfibrinado). O desfecho secundário é a infecção do sítio cirúrgico com comparação do tipo de bactéria.

Coleta de dados - Um total de 1260 placas de ágar sangue serão usadas para capturar a contaminação bacteriana do ar. Para capturar diferenças na contaminação bacteriana do ar durante diferentes condições de preparação dos produtos estéreis, seis placas de ágar (três de hematina e três de FAA) serão colocadas em uma mesa quando a preparação começar. Terminada a preparação, as placas de ágar serão recolhidas, fechando a tampa das placas de ágar. Para medir a contaminação do ar bacteriana dependente do tempo durante a cirurgia, novas placas de ágar (três hematina e três FAA) que serão colocadas em mesas para os grupos de intervenção e controle e cobertas com campos estéreis. Para medir a eficácia da cobertura estéril da contaminação bacteriana do ar, as placas de ágar serão deixadas descobertas até a cirurgia nos grupos de intervenção e controle. Ao preparar o paciente para a cirurgia, as tampas serão removidas e todas as placas serão coletadas fechando as pálpebras.

Microbiologia - As placas serão analisadas no Departamento de Medicina Laboratorial, Microbiologia Clínica, Hospital Universitário de Örebro, de acordo com um protocolo de estudo específico. As placas de hematina serão incubadas a 36°C em condições aeróbias enquanto as placas de FAA serão incubadas em condições anaeróbias (10% H2, 10% CO2, 80% N2) a 37°C. Após 24 e 48 h de incubação aeróbia e cinco dias de incubação anaeróbia, o crescimento bacteriano será determinado quantitativamente pela contagem de unidades formadoras de colônias por placa. Os isolados serão identificados por procedimentos diagnósticos de rotina e determinados em nível de espécie via espectrometria de massa com tempo de vôo de dessorção/ionização a laser assistida por matriz (Microflex LT e Biotyper 3.1, Bruker Daltonik, Bremen, Alemanha).

O teste padrão de suscetibilidade a antibióticos para estafilococos será realizado pelo teste de difusão em disco para cefoxitina (30 mg), ácido fusídico (10 mg), eritromicina (15 mg), clindamicina (2 mg), trimetoprim/sulfametoxazol (25 mg), gentamicina ( 10 mg), norfloxacina (10 mg), ciprofloxacina (5 mg) e rifampicina (5 mg) (todos os discos de antibióticos da Oxoid, Basingstoke, Reino Unido) com uma suspensão bacteriana McFarland 0,5 em NaCl 0,85% em ágar Mueller-Hinton II 3,8 % p/v de placas (BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, EUA). Após 16-20 h de incubação a 35°C, os diâmetros das zonas serão medidos e cada isolado será avaliado de acordo com os pontos de corte do European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (http://www.eucast.org). Isolados resistentes a pelo menos três dos grupos de antibióticos testados serão considerados multirresistentes.

A suscetibilidade de Cutibacterium acnes à benzilpenicilina e clindamicina será investigada por meio de um teste de gradiente. As concentrações inibitórias mínimas serão determinadas por Etest (bioMérieux, Marcy l'Etoile, França) em placas FAA (LAB M) com suspensões de bactérias 0,5 McFarland em NaCl e incubação a 36°C em atmosfera anaeróbia por 24 h. Para o metronidazol será utilizado um disco (Oxoid). O sequenciamento genômico bacteriano pode ser analisado para entender se a bactéria provém das pessoas dentro da sala de cirurgia ou do ambiente hospitalar.

Todos os dados relativos a infecções pós-operatórias serão obtidos de um registro local de Carath, Departamento de Cirurgia Cardiotorácica e Vascular. Um formulário de relato de caso (CRF) será usado para coletar dados sobre as características do paciente, OU configurações (por exemplo, temperatura, umidade do ar, número de pessoas, número de aberturas de portas) e dados cirúrgicos (ex. tipo de cirurgia, tempo para cirurgia).